本发明提供了一种L‑氨基酸连接酶的制备方法及其在二肽合成上的应用。其中,二肽合成方法包括利用如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的L‑氨基酸连接酶进行二肽合成反应,得到二肽。利用本申请的L‑氨基酸连接酶,能够进行多种功能二肽的合成,底物谱较广,且合成效率较高,能够较好地用于工业放大,成本低,收率高,实现了真正的绿色化学。
本发明提供了一种α‑氨基酸脂酰基转移酶的制备方法及其在二肽合成上的应用。其中,二肽合成的方法包括:利用α‑氨基酸脂酰基转移酶进行二肽合成反应,得到二肽;其中,α‑氨基酸脂酰基转移酶具有如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的保守区域。利用本申请的α‑氨基酸脂酰基转移酶,能够进行多种功能二肽的合成,底物谱较广,且部分酶的合成效率较高,能够较好地用于工业放大,成本低,收率高,实现了真正的绿色化学。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变为:C60Y+F164V+F176Y、C60Y+F176S+F164V、C60Y+F164V、C60Y+F164V+A436P、C60Y+F164V+A436N、C60Y+F164V+A436Y、C60Y+F164V+A436Q、C60Y+F164V+A436E、W86P+F164V、F25T+F164V、F164V+M437A、I8S+F164V或I45W+F164V。突变体的应用可以提高反应速率,提高酶稳定性,减少了酶用量,降低了后处理的难度,使得其能够适合工业化生产。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变至少包括如下突变位点之一:C60Y、F164V和第442位突变。突变体的应用可以提高反应速率,提高酶稳定性,减少了酶用量,降低了后处理的难度,使得其能够适合工业化生产。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变至少包括如下突变位点之一:C60Y、F164V和第370位突变。突变体的应用可以提高反应速率,提高酶稳定性,减少了酶用量,降低了后处理的难度,使得其能够适合工业化生产。
本发明提供了一种转氨酶突变体及其应用。其中,转氨酶突变体在SEQ ID NO:1所示序列基础上发生氨基酸突变,氨基酸突变为W60Y、Y168A、V379W、V379L、V379M、C418Q及C418W的单点突变或组合突变,这些转氨酶突变体的活性、稳定性、对温度、pH及有机溶剂耐受性提高,解决了现有技术中转氨酶在极端环境中的耐受性差的问题,适用于酶工程领域。
本发明提供了一种酰胺酶突变体及其应用,包括:(a)具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的蛋白质;或(b)在(a)中所示氨基酸序列的如下至少一个位点:L81、E62、M311、N180、P121、R58、E32、T230、N82、N190、D192、D217、H219、K77、M78、P79、F80、F61、D185、D59、L182、T183、P184、I227、C228、G229、A231或V232,经过氨基酸突变且具有酰胺酶功能的蛋白质;或(c)与(a)和(b)中任一项限定的氨基酸序列具有80%以上同源性且具有酰胺酶功能的蛋白质。能够解决现有技术中酰胺酶立体选择性和催化活性不高的问题,适用于酶催化领域。