一种真核重组质粒,由序列表中SEQ ID NO:1所述基因和改造后的真核表达载体构成。一种真核重组质粒的制备方法,步骤为:(1)根据GeneBank中的序列X95261和Sol genomics network中的序列SL2.40sc03685设计PCR特异引物,从番茄幼果中提取总DNA,利用PCR技术从番茄中分离得到一个核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO:3所述的启动子;(2)将步骤(1)得到的启动子替换原始真核表达载体中的35S启动子,得到改造后的真核表达载体;(3)将序列表中SEQ ID NO:1所述基因连接到改造后的真核表达载体上,即获真核重组质粒。所述真核重组质粒可在提高果实硬度和延长果实货架期中应用。
一种真核重组质粒,由序列表中SEQ ID NO.1所示人FBXL20基因的核苷酸序列中的CY-FBXL20片段与真核载体构建而成,所述CY-FBXL20片段是起始密码子下游10045bp至10063bp一种真核重组质粒的制备方法,依次包括以下步骤:(1)通过RNA固相合成法,获得人FBXL20基因中的CY-FBXL20片段的RNAi片段;(2)将所述CY-FBXL20片段的RNAi片段插入到真核载体构建真核重组质粒,该插入片段的酶切位点分别为BamI和BbsI,再将所述真核重组质粒转化至感受态细菌中进行培养,然后筛选出含有正确插入片段的克隆;(3)使用碱裂解法抽提所构建的真核重组质粒,利用限制性内切酶酶切图谱分析所构建的真核重组质粒所述真核重组质粒可在制备治疗喉鳞癌的药物中的应用。