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[发明专利]重组火鸡疱疹病毒活载体疫苗及其应用-CN202211692459.3在审
发明人：李泽君;刘芹防;张志飞 -专利权人：中国农业科学院上海兽医研究所
申请日： 2022-12-28 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： A61K39/255 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组火鸡疱疹病毒活载体疫苗，所述活载体疫苗包含H9亚型禽流感病毒HA基因和传染性法氏囊病病毒VP2基因，并稳定表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白和传染性法氏囊病病毒VP2蛋白。本发明还公开了上述重组火鸡疱疹病毒活载体疫苗的应用。本发明的重组火鸡疱疹病毒活载体疫苗，在免疫动物体内，可以诱导良好的免疫应答，具有血清Ⅲ型MDV疫苗株的弱毒特征，可作为禽流感、传染性法氏囊病和马立克氏病三价活载体疫苗，具有很好的应用前景。
重组火鸡疱疹病毒载体疫苗及其应用

[发明专利]猪源启动子蛋白表达载体及其构建方法与应用-CN201010261045.6有效
发明人：崔尚金;刘芹防;刘珊珊;张超范 -专利权人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
申请日： 2010-08-24 - 公布日： 2011-01-19 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了猪源启动子蛋白表达载体及其构建方法与应用。本发明表达载体为环状，包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒，所述外源基因表达盒自上游至下游依次由转录启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成；所述转录启动子是MLP6启动子。本发明表达载体可在猪类细胞中高效表达外源蛋白，因含有一个真核复制起点，可在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达水平。本发明利用同源重组构建表达外源基因的重组载体，避免了传统的酶切，连接等环节，比传统的连接过程省略了2-3个步骤。使用本发明载体构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效，可以快速完成大量外源基因的表达载体的构建。
启动子蛋白表达载体及其构建方法应用

[发明专利]禽源启动子表达载体及其构建方法与应用-CN200910076382.5无效
发明人：刘金华;马婧姣;刘芹防;蒲娟;毕玉海;傅光华 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2009-01-14 - 公布日： 2009-07-15 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种禽源启动子表达载体及其构建方法与应用。该禽源启动子表达载体是一种环状载体，包含原核复制起点、一个真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次含有LTR启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号；所述LTR启动子的核苷酸序列为序列表中序列1自5′末端第1-607位；所述连接片段含有EcoRV识别序列。使用本发明的pAPP-Vector构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效，可以快速完成大量外源基因的表达载体的构建。将在转基因动物研究中发挥重要作用。
启动子表达载体及其构建方法应用

[发明专利]融合表达绿色荧光蛋白的表达载体及其构建方法与应用-CN200910077103.7无效
发明人：刘金华;刘芹防;马婧姣;蒲娟 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2009-01-15 - 公布日： 2009-06-24 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种融合表达绿色荧光蛋白的表达载体及其构建方法与应用。该载体是一种环状载体，包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和绿色荧光蛋白基因表达盒；所述绿色荧光蛋白基因表达盒自上游至下游依次由两个转录方向相同的启动子、连接片段、绿色荧光蛋白编码区基因和多聚腺苷酸加尾信号组成；所述绿色荧光蛋白编码区基因缺失起始密码子，所述连接片段含有EcoRV识别序列，所述绿色荧光蛋白编码区基因自5’末端第1位和第2位与EcoRV识别序列自5’末端的最后两位重叠；所述连接片段含有或不含有起始密码子；当所述连接片段含有起始密码子时，所述起始密码子与所述EcoRV识别序列自5’末端第一位间隔2+3n或1+3n位，n为正整数。该载体含有绿色荧光蛋白基因，且只有在插入的外源基因正确表达的情况下才能表达，从而可以有效的排除出发载体表达荧光而出现的干扰问题。
融合表达绿色荧光蛋白载体及其构建方法应用

[发明专利]双表达盒的表达载体及其制备方法与应用-CN200910076381.0无效
发明人：刘金华;刘芹防;马婧姣;蒲娟;傅光华;毕玉海 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2009-01-14 - 公布日： 2009-06-24 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种双表达盒的表达载体及其制备方法与应用。该表达载体是一种环状载体，包含原核复制起点、两个真核复制起点、筛选标记基因和两个外源基因表达盒；所述两个外源基因表达盒分别为外源基因表达盒1和外源基因表达盒2；所述外源基因表达盒1自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段1和多聚腺苷酸加尾信号，所述连接片段1含有EcoRV识别序列；所述外源基因表达盒2自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段2和多聚腺苷酸加尾信号，所述连接片段2含有StuI识别序列。本发明的pDP-EX-vector含有两个外源基因表达盒、两个真核复制起点，可以在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达的水平，具有很好的应用前景。
表达载体及其制备方法应用

[发明专利]A型流感病毒核蛋白捕获ELISA抗原诊断试剂盒及专用单克隆抗体-CN200810117227.9无效
发明人：刘金华;阎春梅;马广鹏;蒲娟;刘芹防 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2008-07-25 - 公布日： 2009-01-21 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种A型流感病毒核蛋白捕获ELISA抗原诊断试剂盒及专用单克隆抗体。该抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体，是由保藏号为CGMCC No.2575的对A型流感病毒NP蛋白杂交瘤细胞株C4分泌产生的。该试剂盒，包括已包被所述的单克隆抗体的固体载体和酶标记的所述的单克隆抗体。本发明的抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体效价和特异性高。所述的试剂盒操作简单，敏感性高，特异性强，可用于A型流感病毒临床检测和实验室检测，具有很高的应用价值。
流感病毒核蛋白捕获 elisa 抗原诊断试剂盒专用单克隆抗体

[发明专利]一种真核表达穿梭载体及其构建方法与应用-CN200810119704.5无效
发明人：刘金华;刘芹防;马广鹏;蒲娟;王帅 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2008-09-05 - 公布日： 2009-01-14 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种真核表达穿梭载体及其构建方法与应用。所述的真核表达穿梭载体，是一种环状载体，包含原核复制起点、两个真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次由两个转录方向相同的启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成；所述连接片段含有EcoRV识别序列。用本发明的真核表达穿梭载体构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效，并且该载体含有两个真核复制起点，可以在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达的水平。本发明的真核表达穿梭载体具有很好的应用前景。
一种表达穿梭载体及其构建方法应用

[发明专利]用于构建流感病毒的反向遗传系统的载体及应用-CN200810119705.X无效
发明人：刘金华;刘芹防;马广鹏;蒲娟;王帅 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2008-09-05 - 公布日： 2009-01-14 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于构建流感病毒的反向遗传系统的载体及应用。所述载体为环状载体，包含原核复制起点、筛选标记基因、多聚腺苷酸加尾信号和两个转录方向相同的启动子，所述多聚腺苷酸加尾信号位于所述两个转录方向相反的启动子的下游，其中，所述两个转录方向相同的的启动子和所述多聚腺苷酸加尾信号之间含有pol I元件，所述pol I元件自上游至下游依次为RNA聚合酶I启动子、连接片段和RNA聚合酶I终止子，所述连接片段含有如下1)或2)的序列：1)GGGGAGCGAAAGCAGG；2)GGTTATTAGTAGAAACAA GG。所述载体可用来构建流感病毒反向遗传系统质粒，用于病毒拯救。
用于构建流感病毒反向遗传系统载体应用

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