本发明实施例公开了犬传染性肝炎病毒六邻体蛋白抗原、截短体及其应用。如下M1)所示的蛋白质:M1)犬传染性肝炎病毒六邻体蛋白自N端起第118‑481位氨基酸;所述犬传染性肝炎病毒六邻体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明实施例根据已有和预测的蛋白质三维结构,对犬传染性肝炎病毒蛋白的结构进行了分析,选择稳定性较好的片段,使用原核表达系统进行表达,经过免疫学实验验证,该抗原蛋白可以很好地结合犬传染性肝炎病毒蛋白抗体,利用该抗原制备的抗体检测试剂盒效果好、成本更低、特异性和稳定性强。
本发明公开了犬I型腺病毒亚单位疫苗及其制备方法。本发明提供了具有免疫原性的抗原蛋白,该抗原蛋白由犬I型腺病毒五邻体基底基因节段编码,编码基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1所示,所编码蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No.2所示。该抗原蛋白免疫性强,安全性好,能够有效保护犬抵御I型腺病毒的攻击,可以不用添加免疫佐剂,直接将该抗原蛋白作为犬I型腺病毒亚单位疫苗进行使用,注射小鼠体后能显著提高小鼠血清中特异性抗体ELISA效价,病毒中和抗体效价,提高脾脏T淋巴细胞增殖活性,证明抗原蛋白具有较好的免疫原性。用本发明亚单位疫苗免疫狐狸30天后攻毒CAdV‑1,狐狸的存活率为100%。
本发明公开了用于检测血清4型禽腺病毒的重组蛋白在制备ELISA检测试剂盒中的应用。具体地公开了氨基酸序列是SEQ ID No.1的重组蛋白22K、及其作为检测抗原在制备用于检测血清4型禽腺病毒的产品中的应用。本发明还公开了FAdV‑4抗体检测试剂盒及ELISA检测方法。本发明的重组蛋白与FAdV‑4阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性,利用该重组蛋白建立的检测试剂盒与方法特异性强,无交叉反应,灵敏度高,重复性好,同时可区分灭活苗免疫动物和自然感染产生抗体的动物,能够鉴别FAdV‑4感染,为FAdV‑4的净化提供技术支持,为HHS疫病的防控提供可靠、有效的手段。
本发明公开了用于检测血清4型禽腺病毒的重组蛋白、试剂盒及ELISA检测方法。具体地公开了氨基酸序列是SEQ ID No.1的重组蛋白100K(672‑1053)、及其作为检测抗原在制备用于检测血清4型禽腺病毒的产品中的应用。本发明还公开了FAdV‑4抗体检测试剂盒及ELISA检测方法。本发明的重组蛋白与FAdV‑4阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性,利用该重组蛋白建立的检测试剂盒与方法特异性强,无交叉反应,灵敏度高,重复性好,同时可区分灭活苗免疫和自然感染产生抗体的动物,能够鉴别FAdV‑4感染,为FAdV‑4的净化提供技术支持,为HHS疫病的防控提供可靠、有效的手段。