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[发明专利]一种禽源沙门氏菌的氯抗性评价方法及其应用-CN202210024271.5在审
发明人：汪雯;肖兴宁;肖英平;王盛;吕文涛;杨华 -专利权人：浙江省农业科学院
申请日： 2022-01-07 - 公布日： 2023-01-03 - 主分类号： C12Q1/10 文献下载
摘要：本发明提供的禽源沙门氏菌的氯抗性的评价方法及其应用，能够快速、准确的评价待测菌株的氯抗性强弱，及筛选出对氯抗性待测菌株产生交叉耐药的抗生素，为提高禽类的食用安全性保驾护航。
种禽沙门氏菌抗性评价方法及其应用

[发明专利]一种α-淀粉酶抑制剂产生菌的筛选方法-CN201210224287.7有效
发明人：郑裕国;王远山;冯志华;薛亚平;王亚军;沈寅初 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2010-12-25 - 公布日： 2013-01-09 - 主分类号： C12Q1/40 文献下载
摘要：本发明公开了一种α-淀粉酶抑制剂产生菌的筛选方法，所述方法为：待筛选菌株依次接种到平皿培养基、斜面培养基、发酵培养基中培养，收集得到发酵液，取发酵液离心，取上清液用水稀释10-100倍，即为待测样品，在96板孔内分别加入0.1U/ml的唾液淀粉酶30 μl， 5 mmol/l 的Gal-G2-α-CNP 40 μl，磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液90 μl（50 mmol/l，pH 6.0），40 μl待测样品对照组为用等体积的缓冲溶液代替待测样品。用酶标仪于405 nm处检测Abs405，每5秒钟读一次数，直至Abs405不再增加。将Abs405相对于对照组降低30%以上的样品孔标记为阳性菌株，并保存阳性菌株。本发明提供的筛选方法简单有效，可以在短时间内筛选大量样品，灵敏度高，提高了检测效率。
一种淀粉酶抑制剂产生筛选方法

[发明专利]一种快速检测待测菌株生产E4P能力的方法及其使用的生物传感器-CN201911372860.7有效
发明人：张大伟;丁冬芹;柏丹阳 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-12-27 - 公布日： 2021-11-05 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速检测待测菌株生产E4P能力的方法及其使用的生物传感器。本发明的发明人经过大量实验，对现有的T0蛋白进行突变，制备了一系列可与E4P结合且与E4P的亲和力高于T0蛋白的蛋白质，并用这些蛋白质制备可以快速检测待测菌株生产E4P能力的生物传感器。该生物传感器可以用于筛选与生产E4P或E4P的下游产物的菌株。本发明具有重要的应用价值。
一种快速检测菌株生产 e4p 能力方法及其使用生物传感器

[发明专利]一种高通量筛选具有潜在生物防腐功能活性菌株的装置及方法-CN202011546898.4在审
发明人：吴清平;何莹龙;庞锐;张菊梅;莫树平;柏建玲;丁郁;王涓;薛亮;陈谋通;谢新强 -专利权人：广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）;广东环凯生物科技有限公司
申请日： 2020-12-24 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种高通量筛选抑菌活性菌株的装置，包括一个透明器皿(1)和一个多孔细胞培养板(2)，所述细胞培养板均匀分布有培养深孔，所述培养深孔的底部(3)中空，所述多孔细胞培养板(2)放置于透明器皿(1)中，细胞培养板底部(3)与透明器皿内壁底部之间保留距离，二者之间相互不接触；所述透明器皿用于盛装含有指示菌的固体培养基(4)，所述多孔细胞培养板用于盛装待测菌株的培养上清液；当透明器盛装含有指示菌的琼脂培养基时本发明装置中的多孔细胞培养板可同时高通量的用于多个菌株的抑菌活性检测，不限于细胞培养板的孔数，可根据实际需要制备多个培养孔，每个孔检测一个待测菌株。本发明还可以灵活的更换指示菌，快速的检测出待测菌的抗菌谱。
一种通量筛选具有潜在生物防腐功能活性菌株装置方法

[发明专利]一种抑制病原菌的潜在益生菌株的快速筛选方法-CN201911005093.6在审
发明人：李锋;单明旭;谢英杰;杨春旭;单安山 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2019-10-22 - 公布日： 2020-02-04 - 主分类号： C12Q1/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种对致病性细菌具有抑菌活性的菌株筛选方法，如下：将冻存致病性指示菌活化、富集培养后制成指示菌液；取待筛选供试菌株，活化培养，收集上清液，制成待筛选供试菌上清液；取过滤后的待筛选供试菌上清液与指示菌液等量混合为待测样品组，加入到细胞培养板中，以指示菌液与灭菌PBS溶液的混合物作为阳性对照组，液体培养基为阴性对照组；利用酶标仪对混合待测样品的吸光度值进行测定，以灭菌PBS溶液与指示菌液混合作为对照，抑菌活性即抑菌率为：
抑菌活性指示菌液上清液抑菌筛选待测样品灭菌细胞培养板阳性对照组液体培养基阴性对照组致病性细菌大小判断等量混合富集培养活化培养菌株筛选时间减少混合物酶标仪吸光度样本量指示菌致病性冻存活化菌株过滤强弱检测

[发明专利]一种评估致病力强度的报告体系-CN202310039660.X在审
发明人：江高飞;韦中;张艺;徐阳春;沈其荣 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2023-01-11 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：/base:Italic>分别连接到pUC18‑mini‑Tn7T‑Gm质粒上，通过电激转入OE1‑1‑dphcB后，利用PCR反应筛选构建成功的菌株即为报告菌株本发明将报告菌株与待测菌株共培养进行β‑半乳糖苷酶活实验，检测xpsR表达情况；xpsR表达情况与lacZ表达呈正相关关系，待测青枯菌株致病力越强，则β‑半乳糖苷酶活性越强，生化实验反应液显色越明显。
一种评估致病强度报告体系

[发明专利]一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法及其设备-CN201410038130.4无效
发明人：佟雪梅 -专利权人：佟雪梅
申请日： 2014-01-26 - 公布日： 2014-04-16 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：中度敏感菌和耐药菌进行抗生素诱导；提取细胞内代谢产物；对细胞内代谢产物进行质谱分析，得到质谱图；将质谱图所含有的信息转化为特征峰形式并将其对应的代谢物波峰值进行聚类分析，分别得到敏感、中度敏感和具有耐药性的菌株的聚类图谱，去掉分类错误的菌株，保存得到数据库；同样的步骤处理待测菌，将待测菌的代谢物波峰值与已得到的数据库合并，重新进行分类，得到待测菌在聚类图谱中的位置，由此得到待测菌的抗生素敏感性。
一种细菌抗生素敏感性鉴定方法及其设备

[发明专利]一种微生物传感器的构建方法及其应用方法-CN201910376520.5在审
发明人：吕雪飞;张静;邓玉林;陶慧;杨元展 -专利权人：北京理工大学
申请日： 2019-05-07 - 公布日： 2019-07-12 - 主分类号： G01N33/533 文献下载
摘要：本发明提供了一种微生物传感器的构建方法及应用方法，步骤一构建待测氨基酸缺陷型菌株；步骤二截取LuxI/LuxR循环放大线路所需目的基因片段连接，得到含有基于LuxI/LuxR系统的循环放大线路的质粒，将重组质粒转化到氨基酸缺陷型菌株中，使报告基因片段重复表达；步骤三将菌株培养至对数生长期，在培养基中饥饿培养。本发明利用循环放大待测氨基酸缺陷型菌株作为微生物传感器，以与蛋白质标志物具有高特异性和高亲和力结合的核酸适配体作为“桥梁”，将对蛋白标志物的检测转化为对待测氨基酸的检测，利用构建的微生物传感器实现了对大分子生物标志物的检测
微生物传感器构建氨基酸缺陷菌株放大检测蛋白质标志物重组质粒转化大分子生物蛋白标志物对数生长期核酸适配体报告基因定量检测放大系统高亲和力饥饿培养菌株培养目的基因片段连接片段重复培养基标志物灵敏度氨基酸截取质粒应用桥梁转化

[发明专利]一种核酸以及鉴定真菌菌株致病型的方法和试剂盒-CN201210052204.0有效
发明人：戴小枫;李蕾;陈捷胤;王金龙;陈相永;柳少燕 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2012-03-01 - 公布日： 2013-08-14 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法，所述真菌菌株为大丽轮枝菌，该方法包括以下步骤：(1)制备含有大丽轮枝菌的全基因组DNA的待测样本；(2)检测所述待测样本中是否存在第一分子标记，所述第一分子标记为如上所述的核酸；(3)根据步骤(2)的检测结果判断大丽轮枝菌菌株的致病型。
一种核酸以及鉴定真菌菌株致病方法试剂盒

[发明专利]核酸以及鉴定真菌菌株致病型的方法和试剂盒-CN201210052313.2有效
发明人：戴小枫;陈相永;李蕾;柳少燕;王金龙;陈捷胤;田李 -专利权人：中国农业科学院作物科学研究所
申请日： 2012-03-01 - 公布日： 2013-08-14 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法，所述真菌菌株为大丽轮枝菌，该方法包括以下步骤：(1)制备含有大丽轮枝菌的全基因组DNA的待测样本；(2)检测所述待测样本中是否存在第一分子标记，所述第一分子标记为如上所述的核酸；(3)根据步骤(2)的检测结果判断大丽轮枝菌菌株的致病型。
核酸以及鉴定真菌菌株致病方法试剂盒

[发明专利]核盘菌群体中抗药性基因频率的高通量实时检测技术-CN200810235086.0无效
发明人：周明国;陈长军;王建新 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2008-11-17 - 公布日： 2009-07-08 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：该检测方法共分3个主要步骤，第一步：分别提取已知抗药性菌株、敏感性菌株和待测样品的核基因组DNA；第二步：运用抗药性菌株和核盘菌菌株的特异性检测引物，进行实时定量PCR反应，分别建立抗药性菌株和核盘菌菌株检测的标准曲线；第三步：待测样品分别运用上述两种特异性引物进行实时定量PCR反应，对照已经建立好的两个标准曲线，求出相应的抗药性菌株和敏感性菌株的数量和抗药性菌株在核盘菌总量中的比例。比常规的生物测定和普通的PCR检测抗药性菌株省时、节本、快速。直接从田间采集回来的菌核、病斑和孢子中提取基因组DNA到实时定量-PCR整个检测过程只需6h，检测准确率达96％以上。
盘菌群体抗药性基因频率通量实时检测技术

[发明专利]鉴定大丽轮枝菌致病型的方法和试剂盒及含有的核酸和引物对-CN201310587125.4有效
发明人：戴小枫;李蕾;陈捷胤;马雪峰;孔志强;包郁明;肖红利;桂月晶;徐明 -专利权人：中国农业科学院农产品加工研究所
申请日： 2013-11-20 - 公布日： 2014-02-12 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法，所述真菌菌株为大丽轮枝菌，该方法包括以下步骤：（1）制备含有大丽轮枝菌的全基因组DNA的待测样本；（2）以步骤（1）中得到的全基因组DNA待测样本为模板，使用如上所述的引物对进行PCR扩增；检测扩增产物中是否存在SEQ ID NO：4所示的核酸；（3）根据步骤（2）的检测结果判断大丽轮枝菌菌株的致病型，在所述扩增产物中不存在SEQ ID No：4所示的核酸的情况下，则指示所述大丽轮枝菌的菌株属于高致病型；在所述扩增产物中存在SEQ ID NO：4所示的核酸的情况下，则指示该大丽轮枝菌的菌株不属于高致病型。
鉴定大丽轮枝菌致病方法试剂盒有的核酸引物

[发明专利]一种鉴定大丽轮枝菌弱致病型的核酸和引物对及试剂盒-CN201310587324.5有效
发明人：戴小枫;李蕾;陈捷胤;马雪峰;孔志强;包郁明;祁伟彦;桂月晶;肖红利 -专利权人：中国农业科学院农产品加工研究所
申请日： 2013-11-20 - 公布日： 2014-02-26 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法，所述真菌菌株为大丽轮枝菌，该方法包括以下步骤：（1）制备含有大丽轮枝菌的全基因组DNA的待测样本；（2）以步骤（1）中得到的全基因组DNA待测样本为模板，使用如上所述的引物对进行PCR扩增；检测扩增产物中是否存在SEQ ID NO：4所示的核酸；（3）根据步骤（2）的检测结果判断大丽轮枝菌菌株的致病型，在所述扩增产物中不存在SEQ ID No：4所示的核酸的情况下，则指示所述大丽轮枝菌的菌株属于高致病型；在所述扩增产物中存在SEQ ID NO：4所示的核酸的情况下，则指示该大丽轮枝菌的菌株不属于高致病型。
一种鉴定大丽轮枝菌弱致病核酸引物试剂盒

[发明专利]核酸和引物对以及鉴定大丽轮枝菌致病型的方法和试剂盒-CN201310587121.6有效
发明人：戴小枫;李蕾;陈捷胤;包郁明;孔志强;马雪峰;桂月晶;肖红利;王新艳 -专利权人：中国农业科学院农产品加工研究所
申请日： 2013-11-20 - 公布日： 2014-02-26 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法，所述真菌菌株为大丽轮枝菌，该方法包括以下步骤：（1）制备含有大丽轮枝菌的全基因组DNA的待测样本；（2）以步骤（1）中得到的全基因组DNA待测样本为模板，使用如上所述的引物对进行PCR扩增；检测扩增产物中是否存在SEQ ID NO：4所示的核酸；（3）根据步骤（2）的检测结果判断大丽轮枝菌菌株的致病型，在所述扩增产物中不存在SEQ ID No：4所示的核酸的情况下，则指示所述大丽轮枝菌的菌株属于高致病型；在所述扩增产物中存在SEQ ID NO：4所示的核酸的情况下，则指示该大丽轮枝菌的菌株不属于高致病型。
核酸引物以及鉴定大丽轮枝菌致病方法试剂盒

[发明专利]一种香菇病毒快速检测试剂盒及其检测方法-CN202111612962.9有效
发明人：徐章逸;刘贤伟;边银丙 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：一种香菇病毒快速检测方法，包括以下步骤：S1提取待测供试菌株总RNA；S2多重RT‑PCR扩增：将S1获取的RNA稀释到RNA检测浓度，采用所述的香菇病毒快速检测试剂盒，进行多重RT‑PCR扩增；S3将S2获得的多重RT‑PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳和/或测序，获取待测供试菌株带毒结果。本发明提供的香菇病毒快速检测方法具有特异性好、适用性好的特点，可以同时检测单一菌株或混合菌株中的四种病毒。
一种香菇病毒快速检测试剂盒及其方法