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[发明专利]一种以人复制缺陷腺病毒为载体的埃博拉病毒病疫苗-CN201610067289.8有效
发明人：陈薇;吴诗坡;侯利华;宋小红;张金龙;付玲 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所
申请日： 2016-01-31 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： C12N15/40 文献下载
摘要：本发明公开了埃博拉病毒GP蛋白密码子优化的一种核苷酸序列，还公开了能够表达该核苷酸序列的人复制缺陷重组腺病毒及在制备预防埃博拉病毒病疫苗中的应用。所述核苷酸序列以E1、E3联合缺失的复制缺陷型人5型腺病毒为载体，以整合腺病毒E1基因的HEK293细胞为包装细胞系，携带的保护性抗原基因是密码子优化后的Zaire型埃博拉病毒Makona株包膜糖蛋白基因所述核苷酸以腺病毒为载体作为埃博拉病毒病疫苗免疫动物后，能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞及体液免疫反应。该疫苗制备方法简单，可在短期内大规模生产，用于应对突发埃博拉疫情和生物恐怖袭击。
一种复制缺陷病毒载体埃博拉疫苗

[发明专利]一种重组腺病毒的表达载体SAd23-L-CN201811139300.2在审
发明人：罗升学;刘博超;马晓瑞;张攀丽 -专利权人：广州佰芮慷生物科技有限公司
申请日： 2018-09-28 - 公布日： 2019-05-24 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组腺病毒表达载体，所述载体特征包括：以野生型腺病毒SAd23的基因组为基础，通过分子克隆的方法，删除E1编码区和E3编码区，在E1删除区插入I‑Ceu I和PI‑Sce I酶切位点，同时以腺病毒人血清型Ad5的E4编码区替换SAd23的E4编码区，提高了在人源肾胚细胞（HEK293）中包装重组病毒的成功率和包装出重组病毒的滴度，获得复制缺陷性的重组腺病毒表达载体。本发明的优势在于：1.通过直接分子克隆的方法，构建大片段质粒，方法简单，易操作，可以用于任何大片段载体的构建；2.通过几次克隆连接可以构建完成腺病毒表达载体，步骤简单；3.在细菌水平筛选阳性克隆更加容易、快捷，而且缩短了腺病毒载体构建时间。
编码区构建重组腺病毒表达载体分子克隆重组病毒腺病毒删除腺病毒表达载体复制缺陷性腺病毒载体大片酶切位点细菌水平阳性克隆基因组胚细胞人血清野生型滴度人源质粒成功率替换克隆筛选

[发明专利]一种基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法-CN201910730373.7在审
发明人：黎诚耀;罗升学;刘博超;张攀丽 -专利权人：广州佰芮慷生物科技有限公司
申请日： 2019-08-08 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于人稀有血清型腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法，其是以野生型腺病毒HAd49的基因组为基础，通过基因组直接克隆方法，删除E1编码区和E3编码区，在E1删除区插入I‑CeuI和PI‑SceI酶切位点，同时以人源腺病毒Ad5的E4orf6替换HAd49的E4orf6，提高了在人源肾胚细胞(HEK293)中包装重组病毒的成功率和包装出重组病毒的滴度,获得复制缺陷性的重组腺病毒表达载体此表达载体可以用于表达多种不同种类的抗原，为疫苗和生物医药研发提供基础。
表达载体重组腺病毒重组病毒编码区基因组腺病毒人源删除血清型腺病毒复制缺陷性酶切位点生物医药胚细胞野生型抗原滴度构建研发成功率替换疫苗克隆

[发明专利]复制型腺病毒的检测方法及试剂盒-CN202211719647.0在审
发明人：牛苗;李秀;潘显辉;郝彦哲;石慧 -专利权人：北京五加和基因科技有限公司;北京锦篮基因科技有限公司
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了对腺病毒载体制品中复制型腺病毒(RCA)进行定量检测的方法、引物对和探针组合，及相应试剂盒。从而本发明还提供了用于评价腺病毒载体制品质量的方法和试剂盒，以及相应的腺病毒载体制品。
复制病毒检测方法试剂盒

[发明专利]携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒的用途-CN00100739.4有效
发明人：哈小琴;吴祖泽;郭树华 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院百环生物医学研究中心
申请日： 2000-02-02 - 公布日： 2004-03-17 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明涉及生物医学领域，具体地说是涉及一种携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒及其在纤维性疾病防治中的应用。将人肝细胞生长因子全长编码区cDNA插入到复制缺陷型腺病毒载体GT4050上，获得一载导人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒。该重组腺病毒尾静脉注射入大鼠体内，对大鼠肝纤维化有治疗作用。该重组腺病毒涂抹于创口表面有预防疤痕的功效。
携带肝细胞生长因子基因重组病毒用途

[发明专利]靶向表皮生长因子受体的小干扰RNA重组腺病毒及其用途-CN200710036581.4无效
发明人：白春学;张新;白莉;祝蓉 -专利权人：复旦大学附属中山医院
申请日： 2007-01-17 - 公布日： 2008-07-23 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明属生物技术领域，具体涉及靶向表皮生长因子受体的小干扰RNA重组腺病毒及其在抑制人肺腺癌细胞体内生长中的作用。本发明使用腺病毒载体系统构建shuttle vector－穿梭载体和backbone vector－骨架载体在包装细胞293细胞中发生同源重组，得到预期的复制缺陷型重组腺病毒。本发明针对肺癌治疗和基因调节技术的难点，构建小干扰RNA病毒表达载体，不仅可提高小干扰RNA导入效率，还可延长RNA干扰效应的时间。通过动物体内实验验证了小干扰RNA重组腺病毒能产生RNA干扰效应，下调EGFR表达，抑制肿瘤生长。
靶向表皮生长因子受体干扰 rna 重组病毒及其用途

[发明专利]复制型重组人55型腺病毒载体及其制备方法和应用-CN201410293359.2有效
发明人：陈凌;冯立强;孙彩军;秦成峰 -专利权人：中国科学院广州生物医药与健康研究院
申请日： 2014-06-25 - 公布日： 2018-12-04 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种复制型重组人55型腺病毒载体及其制备方法和应用。所述复制型重组人55型腺病毒载体是以同源重组技术将人55型腺病毒基因组环化，以同源重组及双抗性筛选技术敲除Ad55的E3基因，且可以整合入外源基因表达框，将E3基因缺失的Ad55载体质粒线性化后，转染哺乳动物细胞可成功拯救并大量生产，进一步经密度梯度离心得到纯化的重组Ad55载体，以该载体携带外源基因可在靶细胞内实现高效表达，且外源报告基因的活性可反映病毒的生长特性。本发明基于人Ad55的复制型载体可潜在地应用于：抗人55型腺病毒疫苗研发；抗人55型腺病毒药物及中和抗体筛选；抗其他病原体疫苗的研发；生物学研究的报告示踪系统等。
复制重组 55 病毒载体及其制备方法应用

[发明专利]一种基于腺病毒AdC6的表达载体及其构建方法-CN201710814259.3在审
发明人：李婷婷;罗升学;王文敬;黎诚耀 -专利权人：南方医科大学
申请日： 2017-09-11 - 公布日： 2018-02-13 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备腺病毒表达载体的方法，所述方法包括以野生型腺病毒AdC6基因组为基础，通过基因组直接克隆方法，删除E1编码区和E3编码区，在E1删除区插入I‑Ceu I和PI‑Sce I酶切位点，获得复制缺陷性的重组腺病毒表达载体本发明通过in‑fusion连接的方法，构建大片段质粒，不受限制性酶切位点的限制，可以用于任何大片段载体的构建；本发明通过几次连接可以构建完成腺病毒表达载体，步骤简单；本发明删除E1和E3区，通过PCR扩增DNA片段的过程中就能够完成删除；本发明在细菌水平筛选阳性克隆更加容易、快捷，而且缩短了腺病毒载体构建时间。
一种基于病毒 adc6 表达载体及其构建方法

[发明专利]用于制备病毒载体的组合物和方法-CN201980066189.5在审
发明人：肖卫东;余湘萍 -专利权人：耐克基因有限责任公司
申请日： 2019-10-08 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：一种制备感染性重组病毒载体的方法，所述方法包括以下步骤：(a)用包含衣壳化缺陷型腺病毒(edAd)的第一病毒感染宿主细胞，所述edAd包含第一缺陷型病毒基因组；(b)将感染的宿主细胞在培养基中孵育足以产生感染性病毒颗粒的时间段；以及(c)回收分泌到培养上清液中的感染性病毒颗粒，其中所述edAd或所述宿主细胞包含经工程改造以表达感兴趣的靶基因的第二缺陷型病毒基因组，其中所述edAd或所述宿主细胞包含足以表达所述缺陷型病毒DNA复制所必须的腺病毒(Ad)辅助基因的核酸序列；并且其中所述edAd或所述宿主细胞包含核酸序列，所述核酸序列足以表达产生与所述第二病毒相对应的感染性复制缺陷型病毒颗粒所必须的辅助功能。
用于制备病毒载体组合方法

[发明专利]用于包装重组人4型腺病毒的单质粒载体系统及其应用-CN201910685065.7有效
发明人：陈薇;王步森;侯利华;吴诗坡;郭强;张哲;赵拯浩;张金龙;付玲;宋小红 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2019-07-27 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于包装重组人4型腺病毒的单质粒载体系统，所述载体系统含有E3区缺失的人4型腺病毒(Human Adenovirus type 4,HAdV‑4或Ad4)基因组、用于质粒在细菌内扩增的载体序列、pBR322复制原点、卡那霉素抗性基因以及复制控制序列，外源基因嵌入位点位于人4型腺病毒的包装信号之后、E1区之前。本发明还公开了所述单质粒载体系统包装重组人4型腺病毒的方法以及在疫苗和药物制备中的应用。所述载体系统可以快捷、高效地制备稳定表达外源基因的人4型腺病毒载体重组病毒，在诊断试剂盒、疫苗、基因治疗试剂盒和/或肿瘤治疗药物制备的应用等领域具有良好的应用前景。
用于包装重组病毒质粒载体系统及其应用

[发明专利]腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗及其应用-CN201010297576.0有效
发明人：仇华吉;孙元;李娜;李宏宇 -专利权人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
申请日： 2010-09-30 - 公布日： 2011-02-09 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明公开了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗及其应用。本发明利用基因转移能力极强的腺病毒来递送表达猪瘟病毒E2蛋白的甲病毒复制子载体，构建了高效表达CSFV E2蛋白的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体疫苗，其微生物保藏号是：CGMCC No.4146；本发明嵌合载体疫苗通过腺病毒载体递送表达CSFV E2蛋白的甲病毒复制子载体疫苗，既能发挥腺病毒载体的高效转移外源基因的能力，又能发挥甲病毒复制子载体自我复制后高效表达外源基因及其诱导强大细胞免疫应答的优势，大大增强了疫苗的免疫效力，免疫剂量也大大减少本发明嵌合载体疫苗在猪体上能诱导高水平的免疫反应，可对致死性猪瘟病毒强毒的攻击提供完全的保护。
病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗及其应用

[发明专利]表达多个外源基因的Ad5 D24条件复制型腺病毒载体及其构建方法和应用-CN200910023842.8无效
发明人：夏海滨;郑晓晶;刘世海;王东阳;冯真真;孙晓聪;李婧 -专利权人：陕西师范大学
申请日： 2009-09-09 - 公布日： 2010-02-17 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：一种表达多个外源基因的Ad5 D24条件复制型腺病毒载体，重组腺病毒载体中Ad5 E1 CR2中有24bp碱基缺失，在pRB null/mutant的肿瘤细胞中特异扩增；采用E4-fiber穿梭载体在Fiber其构建方法为：构建Ad5 E1A分子CR2中24个碱基缺失的穿梭载体；构建Ad5 E1A分子CR2中24个碱基缺失的腺病毒载体骨架；构建表达治疗基因或小干扰RNA的腺病毒E4-fiber穿梭载体构建表达治疗基因或小干扰RNA的腺病毒E4-fiber穿梭载体；构建表达至少1个治疗基因或小干扰RNA与治疗基因的Ad5 E1A分子CR2中24个碱基缺失的条件复制型腺病毒载体；表达多个外源基因的Ad5 D24条件复制型腺病毒载体在制备治疗肿瘤药物中的用途
表达多个外源基因 ad5 d24 条件复制病毒载体及其构建方法应用

[发明专利]生殖器疱疹重组腺病毒载体二价活疫苗的制备及应用-CN201010201212.8无效
发明人：刘景伟;张利娟;胡军 -专利权人：郑州金森生物科技工程有限公司
申请日： 2010-06-17 - 公布日： 2011-06-01 - 主分类号： A61K39/245 文献下载
摘要：本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种抗单纯疱疹病毒2型感染所致生殖器疱疹的新型重组腺病毒载体二价活疫苗。本发明利用分子生物学技术将含单纯疱疹病毒2型糖蛋白B和糖蛋白D基因的全长序列的表达盒和细胞因子白介素2表达盒克隆至腺病毒载体上构成。该疫苗是复制缺陷型腺病毒载体活疫苗，进入人体后仅能表达保护性抗原而无致病作用，安全性高，可以模拟野生型疱疹病毒感染特性，有效地诱导的机体粘膜和体液免疫应答和细胞免疫应答，降低人群发病率，清除已感染病毒，
生殖器疱疹重组病毒载体二价疫苗制备应用

[发明专利]基于目的基因S1的人5型复制缺陷型重组腺病毒、制备方法及用于预防SARS-CoV-2感染的疫苗-CN202310330242.6在审
发明人：李兰娟;陈科达;姚航平;史丹蓉;李超男;李红玉 -专利权人：浙江树人学院
申请日： 2023-03-30 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明属于生物工程技术领域，具体公开了基于目的基因S1的人5型复制缺陷型重组腺病毒，所述人5型复制缺陷型重组腺病毒的目的基因S1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，且所述目的基因S1可在人源细胞或人体内表达该人5型复制缺陷型重组腺病毒在细胞模型中体现出良好的免疫原性，能够有效诱导机体发生体液及细胞免疫反应，并安全性良好。另外，本发明中的人5型复制缺陷型重组腺病毒制备方法操作步骤简单易行，具有极高的应用价值，可以在短时间内大量生产并应用于可能突发的疫情。并且目的基因S1经优化后，在转染细胞中的表达水平显著提高。
基于目的基因 s1 复制缺陷重组病毒制备方法用于预防 sars cov 感染疫苗

[发明专利]构建重组腺病毒载体的方法与以其构建的重组腺病毒载体及应用-CN202110684261.X在审
发明人：周东明;邢嫚 -专利权人：苏州相奕生物技术有限公司
申请日： 2021-06-21 - 公布日： 2023-01-06 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明提供一种构建重组腺病毒载体的方法，用C亚型人腺病毒基因组的E4基因序列改造AdC6的E4基因序列以提高重组腺病毒产量。以本发明的方法可构建得到非复制型腺病毒载体，可用作疫苗载体，实验证明可在其E1/E3/E4/Fiber/Hexon等区域插入外源基因，用于疫苗开发或基因治疗。以本发明的方法还可构建得到条件复制型腺病毒载体，即溶瘤病毒载体，并可在其△E3或E1或E4等区域插入了各种促进溶瘤的外源基因以增强溶瘤作用：实验证明所得重组溶瘤病毒可在多种肿瘤细胞中复制，并裂解肿瘤细胞；动物实验中重组溶瘤病毒都可有效抑制肿瘤进展，甚至清除肿瘤，表明其具有治疗肿瘤的潜力，可进一步向临床推进。
构建重组病毒载体方法以其应用