本发明属于生物工程技术领域,具体公开了基于目的基因S1的人5型复制缺陷型重组腺病毒,所述人5型复制缺陷型重组腺病毒的目的基因S1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,且所述目的基因S1可在人源细胞或人体内表达SARS‑CoV‑2的S1蛋白。该人5型复制缺陷型重组腺病毒在细胞模型中体现出良好的免疫原性,能够有效诱导机体发生体液及细胞免疫反应,并安全性良好。另外,本发明中的人5型复制缺陷型重组腺病毒制备方法操作步骤简单易行,具有极高的应用价值,可以在短时间内大量生产并应用于可能突发的疫情。并且目的基因S1经优化后,在转染细胞中的表达水平显著提高。