本发明涉及利用RPS基因促进载体稳定表达的方法及其功能基因。该方法包括将功能基因序列构建入预定表达载体;将构建所得表达载体转染入目标细胞株,并进行培养表达。该功能基因序列来自RPS基因,且其序列与SEQ ID NO.1所示序列或其互补序列的相似度为85%‑100%。本发明的上述功能基因序列应具有维持载体启动子活性的特性,能使目标基因持续表达;将该功能基因序列应用于表达载体,能够提高载体转染的稳定细胞株的单位细胞生产效率。
本发明涉及利用RPL基因促进载体稳定表达的方法及其功能基因。该方法包括:将功能基因序列构建入预定表达载体;将构建所得表达载体转染入目标细胞株,并进行培养表达。该功能基因序列来自RPL基因,且其序列与SEQ ID NO.1所示序列或其互补序列的相似度为85%‑100%。本发明通过利用来自RPL基因的特定功能基因,能使目标基因持续表达;将该功能基因序列应用于表达载体,能够提高载体转染的稳定细胞株的单位细胞生产效率。
本发明涉及利用IRES基因提升AAV包装效率的方法及其功能基因。该方法包括:将功能基因序列构建入预定表达载体;构建所得表达载体转染入目标细胞经培养表达获得AAV。该功能基因序列来自或类似IRES基因,且其序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6之一所示序列或其互补序列。本发明通过利用来自或类似IRES基因的功能基因序列,能有效调整Cap与Rep表达比例;将该功能基因序列应用于表达载体,能够有效提高AAV的生产效率。
本发明属于分子生物学领域,具体公开了一种植物环状RNA表达框架及其应用。所述植物环状RNA表达框架包括上游框架序列、待表达目的基因序列、下游框架序列;所述上游框架序列的核苷酸序列或其互补序列如SEQ ID NO.1所示;所述下游框架序列的核苷酸序列或其互补序列如SEQ IDNO.2所示;所述待表达目的基因序列可根据实际应用需要而定。本发明通过利用植物环状RNA表达框架中的上游框架序列和下游框架序列,使含有特定目的基因的RNA能够表达并环化,解决了现有技术无法实现植物中特定目的基因环状RNA表达的不足。