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[发明专利]表达多基因抗流感转基因动物的构建方法-CN201510816345.9在审
发明人：孟庆文;王伟;陈洪岩 -专利权人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
申请日： 2015-11-19 - 公布日： 2017-02-08 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提供了一种表达多基因抗流感转基因动物的构建方法。该方法在RNA聚合酶Ⅲ型启动子h7SK、hH1、hU6和mU6的控制下，靶向流感病毒基因构建了串联表达的shRNA表达盒，将Mx-RNAis与shRNA表达盒联合构建到表达载体并包装重组慢病毒，制备转基因动物获得表达抗流感基因的转基因动物实验结果表明转基因动物具有显著抑制猪流感病毒复制的活性。
表达多基因流感转基因动物构建方法

[发明专利]一种用于微生物的CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建及其应用-CN201510732830.8有效
发明人：毕昌昊;张学礼;赵东东 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2015-11-02 - 公布日： 2018-11-27 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于微生物的CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建及其应用。本发明构建的CRISPR/Cas9基因载体，包括复制起始位点、筛选标记基因、Cas9蛋白基因、gRNA的编码DNA、同源重组元件和操纵子。本发明构建的CRISPR/Cas9基因载体能够对大肠杆菌或谷氨酸棒状杆菌基因组进行编辑(包括基因或者DNA序列的敲除、置换、插入等操作)，具有试验周期短、节省时间和成本、效率高等优点。
一种用于微生物 crispr cas9 基因编辑载体构建及其应用

[发明专利]基于网络基因技术的网络恶意行为识别方法及装置-CN201711431221.4有效
发明人：戴青;贾俊亮;崔平非 -专利权人：河南信息安全研究院有限公司
申请日： 2017-12-26 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： H04L29/06 文献下载
摘要：本发明属于物联网网络通信安全技术领域，尤其涉及基于软件基因技术的网络恶意行为识别方法及装置。基于软件基因技术的网络恶意行为识别方法，包括以下步骤：构建终端与云端的网络基因库；基于网络基因库对网络恶意行为进行识别。基于软件基因技术的网络恶意行为识别装置，包括：终端、云端网络基因库构建模块，用于构建终端与云端的网络基因库；网络恶意行为识别模块，用于基于网络基因库对网络恶意行为进行识别。本发明提出了基于软件基因技术的网络恶意行为识别方法及装置，提高了基因检测的效率，保障了物联网的安全性。
基于网络基因技术恶意行为识别方法装置

[发明专利]一种大肠杆菌表达载体pBMcopA及其应用-CN201811139397.7在审
发明人：王以明;张叶飞;马宸;张瑾;童晋 -专利权人：成都理工大学
申请日： 2018-09-28 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种大肠杆菌表达载体pBMcopA及其应用，所述表达载体由pBM16A‑T构建而来，其中pBM16A‑T的TA连接位点区域添加copA启动子以及酶切位点BamH I和Nde I。还公开了表达载体pBMcopA‑pigC，其由pBMcopA构建，还包括了目的基因，目的基因为灵菌红素缩合酶(pigC)基因。本发明还提供上述两种表达载体的构建方法。所构建出的表达载体可在含铜离子ATP转运蛋白的大肠杆菌中表达目的基因，可以作为基因改造的可选质粒。
表达载体构建大肠杆菌表达目的基因大肠杆菌基因改造灵菌红素酶切位点区域添加转运蛋白启动子缩合酶铜离子可选位点质粒应用基因

[发明专利]重组人NADH脱氢酶亚单位4基因及其表达载体构建方法-CN201210104336.3有效
发明人：李斌;裴晗;万幸 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2012-04-11 - 公布日： 2012-08-15 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开一种重组人NADH脱氢酶亚单位4基因及其表达载体构建方法，其核苷酸序列SEQ ID NO：1所示，其大小为2889bp。腺相关病毒载体的构建步骤如下：先构建含有人NADH脱氢酶亚单位4基因重组腺相关病毒载体，然后重组腺相关病毒包被、转染、纯化、浓缩、鉴定。该方法能快速，简便地构建携带重组人NADH脱氢酶亚单位4基因的重组腺相关病毒载体，并包装获得复杂缺陷腺相关病毒载体。该基因可以用于LHON的基因治疗。
重组 nadh 脱氢酶单位基因及其表达载体构建方法

[发明专利]转基因植物-CN201180056026.2无效
发明人： S.达文波特;P.勒莱;J.P.桑切斯塔姆布里诺 -专利权人：英美烟草(投资)有限公司
申请日： 2011-09-06 - 公布日： 2013-11-20 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明涉及基因构建体，其可以用于制备转基因植物。该构建体可以具有降低植物中、特别是植物叶中硝酸盐浓度，和用于诱导衰老样表型的能力。本发明扩展至用这种构建体转化的植物细胞，和转基因植物本身。本发明还涉及产生转基因植物的方法，和降低植物中硝酸盐含量的方法。本发明还涉及已经用该基因构建体转化的收获的植物叶，例如烟草叶，和包含这种收获的植物叶的各种烟草制品，如吸烟制品。
转基因植物

[发明专利]一种调控蛋白降解诱导基因协同致死的菌株及应用和方法-CN202011102557.8在审
发明人：马文建;周飒;陈洪冉;宋玉鹏;刘庆喜;刘心怡;马宁 -专利权人：天津科技大学;齐鲁理工学院
申请日： 2020-10-15 - 公布日： 2021-03-02 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及一种调控蛋白降解诱导基因协同致死的菌株构建方法，步骤如下：构建KanMX‑GPD‑Degron‑RAD51表达框，使用醋酸锂化学转化法将表达框转化到已敲除RAD27基因的酿酒酵母细胞中，构建由本发明利用简单快捷的方式构建协同致死基因菌株，在敲除一个协同基因的基础上，利用可诱导的蛋白降解控制另一个协同基因，瞬时降解必需蛋白，从而研究潜在的基因协同及互补关系。
一种调控蛋白降解诱导基因协同致死菌株应用方法

[发明专利]一种基于CRISPR-Cas9技术靶向敲除牛ZC3H10基因的方法及应用-CN202210699803.5在审
发明人：黄金明;王鲁豫;高亚平;肖遥;杨凌;魏晓超;鞠志花 -专利权人：山东省农业科学院畜牧兽医研究所
申请日： 2022-06-20 - 公布日： 2022-10-04 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于CRISPR‑Cas9技术靶向敲除牛ZC3H10基因的方法及应用。本方法通过设计靶向敲除牛ZC3H10基因的sgRNA序列，构建ZC3H10基因敲除载体，将构建好的载体转染进牛的细胞中，经过药筛和挑取单克隆细胞等过程，构建纯合敲除牛ZC3H10基因的细胞模型。本发明首次利用CRISPR‑Cas9技术在胎牛成纤维细胞中构建ZC3H10基因敲除模型，对研究ZC3H10基因的功能和调控机制等有重要意义。
一种基于 crispr cas9 技术靶向 zc3h10 基因方法应用

[发明专利]大肠杆菌表达载体、构建方法及其应用-CN201810413842.8有效
发明人：王以明;代伟;张叶飞;童晋 -专利权人：成都理工大学
申请日： 2018-05-03 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了大肠杆菌表达载体pRTDuet‑1，所述表达载体由pETDuet‑1构建而来，其中pETDuet‑1的T7聚合酶启动子被沼泽红假单胞菌的磷酸烯醇式丙酮酸激酶启动子替代。还公开了表达载体pRTD‑G，其由pRTDuet‑1构建而来，还包括了目的基因，目的基因为6‑磷酸葡萄糖脱氢酶(g6pdh)基因。本发明还提供上述两种表达载体的构建方法。所构建出的表达载体可在不含T7聚合酶基因的大肠杆菌中表达目的基因，可以作为基因改造的可选质粒。
大肠杆菌表达载体构建方法及其应用

[发明专利]在牛DGAT1基因中引入K232A精细突变的方法-CN201210118796.1有效
发明人：郭宏;李光鹏;葛秀国;丁向彬;刘新峰;李吉霞 -专利权人：天津农学院;内蒙古大学
申请日： 2012-04-20 - 公布日： 2013-10-30 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种牛DGAT1基因中引入K232A精细突变的方法，包括以下步骤：(1)带有K232A突变的牛DGAT1基因同源短臂的构建；(2)牛DGAT1基因同源长臂的构建；(3)打靶载体的构建；(4)K232A精细突变的引入；本发明构建的打靶载体中包括筛选基因片段Neo-TK和loxp位点，不但可以利用Neo抗性对打靶成功的细胞进行筛选，同时可以对利用Cre-loxp系统删除标记基因，并利用TK的特性对删除标记基因后的细胞进行筛选
dgat1 基因引入 k232a 精细突变方法

[发明专利]在植物细胞内表达外源基因的核酸构建物及其应用-CN201710061566.9有效
发明人：朱健康;王木桂;陆钰明;毛妍斐 -专利权人：中国科学院分子植物科学卓越创新中心
申请日： 2017-01-26 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明提供了一种在植物细胞内复制或表达外源基因的核酸构建物及其应用。具体地，本发明提供了一种具有特定结构的核酸构建物，以及利用该构建物提高外源基因在植物基因组进行同源重组或定点敲入效率的方法。本发明的方法可以有效筛选同源重组或定点插入事件，从而实现外源基因片段在植物基因组的高效重组或定点插入，可以广泛应用于植物基因功能研究和作物遗传改良。本发明还提供了包含该外源构建物的载体，植物细胞和植物。
植物细胞内表达基因核酸构建及其应用

[发明专利]一种基于元分析构建基因调控网络的方法-CN202310386770.3在审
发明人：梁潇;孙善文 -专利权人：东北林业大学
申请日： 2023-04-12 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： G16B40/30 文献下载
摘要：一种基于元分析构建基因调控网络的方法，为了解决基因调控网络通过合并多个研究的数据扩大样本量，但不同研究数据之间并不完全是同质的，导致基因调控网络误差大，准确率低的问题，它包括对获取的每个转录组学基因表达数据集进行元分析，获得显著差异基因列表；根据转录组学基因表达数据所属的物种获取转录因子基因列表，根据转录因子基因列表和显著差异基因生成核心基因列表；计算每个核心基因与每个显著差异基因的皮尔逊相关系数，根据皮尔逊相关系数构建共表达网络；对共表达网络聚类，得到多个核心基因高相关的差异基因模块；结合生物学知识与结构方程模型，根据每个模块构建对应的基因调控网络。属于基因调控网络领域。
一种基于分析构建基因调控网络方法

[发明专利]生产β-丙氨酸的重组基因工程菌及其应用-CN202211248484.2在审
发明人：柳志强;张义峰;周海岩;丁文清;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2022-10-12 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了三种生产β‑丙氨酸的重组基因工程菌及其应用，包括：重组基因工程菌A2是以大肠杆菌A1为出发菌株，敲除pck基因后构建得到；重组基因工程菌B2是以大肠杆菌B1为出发菌株，敲除pck基因后构建得到；重组基因工程菌C2是以大肠杆菌C1为出发菌株，敲除pck基因后构建得到，大肠杆菌C1为含有Trc启动子的ppc、panD、glK基因，敲除pykA、aspA、pykF基因，以及导入含枯草芽孢杆菌的panD基因的pTrc99a质粒的大肠杆菌。相较于未敲除pck基因的菌株，β‑丙氨酸生产能力显著提高。
生产丙氨酸重组基因工程及其应用

[发明专利]乳酸菌单质粒Nisin诱导表达载体的构建及使用方法-CN200810051043.7无效
发明人：王春凤;郝凤奇 -专利权人：王春凤;郝凤奇
申请日： 2008-08-01 - 公布日： 2010-02-03 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：一种乳酸菌单质粒Nisin诱导表达载体的构建及使用方法，属于生物技术领域，其构建是：a.获得及鉴定，产Nisin乳酸乳球菌染色体DNA的制备，引物的设计与合成，nisRK基因PCR扩增、回收、与pGEM-T连接及转化，nisRK基因的鉴定。b.pW425N的构建，nisRK基因和基础载体pW425et的回收、连接及鉴定，诱导型启动子nisA基因的获得、鉴定及pW425N的构建。其方法是：a.绿色荧光蛋白gfp基因的获得及鉴定，b.重组表达载体的构建及鉴定，c.Nisin诱导表达载体对绿色荧光蛋白诱导表达功能的测定，d.重组乳酸杆菌稳定性检测。有益效果是：回避了以往该系统对宿主菌进行染色体整合的繁琐操作，简化了重组基因工程乳酸菌的构建。
乳酸菌质粒 nisin 诱导表达载体构建使用方法

[发明专利]利用细菌转座子构建家蚕病毒快速基因表达系统的方法-CN200310108781.8无效
发明人：吴小锋 -专利权人：浙江大学
申请日： 2003-11-18 - 公布日： 2004-11-10 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用细菌转座子构建家蚕病毒快速基因表达系统的方法。利用细菌转座子作用原理，在大肠杆菌内即能完成家蚕重组杆状病毒的构建。利用家蚕杆状病毒BmNPV和AcNPV基因组高度同源，借鉴AcNPV Bac－to－Bac表达系统的构建方法，利用基因重组原理，构建适用于可利用我国特色资源—家蚕的新型快速表达系统。解决了在重组病毒构建过程中传统的需要利用昆虫培养细胞进行重组病毒的空斑筛选的过程中费时费力的缺点，缩短了重组病毒构建所需时间，加快了基因表达系统的工作进程。在未来生物技术产业利用家蚕作为“生物工厂”表达生产重组蛋白、基因药物、工程疫苗及后基因组时代蛋白质结构功能分析方面，具有推广的使用价值。
利用细菌座子构建家蚕病毒快速基因表达系统方法

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