本发明公开了一种使用石蜡包埋切片样品同步检测14种抗肿瘤用药相关基因表达水平的试剂盒及其检测方法,该试剂盒包括DEPC水、5×RT缓冲液、反转录引物、反转录酶、X溶液、10×PCR缓冲液、PCR引物,25mM氯化镁溶液,DNA聚合酶和阳性对照品,上述反转录引物包括14种抗肿瘤用药相关基因及RNA内参的RT扩增引物,基因序列如SEQ ID NO.1-NO.18所示,PCR引物包括14种抗肿瘤用药相关基因、RNA内参及DNA内参的正反向PCR扩增引物,基因序列如SEQ ID NO.19-NO.38所示,优点是特异性强、灵敏度高、通量高、可靠性强、成本低、无假阴性结果。
所述试剂盒包括有:针对CYP2C19基因G681A位点的扩增引物和碱基组成如SEQ ID NO:3所示的荧光检测探针、针对CYP2C19基因G636A位点的扩增引物和碱基组成如SEQ ID NO:6所示的荧光检测探针本发明采用特异性的引物、荧光探针及优化的检测体系,可单独或同步检测上述两种基因型;检测线性广,以25μL检测体系可检测2ng‑600ng人基因组DNA;准确性高,检测结果与金标准测序方法100%一致。