本发明公开了利用CRISPR/Cas9系统编辑玉米ZmCENH3基因的sgRNA及其应用,本发明设计了玉米ZmCENH3基因的sgRNA,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.2所示;并通过将含有编码所述sgRNA序列的DNA片段和Cas9编码蛋白分别连接到基础载体中,将构建好的载体转化至农杆菌中获得重组农杆菌,并以重组农杆菌介导侵染玉米,获得阳性植株,分别筛选含Cas9和sgRNA的基因片段的阳性植株,并将两者进行杂交,对其杂交后代进行PCR扩增测序,分析玉米植株突变类型,同时筛选得到玉米ZmCENH3基因的突变体植株。
本发明涉及植物基因工程领域,具体涉及一种创制早熟玉米种质的方法及其应用。本发明首先提供了用于创制早熟玉米种质的sgRNA,其包括:序列如SEQ ID NO.1所示的特异性靶向玉米基因ZmCCT10的sgRNA。本发明所提供的sgRNA和CRISPR/Cas9敲除载体可以显著提高对玉米基因ZmCCT10的打靶效率,有效降低玉米的光周期敏感性,并提早玉米的开花时间,从而能够快速创制早熟玉米种质。