本发明公开了一种鸡CLOCK基因不同转录本的扩增方法及其引物，鉴定每个转录本的特异序列，根据每个转录本的特异序列，设计特异性引物，对鸡mRNA进行扩增，扩增程序为：94℃预变性5min；35个循环：94℃变性30s，60.9℃退火30s，72℃延伸30s；72℃延伸5min；4℃保存；扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳结果和目的条带大小可以分辨出不同转录本，所述的特异性引物序列如SEQ ID NO本发明针对每个转录本序列，设计了转录本特异引物，通过反转录PCR技术可以扩增出特定的转录本，对不同转录本功能的分析研究奠定基础。
该试剂盒中包括：(1)反转录和预扩增混合液：反转录和预扩增引物的序列如SEQ ID NO：1～12所示；其中，反转录引物为12碱基随机引物；(2)多重连接探针混合液：其中，探针的序列如SEQ ID NO：13～24所示，通用引物的序列如SEQ ID NO：25～26所示；(3)MLPA缓冲液；(4)连接缓冲液A和B；(5)连接酶Ligase‑65；(6)PCR反应混合液，其包括序列表SEQ ID NO:25～26所示的通用引物；(7)SALSA聚合酶；(8)阴性对照；(9)阳性对照，包含6种猪病毒性腹泻症候群的病原的阳性对照质粒。
该试剂盒中包括：反转录和预扩增混合液：反转录和预扩增引物的序列如SEQ ID NO：1～12所示；其中，反转录引物为12碱基随机引物；多重连接探针混合液：其中探针的序列如SEQ ID NO：13～24所示，通用引物的序列如SEQ ID NO：25～26所示；MLPA缓冲液；连接缓冲液A和B；连接酶Ligase‑65；PCR反应混合液，其包括序列SEQ ID NO：25～26所示的通用引物；SALSA聚合酶
本发明公开了一种用于扩增乌龟雄激素受体(AR)基因的RT‑qPCR引物和方法，RT‑qPCR引物包括SEQ ID No：1和SEQ ID No：2所示的引物对。方法包括：1)提取待扩增样品的总RNA；2)将总RNA反转录成cDNA；3)采用RT‑qPCR引物对cDNA进行扩增；RT‑qPCR引物为上述所述的RT‑qPCR引物。本发明通过设计一组RT‑qPCR引物，先将待扩增样品的总RNA进行提取，再将上述总RNA反转录，得到cDNA，并对该cDNA采用上述RT‑qPCR引物进行扩增，同时，所用的扩增模板可直接从雌性乌龟输卵管中提取
本发明公开了一种双RNA多靶标检测引物探针组、检测试剂及检测方法，包括：miR‑126和miR‑222检测引物探针组；miR‑126和miR‑222检测引物探针组包括：miR‑126反转录引物SEQ ID NO.1，正向引物SEQ ID NO.2，miR‑126反向引物SEQ ID NO.3和miR‑126探针SEQ ID NO.4；以及miR‑222反转录引物SEQ ID NO.5，miR‑222正向引物SEQ ID NO.6，miR‑222反向引物SEQ ID NO.7和miR‑222探针SEQ ID NO.8；一种双RNA多靶标检测试剂；一种双RNA多靶标检测方法；本发明能够进行恒温检测，检测时间短
