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[发明专利]南瓜籽粕蛋白酶解制备低分子肽-CN201110051576.7无效
发明人：徐金军;刘政;聂简琪 -专利权人：徐金军;刘政;聂简琪
申请日： 2011-03-03 - 公布日： 2012-09-05 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：一种以脱脂南瓜籽粕为原料，双酶同加酶解制备小分子肽的工艺方法。以水解度为考察指标，木瓜蛋白酶和AS1.398蛋白酶双酶为水解酶，最佳水解工艺参数为：双酶质量比1∶1，加酶量19％，底物质量浓度35mg/mL，温度50℃，pH 7.0，水解时间5h。
南瓜蛋白酶制备分子

[发明专利]一种酶活提高的双果糖酐水解酶突变体E389A-CN202210526090.2有效
发明人：郁书怀;徐寒冰 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-05-16 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活提高的双果糖酐水解酶突变体E389A，属于基因工程技术领域。本发明对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的双果糖酐水解酶的第389位氨基酸定点突变，得到双果糖酐水解酶突变体E389A。本发明提供的双果糖酐水解酶E389A的最适pH为6.5，最适反应温度为55℃，酶活和催化效率相比野生酶分别提高了3.6倍和4倍。对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的双果糖酐水解酶的第389位氨基酸定点突变提高了双果糖酐水解酶的生产能力和催化效率，为工业中菊二糖生产提供了优良催化剂，有助于降低生产成本，为菊二糖的研究奠定了基础
一种提高果糖水解突变体 e389a

[发明专利]一种具有双PET水解酶活性的融合蛋白及降解PET的方法-CN202310362062.6在审
发明人：汤丽霞;阿尔里主;秦烩玲;冯娟;方瑞琴 -专利权人：电子科技大学
申请日： 2023-04-06 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明属于酶工程技术领域，具体涉及一种具有双PET水解酶活性的融合蛋白及降解PET的方法。本发明的技术方案是一种具有双PET水解酶活性的融合蛋白，将角质酶TfH和PET酶(FAST‑PETase)融合得双PET水解酶融合蛋白TfH‑FPE或FPE‑TfH。本发明还提供了利用所述融合蛋白的双PET水解酶活性协同促进PET降解的方法，将表达融合蛋白的载体转化工程菌，发酵后收集表达蛋白与含PET样品反应。本发明将TfH与PET水解酶融合，在获得较高融合蛋白分泌量的条件下，引入分子伴侣GroEL/ES与其共表达；兼顾了高效分泌与双PET水解酶协同催化的双优势；避免了蛋白纯化的繁琐步骤；具有方便、易于控制、
一种具有 pet 水解活性融合蛋白降解方法

[发明专利]双果糖酐水解酶活力提高的突变体A175L-CN202111548779.7有效
发明人：郁书怀;赵伟;徐寒冰;李绮婷 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-12-17 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明公开了双果糖酐水解酶活力提高的突变体A175L，属于基因工程技术领域。本发明以来源于微生物Arthrobacter chlorophenolicus A6的双果糖酐水解酶(AcDFA‑IIIase)作为亲本酶，利用基因突变技术，将其氨基酸序列的第175位的丙氨酸替换成亮氨酸，获得单点突变体酶A175L，在最适催化条件下(pH 6.5，55℃)催化底物双果糖酐合成菊二糖的活力提高了3.1倍，催化效率提高了近5倍。双果糖酐水解酶突变体A175L为进一步工业应用双果糖酐水解酶提供了有利保障。
果糖水解活力提高突变体 a175l

[发明专利]一种鲍鲜素及其制备方法-CN201510436406.9在审
发明人：刘智禹;吴靖娜;蔡水淋;苏捷;刘淑集;苏永昌;乔琨 -专利权人：福建省水产研究所
申请日： 2015-07-23 - 公布日： 2015-10-21 - 主分类号： A23L1/231 文献下载
摘要：本发明公开了一种鲍鲜素及其制备方法，以鲍鱼蒸煮液为原料，经真空浓缩、双酶水解、喷雾干燥和造粒制得粒状产品。本发明采用胃蛋白酶和风味蛋白酶双酶对鲍鱼蒸煮液进行蛋白水解，并严格控制双酶的比例、酶添加量、水解温度、pH值及水解时间，不但可取得较高的水解度，还最大程度上避免了苦味的产生；且制得的粒状鲍鲜素调味品配比合理
一种鲍鲜素及其制备方法

[发明专利]豆渣双酶法水解工艺-CN201610076400.X有效
发明人：孙传伯;韩邦兴;陈存武;张莉;左瑞华;陈乃富 -专利权人：皖西学院
申请日： 2016-01-30 - 公布日： 2018-08-14 - 主分类号： C08B37/00 文献下载
摘要：本发明公开了豆渣双酶法水解工艺，在豆渣中加入纤维素酶和普鲁兰酶两种酶对大豆豆渣进行水解，在这两种酶的作用下通过研究水解豆渣时酶反应的pH、温度、料液比、两种酶作用的时间比、用量比，测水解液中多糖含量得出两种酶同时水解豆渣的最佳工艺条件
豆渣双酶法水解工艺

[发明专利]一种用于PET塑料降解的基因工程菌-CN201811321351.7在审
发明人：方崇洲;周光前;李明;苏庆宁;韩倩;莫翠萍;周焱 -专利权人：深伦生物科技(深圳)有限公司
申请日： 2018-11-07 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于PET塑料降解的基因工程菌，所述基因工程菌是通过采用双质粒双表达方式或单质粒双表达方式中的一种将用于表达PET水解酶和MHET水解酶的基因片段转入宿主菌得到的。本发明提供的基因工程菌能同时表达PET水解酶和MHET水解酶并分泌至细胞外，所述PET水解酶可将PET塑料从高聚物状态降解到寡聚物或低聚物状态，所述MHET水解酶可将PET塑料从寡聚物或低聚物状态降解为苯二甲酸和乙二醇单体
水解酶降解基因工程菌表达方式低聚物寡聚物高聚物生物降解途径乙二醇单体苯二甲酸基因片段单质粒双质粒宿主菌分泌转入细胞应用

[发明专利]一种黑曲霉酯水解酶AnCu3、编码基因及其在水解DEHP中的应用-CN201910935056.9有效
发明人：李秀婷;孙宝国;徐友强;王晓程 -专利权人：北京工商大学
申请日： 2019-09-29 - 公布日： 2021-01-01 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种黑曲霉酯水解酶AnCu3，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；还公开了所述黑曲霉酯水解酶AnCu3在水相体系催化水解塑化剂邻苯二甲酸双(2‑乙基己)酯(DEHP)中的应用。本发明首次提供了一种黑曲霉来源的可以催化水解邻苯二甲酸双(2‑乙基己)酯的酶和编码基因，为水解邻苯二甲酸双(2‑乙基己)酯提供了一种新的途径。
一种曲霉水解 ancu3 编码基因及其 dehp 中的应用

[发明专利]一种丝胶蛋白水解方法及其产品和应用-CN201910196706.2有效
发明人：卢声;程德红;林杰;于颖 -专利权人：辽东学院
申请日： 2019-03-15 - 公布日： 2021-02-02 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种丝胶蛋白水解方法，属于生物技术领域。本发明提供的方法包括如下步骤：(1)将丝胶溶于水中，配制成丝胶水溶液；(2)将丝胶水溶液与调节pH的缓冲液混合，调节混合液的pH值为7.5～8.5，得到待水解液；(3)向所述待水解液中加入胰蛋白酶和氯化钙，36～38℃条件下初步反应0.5～1.5h，得到初步水解液；(4)向所述初步水解液中加入木瓜蛋白酶和硫代硫酸钠，48～52℃条件下进一步反应0.5～1.5h，得到最终水解液。本发明提供的方法利用双酶水解，先使用胰蛋白酶处理，然后再加入木瓜蛋白酶；丝胶在双酶的共同作用下，能较传统方法实现更高效率的水解。
一种丝胶蛋白水解方法及其产品应用

[发明专利]一种海鲜调味品及其制备方法-CN201010161042.5无效
发明人：刘智禹;吴成业;叶玫;赵梅;刘淑集;苏永昌;钱卓真 -专利权人：福建省水产研究所
申请日： 2010-04-30 - 公布日： 2011-11-09 - 主分类号： A23L1/231 文献下载
摘要：本发明涉及一种海鲜调味品及其制备方法，是以鱼、虾、贝或它们的下脚料为原料，并辅以配料，经双酶水解、真空浓缩、喷雾干燥和造粒制得的粒状产品。与现有技术相比，本发明的一种海鲜调味品及其制备方法，由于采用枯草杆菌蛋白酶和风味蛋白酶双酶对低值鱼、虾、贝或它们的下脚料进行蛋白水解，并严格控制双酶的比例、酶添加量、水解温度、pH值及水解时间，不但可取得较高的水解度
一种海鲜调味品及其制备方法

[发明专利]一种酶活提高的双果糖酐水解酶突变体C387A-CN201810834320.5有效
发明人：沐万孟;江波;郁书怀;张涛;朱莺莺;程园园 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-07-26 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活提高的双果糖酐水解酶突变体C387A，属于基因工程技术领域。首先我们对来源于微生物Arthrobacter chlorophenolicus A6的双果糖酐水解酶(AcDFA‑IIIase)做了鉴定，并以此酶作为亲本，利用基因突变技术，将其387位的半胱氨酸Cys替换成丙氨酸Ala，获得单点突变体酶C387A，在最适催化条件下(pH 6.5，55℃)催化底物双果糖酐合成菊二糖的比酶活提高了85.2％，催化效率提高了2倍。这一发现对于工业化制备菊二糖具有重要的研究价值，为进一步工业应用双果糖酐水解酶提供了有利保障。
一种提高果糖水解突变体 c387a

[发明专利]一种利用牦牛乳制备水解乳蛋白的方法-CN201110053655.1有效
发明人：冯玉萍;李明生;乔自林;冯若飞;令世鑫;马忠仁 -专利权人：马忠仁;冯玉萍;李明生;乔自林;冯若飞;令世鑫
申请日： 2011-03-07 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： A23J1/20 文献下载
摘要：一种利用牦牛乳制备水解乳蛋白的方法，属于牛奶制品加工领域，牦牛乳经脱脂、制备凝乳酶干酪素、烘干粉碎、水解、灭活酶、纯化、浓缩、干燥等步骤，得水解乳蛋白成品。本发明水解乳蛋白的方法用时短，使用双酶水解较酸、碱水解，反应条件温和，水解彻底，水解率高。
一种利用牦牛制备水解蛋白方法

[发明专利]一种基因工程菌及其在催化二腈选择性水解中的应用-CN201811417653.4在审
发明人：徐毅;马宝娣;吴小梅;邱静雯;刘明春 -专利权人：上海应用技术大学
申请日： 2018-11-26 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种基因工程菌及其在催化二腈选择性水解中的应用。本发明公开的基因工程菌携带含有两段腈水解酶nh基因的重组表达载体，能够实现腈水解酶的双表达，催化二腈水解活力和选择性高，转化率可达99%以上。由于实现了腈水解酶的双表达，导致酶的生产成本低，并且该制备条件温和、无需添加大量有机溶剂，有利于进一步的工业化生产，在抗癫痫药物加巴喷丁的生产中具有很好的工业开发前景。
基因工程菌腈水解酶二腈催化选择性水解重组表达载体抗癫痫药物生产成本低工业开发加巴喷丁有机溶剂制备条件水解两段应用携带基因生产

[发明专利]一种弯曲毛细管电泳检测多酶的方法-CN201910342854.0有效
发明人：王建浩;邱琳;崔朋飞;周舒文;朱志兰;柳丽;刘晓骞 -专利权人：常州大学
申请日： 2019-04-26 - 公布日： 2021-01-29 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本发明属于生物分析领域，具体涉及一种弯曲毛细管电泳检测多酶的方法。首先将量子点与多肽结合形成双酶探针，然后将毛细管电泳所用的毛细管分别弯曲成不同个数的半圆，固定后，先进样双酶探针，间隔10s后进样水解酶，一定时间后，水解酶追赶上双酶探针，并在弯曲毛细管内充分混合，经荧光光谱仪检测双酶探针的荧光强度上述技术方案操作简单，可重复性高，建立了一种新的高灵敏多酶检测技术。
一种弯曲毛细管电泳检测方法

[发明专利]一种线纹海马ACE抑制肽的制备方法-CN201711093772.4有效
发明人：曹献英;陈健;牛成;杨健;高健;舒杨;陈笛 -专利权人：海南大学
申请日： 2017-11-08 - 公布日： 2021-04-30 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明属于生物活性肽技术领域，公开了一种线纹海马ACE抑制肽的制备方法，所述线纹海马ACE抑制肽的制备方法选用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶法酶解5h，酶解条件为料液比1g∶15mL、加酶量9.0％w/w、本发明使用双酶法水解为海马蛋白，以解决单酶水解效率低的问题；双酶同加具有操作简易、速率更快等优点；选择两种酶的适宜温度和pH值都接近，且来源广泛，价格低廉，适用于工业化大规模生产。
一种海马 ace 抑制制备方法

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