本发明提供了一种来源于虎眼万年青的尿苷‑5’‑二磷酸木糖合成酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;还提供了编码尿苷‑5’‑二磷酸木糖合成酶基因的核苷酸序列,如SEQ ID NO.3所示,以及含有该编码核苷酸序列的载体和宿主细胞本发明还提供了尿苷‑5’‑二磷酸木糖合成酶或含有尿苷‑5’‑二磷酸木糖合成酶的细胞在催化底物尿苷‑5’‑二磷酸葡萄糖醛酸反应中的应用。
本发明提供一种高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用,该菌是在大肠杆菌的基因组上整合了核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的嘧啶核苷操纵子pyrBCAKDFE,并由强启动子Ptrc启动,重构了尿苷合成途径;在基因组上对其自身的PRPP合成酶编码基因prsA进行双拷贝,由强启动子Ptrc启动;同时缺失尿苷激酶(udk)、尿苷磷酸化酶(udp)和核苷水解酶(rihA该基因工程菌应用于发酵生产尿苷,在5L发酵罐发酵40‑70h可生产尿苷40‑67g/L,最大生产强度可达1.5g/(L×h),糖苷转化率为15‑25%,是目前报道的发酵法生产尿苷的最高水平。
本发明提供了一种来源于虎眼万年青的尿苷‑5’‑二磷酸芹菜糖/木糖合成酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;还提供了编码尿苷‑5’‑二磷酸芹菜糖/木糖合成酶基因的核苷酸序列,如SEQ ID NO.3本发明还提供了尿苷‑5’‑二磷酸芹菜糖/木糖合成酶或含有尿苷‑5’‑二磷酸芹菜糖/木糖合成酶的细胞在催化底物尿苷‑5’‑二磷酸葡萄糖醛酸反应中的应用。
本发明提供了一种来源于虎眼万年青的截短型尿苷‑5’‑二磷酸木糖合成酶,其原始氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;还提供了编码截短型尿苷‑5’‑二磷酸木糖合成酶基因的核苷酸序列,如SEQ ID NO.2本发明还提供了截短型尿苷‑5’‑二磷酸木糖合成酶或含有截短型尿苷‑5’‑二磷酸木糖合成酶的细胞在催化底物尿苷‑5’‑二磷酸葡萄糖醛酸反应中的应用。