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[发明专利]yfdH基因突变体及其在制备L-缬氨酸中的应用-CN202311058879.0在审
发明人： 吴鹤云;侯德欣;谢希贤;马倩;姚卓越;伍法清;孟刚;赵春光;魏爱英;杨立鹏 -专利权人：天津科技大学;宁夏伊品生物科技股份有限公司
申请日： 2023-08-22 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了yfdH基因突变体及其在制备L‑缬氨酸中的应用，属于生物技术领域。所要解决的技术问题是如何提高大肠杆菌L‑缬氨酸的产量。为了解决该技术问题，本发明提供了氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的蛋白质、其编码基因、相关生物材料及其在提高L‑缬氨酸产量中的应用。本发明构建了过表达突变型yfdHT743C基因或野生型yfdH基因的重组菌，以及点突变重组菌，实验结果表明：过表达yfdH基因或yfdHT743C基因均可以显著提高L‑缬氨酸的产量。对yfdH基因进行点突变(T‑C)也有助于L‑缬氨酸产量的提高。本发明方法构建的基因工程菌种，可以显著促进L‑缬氨酸的积累，提高L‑缬氨酸的产量。
yfdh 基因突变体及其制备缬氨酸中的应用

[发明专利]一种动态调控磷酸葡糖异构酶产组氨酸的基因工程菌株及其构建方法与应用-CN202111447832.4有效
发明人：谢希贤;李镠;吴鹤云;谢华丽;屠建情 -专利权人：天津科技大学;浙江震元生物科技有限公司
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，涉及工业微生物的育种，特别涉及一种动态调控磷酸葡糖异构酶生产组氨酸的基因工程菌株及其构建方法与应用。本发明提供了一种大肠杆菌基因工程菌株，该基因工程菌株以大肠杆菌色氨酸操纵子的启动子Ptrp调控pgi基因的转录表达，并且可选的引入以酰基高丝氨酸内酯AHL作为信号分子介导的群体感应系统调控trpR基因的转录表达。本发明通过将色氨酸调控机制与群体感应系统相结合，实现了对pgi基因的自调控，在满足菌体基本生长的前提下，有效降低了pgi基因的转录表达，从而提升了组氨酸的产量、转化率和生产强度。
一种动态调控磷酸葡糖异构酶产组氨酸基因工程菌株及其构建方法应用

[发明专利]利用具有过表达cynT基因的大肠杆菌生产L-精氨酸的方法及其所用重组菌-CN202310879978.9在审
发明人：谢希贤;李然;蒋帅;马倩;吴鹤云;孟刚;赵春光;魏爱英;贾慧萍 -专利权人：天津科技大学;宁夏伊品生物科技股份有限公司
申请日： 2023-07-18 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了利用具有过表达cynT基因的大肠杆菌生产L‑精氨酸的方法及其所用重组菌。本发明属于生物技术领域，特别涉及利用具有过表达cynT基因的大肠杆菌生产L‑精氨酸的方法及其所用重组菌。本发明的重组肠杆菌是使受体肠杆菌过表达碳酸酐酶编码基因得到的重组菌，通过向受体大肠杆菌中导入碳酸酐酶编码基因，本发明得到的重组大肠杆菌的L‑精氨酸产量显著提高，本研究为合成生物基L‑精氨酸提供了新思路。
利用具有表达 cynt 基因大肠杆菌生产精氨酸方法及其所用重组

[发明专利]利用具有过表达cynX基因的大肠杆菌生产L-精氨酸的方法及其所用重组菌-CN202310879981.0在审
发明人：谢希贤;蒋帅;吴鹤云;马倩;李然;孟刚;赵春光;魏爱英;贾慧萍 -专利权人：天津科技大学;宁夏伊品生物科技股份有限公司
申请日： 2023-07-18 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了利用具有过表达cynX基因的大肠杆菌生产L‑精氨酸的方法及其所用重组菌。本发明属于生物技术领域，特别涉及利用具有过表达cynX基因的大肠杆菌生产L‑精氨酸的方法及其所用重组菌。本发明的重组肠杆菌是使受体大肠杆菌过表达氰酸转运蛋白编码基因得到的重组菌，通过向受体肠杆菌中导入氰酸转运蛋白编码基因和启动cynX基因转录的启动子，得到的重组大肠杆菌的L‑精氨酸产量显著提高，本研究为合成生物基L‑精氨酸提供了新思路。
利用具有表达 cynx 基因大肠杆菌生产精氨酸方法及其所用重组

[发明专利]一种生产胸苷的基因工程菌株及其构建方法与应用-CN202210109622.2有效
发明人：谢希贤;秦臻;吴鹤云;姚卓越 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-01-28 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，涉及工业微生物的育种，特别涉及一种生产胸苷的基因工程菌株及其构建方法与应用。该基因工程菌株异源过表达枯草芽孢杆菌的嘧啶核苷操纵子基因pyrBCAKDFE，尿苷酸激酶突变基因pyrHD90A，天蓝色链霉菌的胸苷酸合酶基因thyX和噬菌体PBS1的5’‑核苷酸酶基因TMPase；过表达大肠杆菌的核糖核苷二磷酸还原酶操纵子基因nrdABC；并且不表达嘧啶核苷磷酸化酶基因deoA，胸苷激酶基因tdk，尿苷磷酸化酶基因udp以及核苷水解酶基因rihA、rihB、rihC。本发明从大肠杆菌基因组水平出发，主要通过代谢工程技术手段，对尿苷酸合成途径、胸苷分解途径、胸苷支路合成途径各模块进行系统全面的组合优化，提高菌株的胸苷发酵性能。
一种生产基因工程菌株及其构建方法应用

[发明专利]一种生产L-鸟氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202211023088.X在审
发明人：谢希贤;王德虎;蒋帅;吴鹤云;王瑞瑞 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-08-24 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种生产L‑鸟氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。所述基因工程菌以大肠杆菌为宿主，不表达基因argF、argI、speC、speF；并且过表达基因argO、pntA、pntB；并将乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶基因argE替换为谷氨酸棒状杆菌的谷氨酸乙酰基转移酶基因argJ并过表达；并且以生长期关联启动子PrpsL控制α‑酮戊二酸脱氢酶E1亚体编码基因sucA的表达；并且异源过表达谷氨酸棒状杆菌的精氨酸合成操纵基因argC、argJ、argB、argD。该菌株对L‑鸟氨酸合成模块、辅因子供应模块和L‑鸟氨酸转运模块进行了系统的优化；并在此基础上利用生长期关联启动子动态调控中心代谢途径中α‑酮戊二酸代谢节点基因的表达强度，实现大肠杆菌中L‑鸟氨酸的高效、稳定生产。
一种生产鸟氨酸基因工程及其构建方法应用

[发明专利]过表达pyrB基因的基因工程菌及其生产L-精氨酸的方法-CN202211353781.3在审
发明人：谢希贤;王瑞瑞;王德虎;蒋帅;吴鹤云;沈冠同 -专利权人：天津科技大学;宁夏伊品生物科技股份有限公司
申请日： 2022-10-28 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种过表达pyrB基因的基因工程菌以及利用其生产L‑精氨酸的方法。更具体的，所述基因工程菌是对菌株E.coli W3110ARG10以过表达pyrB基因的方式进行了修饰，利用修饰后的基因工程菌发酵生产L‑精氨酸，显著提高了L‑精氨酸生产性能。
表达 pyrb 基因基因工程及其生产精氨酸方法

[发明专利]一种生产麦角硫因的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202211546541.5在审
发明人： 吴鹤云;刘万才;谢希贤;蒋帅;马倩;帅珍龙 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-11-25 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种生产麦角硫因的基因工程菌及其构建方法与应用。所述基因工程菌以大肠杆菌为宿主，异源过表达Microcoleus sp.PCC 7113来源的egtD基因，Methylobacterium pseudosasicola来源的egtB基因，Neurospora crassa来源的egt2基因，Corynebacterium glutamicum的ATP转磷酸核糖基酶突变体编码基因hisG*；并且过表达hisDBCHAFI基因簇，丝氨酸转乙酰酶突变体CysE(M201R)编码基因，磷酸甘油酸脱氢酶酶突变体SerA(H344A/N364A)编码基因，腺苷蛋氨酸合酶突变体MetK(I303V)编码基因；并且不表达色氨酸酶基因tnaA。该菌株对麦角硫因合成模块、前体物组氨酸、半胱氨酸和腺苷蛋氨酸合成模块进行了系统性改造，实现大肠杆菌中麦角硫因的高效、稳定生产。
一种生产麦角基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种生产L-缬氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202211742130.3在审
发明人： 吴鹤云;伍法清;谢希贤;姚卓越;侯德欣 -专利权人：天津科技大学;宁夏伊品生物科技股份有限公司
申请日： 2022-12-29 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种生产L‑缬氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。所述基因工程菌以大肠杆菌为宿主，异源过表达Bacillus subtilis的编码乙酰乳酸合成酶的alss基因和编码亮氨酸脱氢酶的bcd基因，Corynebacterium glutamicum的编码支链氨基酸膜转运蛋白的brnFE基因，并且过表达大肠杆菌的编码酮醇酸还原异构酶突变体L67E/R68F/K75E的ilvC基因，编码二羟酸脱水酶的ilvD基因，编码3‑磷酸甘油醛脱氢酶的gapA基因和编码烟酸磷酸核糖转移酶的pncB基因；并且不表达编码苹果酸脱氢酶的mdh基因；并且将硫辛酰胺脱氢酶替换为突变体A321T。获得一株稳定高效生产L‑缬氨酸的基因工程菌。
一种生产缬氨酸基因工程及其构建方法应用

[发明专利]利用弱化了rhaB基因的大肠杆菌提高细胞内ATP水平的方法-CN202211678796.7在审
发明人： 吴鹤云;郭金玺;谢希贤;蒋帅;高志强;帅珍龙 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-12-26 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种利用弱化了rhaB基因的大肠杆菌提高细胞内ATP水平的方法。本发明提供的大肠杆菌弱化了rhaB基因的表达，在培养过程中，细胞内能够提供更高的ATP水平。同时，在以大肠杆菌构建的L‑精氨酸、L‑缬氨酸、L‑组氨酸、麦角硫因等生产菌株中，弱化rhaB基因的表达也能够提高生产菌株细胞中ATP水平。
利用弱化 rhab 基因大肠杆菌提高细胞内 atp 水平方法

[发明专利]一种利用混菌劳动分工发酵生产氨基葡萄糖的方法-CN202211264766.1在审
发明人：马倩;赵可欣;耿自豪;伊进行;张春月;谢希贤;徐庆阳;吴鹤云 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-10-17 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，尤其是一种利用混菌劳动分工发酵生产氨基葡萄糖的方法。分别在两种大肠杆菌中构建强化N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径与脱乙酰功能模块，通过两菌功能分工策略，解决了氨基葡萄糖合成途径中关键酶果糖‑6‑磷酸转氨酶受到代谢产物氨基葡萄糖‑6‑磷酸反馈抑制的问题。摇瓶发酵24h后氨基葡萄糖的产量最高达到11.21g/L，生产强度达到0.47g/(L×h)，具有较强的工业化生产潜力。
一种利用劳动分工发酵生产氨基葡萄糖方法

[发明专利]一种生产L-丝氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202211587322.1在审
发明人： 吴鹤云;李淼;谢希贤;蒋帅;沈冠同;邵伟峻 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-12-06 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种生产L‑丝氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。所述基因工程菌以大肠杆菌为宿主，不表达以下基因：sdaA、sdaB、tdcG、sstT、sdaC；并且过表达以下基因：serAH344A/N364A、serB、serC、eamA以及Brevibacterium flavum来源的2‑羟基戊二酸脱氢酶编码基因D2HGDH；并且对大肠杆菌自身的7‑氰基‑7‑脱氮鸟嘌呤还原酶编码基因queF的第158位碱基由G突变为T。该菌株对L‑丝氨酸合成模块、L‑丝氨酸的降解模块、L‑丝氨酸转运模块以及副产物的合成模块进行了系统性改造；并在此基础上提高菌株对高浓度L‑丝氨酸的耐受性，实现大肠杆菌中L‑丝氨酸的高效、稳定生产。
一种生产丝氨酸基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种生产L-精氨酸的基因工程菌及其应用-CN202211599944.6在审
发明人：谢希贤;蒋帅;吴鹤云;王瑞瑞;王德虎;马倩 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-12-14 - 公布日： 2023-03-17 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，本发明提供了一种生产L‑精氨酸的基因工程菌及其应用。该基因工程菌以大肠杆菌为宿主，不表达以下基因：speA、adiA和astA；异源过表达以下基因：来源于Corynebacterium glutamicum ATCC 13032的精氨酸生物合成相关基因簇argC、argJ、argB、argD、argF、argG、argH以及编码精氨酸转运蛋白的基因lysE，来源于B.subtilis A260的pyrAA、pyrAB；并且含有氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的大肠杆菌RNA聚合酶β‑亚基RpoB突变体。本发明含有RpoB突变体的基因工程菌显著提升了L‑精氨酸的生产水平。
一种生产精氨酸基因工程及其应用

[发明专利]一种生产麦角硫因的基因工程菌株及其应用-CN202011154568.0有效
发明人：马倩;田道光;谢希贤;吴鹤云;李镠;蒋帅;秦臻;朱彦凯;王加初;朱永铎 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2020-10-26 - 公布日： 2022-09-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一株高产麦角硫因的基因工程菌及其应用，该菌株是以大肠杆菌为宿主，在宿主的基因组上整合了谷氨酸棒杆菌ATP转磷酸核糖基酶HisG突变体的编码基因hisG*；还在其基因组上增加了组氨酸操纵子基因hisDBCHAFI的拷贝数；还在其基因组上整合了耻垢分枝杆菌麦角硫因操纵子基因egtBCDE；还在其基因组上整合了大肠杆菌谷氨酰半胱氨酸连接酶编码基因gshA，促进麦角硫因的合成；还在其基因组上整合了粗糙脉胞菌C‑S裂解酶编码基因egtEncr，进一步促进麦角硫因合成；还在其基因组上整合了亚砜合酶突变体的基因egtB*msm，进一步促进麦角硫因合成。
一种生产麦角基因工程菌株及其应用

[实用新型]一种财务会计用工具盒-CN202123177141.5有效
发明人： 吴鹤云;凌颖;杨悦 -专利权人： 吴鹤云
申请日： 2021-12-16 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： B42F7/08 文献下载
摘要：本实用新型涉及财务会计技术领域，具体为一种财务会计用工具盒。本实用新型，包括盒体，所述盒体的表面转动连接有盒盖，所述盒体的内壁设有调节结构，所述调节结构包括两个导板，两个所述导板彼此远离的一侧均与盒体的内壁固定连接，两个所述导板的下表面滑动连接有四个滚轮，所述滚轮的圆弧面与盒体内壁的两侧滑动连接，四个所述滚轮两两一组，两组所述滚轮的表面均转动连接有转轴，所述转轴的两端均固定连接有圆弧板，所述圆弧板彼此靠近的一侧固定连接有挡板，所述挡板的表面固定连接有矩形板，所述矩形板的一侧螺纹连接有螺纹杆。解决了会计人员放入的物品是多变的，而工具盒的结构单一不能对内部空间进行调节的问题。
一种财务会计用工

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