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[发明专利]一种重组蛋白、编码该重组蛋白的核酸及其应用-CN202010033471.8有效
发明人：徐高原;张华伟;周明光;顾强;向文杰;曾小燕;金建云;郝根喜 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2020-01-13 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： C07K14/555 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组蛋白、编码该重组蛋白的核酸及其应用，具体为通过优化牛III型干扰素λ3和I型干扰素α基因的核苷酸序列，再将两者构建表达载体后转化至原核宿主细胞中进行表达。本发明使牛III型干扰素λ3和I型干扰素α原核表达后以可溶性蛋白的形式存在，节约了制备成本，使其可以大量应用于预防和治疗牛病毒性疾病。
一种重组蛋白编码核酸及其应用

[发明专利]一种检测登革2型病毒抗体的重组抗原蛋白、试剂盒及其应用-CN201910320435.7有效
发明人：任瑞文;李硕;李春缘;陈月;李以圣;陈迪佳;刘军 -专利权人：中国人民解放军南部战区疾病预防控制中心
申请日： 2019-04-19 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C07K14/18 文献下载
摘要：重组抗原蛋白的制备包括：筛选检测靶标编码基因，然后将编码基因连接到原核表达载体中，构建得到重组表达载体；转化入宿主细胞中，诱导表达，得到重组抗原蛋白DENV‑Ag2。所述重组抗原蛋白为登革2型病毒特异性抗原，经原核表达、纯化而成。本发明的重组抗原蛋白具有特异性强、亲和力高的优点，与登革2型病毒抗体具有很高亲和力，而与其它型别登革病毒及相近虫媒病毒无血清学交叉反应。
一种检测病毒抗体重组抗原蛋白试剂盒及其应用

[发明专利]一种重组猪源抗菌肽PG4及其生物合成方法与应用-CN200810059188.1无效
发明人：姚菊明;刘琳;马廷方 -专利权人：浙江理工大学;杭州万事利丝绸科技有限公司
申请日： 2008-01-18 - 公布日： 2008-09-17 - 主分类号： C07K7/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组猪源抗菌肽PG4，所述PG4的氨基酸序列为具有SEQ ID NO：1中所示的氨基酸序列；本发明还公开了一种合成如上所述的重组猪源抗菌肽PG4的方法，包括：(1)构建抗菌肽PG4原核表达载体；(2)抗菌肽PG4原核表达载体转化大肠杆菌宿主细胞，构建表达工程菌；(3)发酵培养工程菌，进行诱导剂诱导表达；(4)纯化后得到重组猪源抗菌肽PG4。
一种重组抗菌 pg4 及其生物合成方法应用

[发明专利]一种太湖白鱼宿主防御肽及其应用-CN201810522648.3有效
发明人：卫林;徐薇;冯婷婷;刘天翌 -专利权人：苏州大学
申请日： 2018-05-28 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C07K14/46 文献下载
摘要：本发明公开了一种太湖白鱼宿主防御肽及其应用，属于生物医学技术领域。本发明的太湖白鱼宿主防御肽易获得，且成本低；分子量小，可通过化学合成获得，同时也克隆到了其编码基因，也可以通过构建原核或真核表达载体，通过大规模发酵获得。此外，太湖白鱼宿主防御肽对水产养殖病原菌，特别是耐药性水产养殖病原菌具有杀灭作用，且为太湖白鱼自身免疫系统的组成部分，可制备新型免疫制剂，应用到太湖白鱼的水产养殖中。
一种太湖白鱼宿主防御及其应用

[发明专利]人白细胞介素-12的编码基因、真核宿主细胞和表达方法-CN201310507082.4有效
发明人：赵毅;李友海;章方良;柳振宇 -专利权人：青岛康立泰药业有限公司
申请日： 2012-09-17 - 公布日： 2014-02-05 - 主分类号： C12N15/24 文献下载
摘要：本发明提供了人白细胞介素-12的编码基因、真核宿主细胞和表达方法。具体而言，本发明的人白细胞介素-12的编码基因包含(a)编码人白细胞介素-12的P35亚基的核苷酸序列SEQ ID NO:9或其互补核苷酸序列以及编码人白细胞介素-12的P40亚基的SEQ ID NO:10或其互补核苷酸序列；或者(b)编码人白细胞介素-12的P35亚基的核苷酸序列SEQ ID NO:21或其互补核苷酸序列以及编码人白细胞介素-12的P40亚基的SEQ ID NO:22或其互补核苷酸序列本发明的核苷酸序列能够使IL-12在真核宿主细胞，特别是中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中稳定高效表达，尤其是在无血清条件下稳定高效表达。
白细胞 12 编码基因宿主细胞表达方法

[发明专利]人白细胞介素-12的编码基因、真核宿主细胞和表达方法-CN201210345021.8有效
发明人：赵毅;李友海;章方良;柳振宇 -专利权人：青岛康立泰药业有限公司
申请日： 2012-09-17 - 公布日： 2013-01-16 - 主分类号： C12N15/24 文献下载
摘要：本发明提供了人白细胞介素-12的编码基因、真核宿主细胞和表达方法。具体而言，本发明的人白细胞介素-12的编码基因包含(a).编码人白细胞介素-12的P35亚基的核苷酸序列SEQ ID NO：9或其互补核苷酸序列以及编码人白细胞介素-12的P40亚基的SEQ ID NO：10或其互补核苷酸序列；或者(b).编码人白细胞介素-12的P35亚基的核苷酸序列SEQ ID NO：21或其互补核苷酸序列以及编码人白细胞介素-12的P40亚基的SEQ ID NO：22或其互补核苷酸序列本发明的核苷酸序列能够使IL-12在真核宿主细胞，特别是中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中稳定高效表达，尤其是在无血清条件下稳定高效表达。
白细胞 12 编码基因宿主细胞表达方法

[发明专利]一种速效性质型多角体病毒防治鳞翅目夜蛾科害虫的方法-CN01134031.2无效
发明人：方继朝;郭慧芳 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2001-10-11 - 公布日： 2003-04-23 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：McCPV和SlNPV(斜纹夜蛾核多角体病毒)、SeNPV(甜菜夜蛾核多角体病毒)、MbNPV(甘蓝夜蛾核多角体病毒)等多种NPV(核多角体病毒)之间还具有增效作用，联合作用可提高杀虫效果，增加杀虫速度已在室内以斜纹夜蛾和甜菜夜蛾为替代宿主，稳定增殖McCPV，增殖后的CPV病毒致病力与原宿主CPV相近。
一种速效性质型多角体病毒防治鳞翅目夜蛾害虫方法

[发明专利]一种铜绿假单胞菌噬菌体K8假定蛋白GP075及其突变株、突变蛋白和应用-CN201910720978.8有效
发明人：杨洪江;孙利;张志强;李东航;尤甲甲 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2019-08-06 - 公布日： 2022-04-08 - 主分类号： C07K14/005 文献下载
摘要：本假定蛋白GP075发生突变，突变后的蛋白具有结构蛋白的功能，该类噬菌体突变株在原识别脂多糖的基础上，增加了额外的受体识别蛋白，可识别脂多糖O‑抗原缺陷型宿主细胞或者只含有核心寡糖结构(core oligosaccharides)的宿主细胞，同时具有更宽的宿主范围、更强的裂解及吸附宿主细胞的能力，有望应用于噬菌体制剂，防治铜绿假单胞菌引起的各种感染。
一种铜绿假单胞菌噬菌体 k8 假定蛋白 gp075 及其突变应用

[发明专利]体内掺入非天然氨基酸的正交翻译组分-CN201210216741.4无效
发明人： P·舒尔茨;L·阿方达;J·R·齐图鲁如;A·戴特斯;D·格罗夫;D·萨默尔;曹萝麟;王江云;武宁;谢建明;曾华强 -专利权人：斯克利普斯研究院
申请日： 2005-10-27 - 公布日： 2012-12-19 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及能将非天然氨基酸掺入真细菌宿主细胞如大肠杆菌或在真核宿主如酵母细胞中产生的蛋白质的正交tRNA和氨酰-tRNA合成酶对。
体内掺入天然氨基酸正交翻译组分

[发明专利]用于调节转录的DNA序列-CN02814606.9有效
发明人： J·莱姆贝克 -专利权人：诺和酶股份有限公司
申请日： 2002-07-18 - 公布日： 2004-09-29 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明涉及在真核宿主细胞中调节编码多肽的结构基因转录的DNA序列，其包含i)RNA聚合酶结合的第一DNA序列，该DNA序列包含mRNA起始位点；并且还包含ii)具有或不具有mRNA起始位点的一个或多个结合本发明也涉及含有本发明DNA序列的DNA构建体和表达载体以及宿主细胞。
用于调节转录 dna 序列

[发明专利]体内掺入非天然氨基酸的正交翻译组分-CN200580036982.9无效
发明人： P·舒尔茨;L·阿方达;J·R·齐图鲁如;A·戴特斯;D·格罗夫;D·萨默尔;曹萝麟;王江云;武宁;谢建明;曾华强 -专利权人：斯克利普斯研究院
申请日： 2005-10-27 - 公布日： 2007-10-03 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及能将非天然氨基酸掺入真细菌宿主细胞如大肠杆菌或在真核宿主如酵母细胞中产生的蛋白质的正交tRNA和氨酰－tRNA合成酶对。
体内掺入天然氨基酸正交翻译组分

[发明专利]利用细菌人工染色体同源重组提高细胞转染效率的方法-CN201310228852.1有效
发明人：曹忠洋;阮卫民;郑合勋 -专利权人：曹更生
申请日： 2013-06-07 - 公布日： 2013-10-16 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用细菌人工染色体同源重组提高细胞转染效率的方法。利用pABRG重组质粒对含有目的基因的BAC进行同源重组，然后采用经哺乳动物密码子优化过的Tol2转座子将重组后的BAC通过核转染技术转染宿主细胞，使重组后的含有目的基因的BAC整合到宿主细胞的基因组中通过成功构建含有人类UBC启动子的eGFP标记基因和真核筛选抗性neo基因的BAC载体，并且载体两端有Loxp元件，为转染细胞后的标记和抗性去除做准备。
利用细菌人工染色体同源重组提高细胞转染效率方法

[发明专利]使用内含子制备DNA构建体的组合文库-CN201980044095.8在审
发明人： M.L.尼尔森;N.约丘姆森;J.阿尔瑙 -专利权人：诺维信公司
申请日： 2019-07-19 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：披露了制备DNA构建体，特别是表达盒的组合文库的手段和方法，所述组合文库包括核酸构建体、表达载体、宿主细胞；制备宿主细胞的方法和产生目的多肽的方法，由此表达包括以下：位于待表达的多核苷酸任一侧的第一内含子和第二内含子以及启动子和终止子还要求保护构建真核生物宿主细胞的方法，其中这些细胞与三种多核苷酸接触，并且其中第一和第二多核苷酸以及第二和第三多核苷酸能够成对同源重组并且能够随后形成内含子。
使用内含制备 dna 构建组合文库

[发明专利]一种从梅花鹿粪便中提取宿主核基因组DNA的方法及其应用-CN202310336067.1在审
发明人：张阳;黄晓凤;韩卫杰;张天祥;张曼玉 -专利权人：江西省林业科学院
申请日： 2023-03-31 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种从梅花鹿粪便中提取宿主核基因组DNA的方法。该方法将梅花鹿粪便样品置于无水乙醇中，然后进行离心震荡洗脱，得到洗脱液；向洗脱液中加入醋酸钠溶液，混匀，离心，得到富集的梅花鹿肠壁细胞及破碎肠壁细胞释放的宿主DNA；然后通过75％乙醇清洗，离心，干燥，得到收集物；最后使用微量DNA提取试剂盒从收集物中提取梅花鹿核基因组DNA。本发明的方法操作简单，高效可靠，耗时短，成本低，通过使用无水乙醇对梅花鹿粪便表明附着的肠壁细胞进行洗脱，显著增加了梅花鹿肠壁细胞及其DNA的收集量，同时在洗脱过程保证粪球的完整性，最大限度减少了细菌DNA对梅花鹿核基因组DNA的污染。
一种梅花鹿粪便提取宿主基因组 dna 方法及其应用

[发明专利]一种促进奶山羊精原干细胞的自我更新和增殖的载体及其应用-CN201410706339.3有效
发明人：华进联;吴江;牛博文 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2014-11-27 - 公布日： 2018-02-16 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种促进奶山羊精原干细胞的自我更新和增殖的载体及其应用。所述的载体是包含奶山羊gSirt1基因的真核表达载体，所述的奶山羊gSirt1基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。本发明所构建的真核表达载体实现了在奶山羊精原干细胞中的过表达或超表达，经过RT‑PCR、Western blot及细胞周期检测证实，gSirt1基因有助于精原干细胞的自我更新、干性(多能性)维持和细胞增殖
一种促进山羊干细胞自我新和增殖载体及其应用