本发明涉及基因检测技术领域,具体讲,涉及一种维生素B12代谢相关基因的分型试剂盒、引物和分型方法。分型试剂盒至少包括核酸扩增试剂和单碱基延伸反应试剂;核酸扩增试剂中含有如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.60所示的PCR扩增引物;单碱基延伸反应试剂中含有如SEQ ID NO.61~SEQ 分型方法包括:PCR扩增引物进行PCR扩增反应、碱性磷酸酶消化、单碱基延伸引物进行单碱基延伸反应、脱盐处理、高效液相色谱‑质谱联用检测。本发明试剂盒和检测方法可提高维生素B12代谢相关基因的分型检测效率、简便易行、准确性高、自动化程度高。
本发明属于生物检测技术领域,具体涉及鸡传染性支气管炎病毒活疫苗的RT‑PCR分型检测引物及试剂盒。本发明所述的分型检测引物由序列如SEQ ID NO.1-2所示的通用引物和序列如SEQ ID NO.3-6所示的血清型特异性引物组成。本发明还公开了包含上述分型检测引物的试剂盒。利用本发明的引物和试剂盒,采用半套式RT‑PCR方法鉴别M型、4/91型、LDT3‑A型和QX型血清型传染性支气管炎病毒活疫苗,与常规PCR方法相比,具有更强的特异性和敏感性;还具有快速、高效、低成本的特点,可在5~6h内完成样品的检测,克服了传统血清中和试验的方法耗时较长的缺点,且该方法适合大批量样品的检测与分析。