[发明专利]一种利用原代肝细胞筛选甲状腺素受体激动剂的方法在审
| 申请号： | 202010557348.6 | 申请日： | 2020-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN111621546A | 公开（公告）日： | 2020-09-04 |
| 发明（设计）人： | 徐剑锋 | 申请（专利权）人： | 上海诚益生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/66 | 分类号： | C12Q1/66;C12N15/12;C12N15/65;C12N15/861;C12N7/01 |
| 代理公司： | 上海硕力知识产权代理事务所(普通合伙) 31251 | 代理人： | 郭桂峰 |
| 地址： | 200135 上海市浦东新区中国（*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用原代肝细胞筛选甲状腺素受体激动剂的方法。该方法为：步骤1，构建带有报告基因和甲状腺激素反应元件的载体质粒TRE‑RG；步骤2，将所述载体质粒TRE‑RG用腺病毒包装成TRE‑luc重组腺病毒，在将此重组腺病毒感染原代肝细胞，加入待测化合物，根据报告基因的表达产物确定待测化合物是否为甲状腺素受体激动剂。本发明创造性地利用原代肝细胞本身高表达甲状腺素受体，仅需克隆一小段高度保守的甲状腺素反应元件用于构建报告基因载体，避免了克隆整个甲状腺素受体或者甲状腺素受体的配体结合区域(LBD)的基因序列的难题，同时可以应用于不同种属的原代肝细胞，增加了应用灵活性。本发明方法简单，感染效率高，克服了现有方法转染效率低，重复性差，实验稳定性差的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 肝细胞 筛选 甲状腺素 受体 激动剂 方法 | ||
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- 王兰;段茂芹;于传飞;张峰;刘春雨;付志浩;王文波;郭莎;郭潇;黄璟;徐苗;王军志 - 中国食品药品检定研究院
- 2020-12-30 - 2021-10-01 - C12Q1/66
- 本发明公开了一种快速测定IL‑2蛋白药物和抗CD25抗体药物的生物学活性方法，所述方法通过构建慢病毒(pLV‑STAT5‑Luc‑PGK‑Zencin)转染的C8166效应细胞，经筛选后得到稳定表达STAT5报告基因的单克隆细胞株，用IL‑2蛋白药物刺激激活报告基因的表达，并用抗CD25抗体药物阻断IL‑2刺激激活的信号通路，根据测定的信号值拟合四参数曲线测定IL‑2蛋白药物及抗CD25抗体药物的生物学活性。本发明提供的检测方法可评价药物对细胞信号下游的相关指示、无需任何人原代组织来源的细胞或其他组分、显色稳定、实验周期短、操作简便、成本低。
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