[发明专利]改造后的HBV基因组和相关组合物及其应用有效
| 申请号： | 201810396660.4 | 申请日： | 2018-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN108588097B | 公开（公告）日： | 2021-07-13 |
| 发明（设计）人： | 田文洪;马思思;董小岩;吴小兵 | 申请（专利权）人： | 北京锦篮基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/34 | 分类号： | C12N15/34;C12N15/864;A61K48/00;A61P1/16;A61P31/20 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 张莉;黄革生 |
| 地址： | 100176 北京市大兴区经济技术*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供一系列改造后的HBV基因组及其对应的组合物。HBV基因组中含有siRNA表达单元，表达产生靶向HBV基因保守区的siRNA，降解天然HBV RNA。HBV基因组表达产生的类HBV基因组竞争性地抑制天然HBV基因组的包装。用高效转导肝脏的AAV载体携带改造后的HBV基因组，将其高效转运至体内肝细胞，可有效地抑制HBV病毒的复制和包装，从而达到治疗慢性乙肝的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 改造 hbv 基因组 相关 组合 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一系列改造后的HBV基因组，其特征在于，包括：（1）不表达产生组成HBV病毒颗粒的各种蛋白； 和/或（2）基因组中存在0.1至0.3个拷贝的重复序列；和/或（3）含有两个靶向HBV病毒保守序列的干扰RNA表达结构。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于北京锦篮基因科技有限公司，未经北京锦篮基因科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810396660.4/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 核苷酸序列、fiber2蛋白及表达方法、鸭3型腺病毒和鸭坦布苏病毒二联灭活疫苗-202110970967.2
- 金梅林;姚蓉;徐巧霞;康超;邓明勇;黄运福;杭尧;李国红;王珊 - 武汉科前生物股份有限公司
- 2021-08-23 - 2023-10-03 - C12N15/34
- 本发明提供了核苷酸序列、fiber2蛋白及表达方法、鸭3型腺病毒和鸭坦布苏病毒二联灭活疫苗。核苷酸序列，用于编码鸭3型腺病毒抗原性片段fiber2蛋白，其核苷酸序列如SEQ NO：2所示，鸭3型腺病毒抗原性片段fiber2蛋白的氨基酸序列如SEQ NO：3所示；将fiber2蛋白基因片段和pET‑32a载体片段通过T4DNA连接酶连接，得pET‑32a‑fiber2重组表达载体，然后转化至表达菌株E.coli BL‑21(DE3)感受态细胞培养，从培养物中获得所述的fiber2蛋白，鸭3型腺病毒和鸭坦布苏病毒二联灭活疫苗，其使用的抗原包鸭3型腺病毒抗原性片段fiber2蛋白和灭活的鸭坦布苏病毒；在二联灭活疫苗中两种抗原的体积比为1：1，鸭坦布苏病毒为鸭坦布苏病毒DF2株，其保藏编号为CCTCC NO：V201635。
- 一种重组鸭3型腺病毒fiber-2基因的表达方法-202210268851.9
- 李守军;段进坤;史琪雯;车艳杰;陈爽;杨燚;张桂红;李睿;刘海霞 - 天津瑞普生物技术股份有限公司
- 2022-03-18 - 2023-09-19 - C12N15/34
- 本发明提供了一种重组鸭3型腺病毒fiber‑2基因在马克斯克鲁维酵母表达系统中的表达方法，该方法先将优化后的鸭3型腺病毒fiber‑2基因连接至表达质粒pUKD‑N115中，然后将连接产物转化至尿嘧啶缺失型马克斯克鲁维酵母菌TOP1中表达，最后获得了表达鸭3型腺病毒fiber‑2蛋白的重组酵母菌。本发明成功实现了重组质粒在马克斯克鲁维酵母中的高效表达，且含该表达产物的疫苗在对番鸭的腺病毒感染实验上取得了一定的保护效果。
- 一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因及其在制备病毒样颗粒中的应用-201910863646.5
- 涂亚斌;蔡雪辉;王刚;孙明霞 - 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心）;哈尔滨维科生物技术有限公司
- 2019-09-12 - 2023-09-15 - C12N15/34
- 本发明公开了一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因及其在制备病毒样颗粒中的应用。本发明经优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因如SEQ ID NO.1所示，该序列是针对大肠杆菌表达系统进行的部分优化。与密码子全部优化或不优化相比，该序列能够高水平表达重组蛋白，并能够组装成完整的病毒样颗粒。本发明还公开了制备病毒样颗粒的方法，涉及猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因的优化、基因的克隆及其在大肠杆菌中表达，以及重组蛋白的纯化及病毒样颗粒的制备。本发明简单易行，成本较低，实现了猪圆环病毒3型衣壳蛋白在大肠杆菌中稳定表达，表达的重组衣壳蛋白可自组装形成病毒样颗粒，为猪圆环病毒3型的抗体检测及亚单位疫苗的研制提供了技术手段。
- 非洲猪瘟病毒P72蛋白C末端多表位重组抗原及应用-202210364714.5
- 宋帅;李春玲;翟少伦;蒋智勇;勾红潮;李艳;楚品品;张昆丽;杨冬霞;卞志标 - 广东省农业科学院动物卫生研究所
- 2022-04-08 - 2023-08-22 - C12N15/34
- 本发明属于动物传染病及基因工程技术领域，公开了一种非洲猪瘟病毒P72蛋白C末端多表位重组抗原及应用，所述非洲猪瘟病毒P72蛋白C末端多表位重组抗原基因P72‑B的核苷酸序列为SEQ ID NO：1；所述非洲猪瘟病毒P72蛋白抗原表位基因序列表达载体的构建方法包括：根据P72‑B基因序列，设计引物P72‑BF和P72‑BR并合成，以合成的P72‑B基因序列为模版进行PCR扩增；将纯化回收的P72‑B基因序列用BamH I和Xho I双酶切，用BamH I和Xho I双酶切质粒载体Pet28a，将P72‑B序列片段同质粒载体Pet28a进行连接。本发明为非洲猪瘟的诊断及免疫反应研究提供重要帮助。
- 含有表达安第斯病毒(ANDV)蛋白的修饰的BCG菌株的、可用于预防和治疗汉坦-安第斯病毒感染的免疫原性制剂-202180076740.1
- 亚历克西斯·卡莱伊斯·帕拉;苏珊·布埃诺·拉米雷斯;巴勃罗·冈萨雷斯·穆尼奥斯 - 智利天主教教皇大学
- 2021-11-10 - 2023-08-18 - C12N15/34
- 本发明涉及一种免疫原性制剂，所述免疫原性制剂在药学上可接受的盐缓冲溶液中以104‑109之间的细菌浓度含有卡介菌(BCG)菌株，该菌株表达安第斯病毒(ANDV)的至少一种蛋白或免疫原性片段，其用于制备可用于预防、治疗或减弱ANDV感染的疫苗。ANDV属于汉坦病毒家族，并且是高毒性人类病原体，其每年在智利影响数十人，在一些感染者中引起汉坦病毒心肺综合征(HCPS)。
- 一种人工猪圆环病毒、制备方法及其应用-202310440930.8
- 任林柱;牛谷雨;郑佳玮;陈思;李雪 - 吉林大学
- 2023-04-23 - 2023-08-08 - C12N15/34
- 本发明涉及一种人工猪圆环病毒、制备方法及其应用，将如SEQ ID NO.2所示的Avi序列插入到猪圆环病毒全基因组序列中，具体插入位置为PCV Cap蛋白C端；所述的猪圆环病毒为PCV2、PCV3和PCV4中的一种，通过在PCV Cap蛋白的C端添加一个Avi标签，并且借用生物素‑亲和素系统将量子点标记到Avi标签修饰的PCV上，得到的标记PCV可用于疫苗研发、病毒感染检测方法的建立、病毒感染及致病机制的研究，进一步对PCV在细胞中的感染进行示踪分析。
- 一种体外合成HBV cccDNA的方法及其应用-202310638627.9
- 蔡雪飞;张津 - 重庆医科大学
- 2023-05-31 - 2023-08-01 - C12N15/34
- 本发明属于生物化学技术领域，具体公开了一种体外合成HBV cccDNA的方法及其应用。所述方法包括：采用HBV DNA的长片段和短片段，通过体外自组装反应无缝环化组装形成1倍体的HBV cccDNA，所述长片段为L1，所述短片段为S3，或者，所述长片段为L2，所述短片段为S4；所述L1、L2、S3和S4依次为HBV DNA全长片段序列的区间1859nt～1604nt、1580nt～1884nt、2368nt～1700nt和1673nt～2392nt对应的序列。本发明将分段扩增的HBV DNA通过自组装反应进行双片段无缝环化，构建出了1倍体的HBV cccDNA，可应用于临床标本的HBV cccDNA的制备和验证中，为HBV分子机制的研究奠定坚实的基础。
- 用噬菌体单链制备技术体外重组cccDNA分子模型的方法及应用-202310328094.4
- 袁正宏;陈捷亮;李雨檬 - 复旦大学
- 2023-03-30 - 2023-07-14 - C12N15/34
- 本发明公开了用噬菌体单链制备技术体外重组cccDNA分子模型的方法及应用，方法包括R1、构建重组质粒，载体质粒插入部分λ噬菌体基因组，并构建入目标基因组序列；R2、制备单链形式cccDNA，将步骤R1构建的重组质粒转化入大肠杆菌并用VCSM13辅助噬菌体进行感染，包装出基因组上含有目标基因组全长序列的噬菌体，抽提M13噬菌体基因组并引入Zn
- P30-Fn融合蛋白、抗ASFV-P30蛋白的纳米抗体-融合报告蛋白及应用-202310083256.2
- 王红宁;谷奎;杨铭;张媛媛;杨鑫 - 四川大学
- 2023-01-18 - 2023-06-23 - C12N15/34
- 本发明公开了一种P30‑Fn融合蛋白、抗ASFV‑P30蛋白的纳米抗体‑融合报告蛋白及应用，属于生物技术领域，本发明利用从免疫的双峰驼文库中筛选出抗ASFV‑P30蛋白的特异性纳米抗体，并将其与辣根过氧化物酶(HRP)融合后在HEK293T细胞中表达。同时将P30蛋白展示在铁蛋白的表面，形成融合纳米颗粒。建立基于铁蛋白展示的P30纳米颗粒蛋白和纳米抗体‑辣根过氧化物酶融合物的新型竞争ELISA(cELISA)。与市售试剂盒相比，检测267份临床样本的符合率为98.1％，卡伯值为0.96。此外，该方法重复性好，批内、批间变异系数均小于10％。
- 一种乙型肝炎病毒相关的肝损伤小鼠模型的构建方法及其应用-202310171192.1
- 邓强;苏瑜;朱园飞;卜凡;谢幼华 - 复旦大学
- 2023-02-27 - 2023-05-26 - C12N15/34
- 本发明公开了一种乙型肝炎病毒相关的肝损伤小鼠模型的构建方法，包括：将基本启动子区突变的乙型肝炎病毒基因转入小鼠，构建转基因小鼠模型；其中，所述基本启动子区突变的乙型肝炎病毒基因是具有C1766T和T1768A两个点突变的乙型肝炎病毒基因；所述肝损伤小鼠模型为慢性肝损伤小鼠模型。本发明研究建立了BCP突变相关的HBV重症肝炎小鼠模型，揭示了HBc高表达在肝细胞病理损伤过程的病理意义，以及相关的分子机制，为发展重症肝炎相关临床治疗策略提供了理论基础和潜在的分子靶标。
- 一种非洲猪瘟病毒疫苗产生系统和方法-202211406329.9
- 张辰宇;雷洁琼;崔丹阳;潘金梦;詹守斌 - 南京大学
- 2022-11-10 - 2023-05-12 - C12N15/34
- 发明涉及一种非洲猪瘟病毒疫苗产生系统和方法，所述系统包括能够表达非洲猪瘟病毒抗原的碱基序列组件，该系统为能够在宿主体内组织器官中富集且将抗原表达于囊泡表面并自组装成囊泡复合体的序列，所述囊泡复合体能够引发免疫应答反应。在本发明中，碱基序列组件具有生产成本低廉，理化性质稳定(便于储存、运输)，抗原组装、分泌过程高效，对病源突变反应快，引发的免疫反应强，安全性、保护性高等优点，提供了一种全新的疫苗类型。
- 治疗和/或预防非洲猪瘟病毒的疫苗及其制备方法-202111162615.0
- 伍锐;江峰;孙岩松;夏志平;焦鹏涛 - 绵阳市游仙区创新科技产业技术研究院
- 2021-09-30 - 2023-05-02 - C12N15/34
- 本发明提供了一种治疗和/或预防非洲猪瘟病毒的疫苗及其制备方法，涉及疫苗技术领域。本发明疫苗包括两种mRNA，核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2；本发明将两种mRNA同时转染至293T细胞中时mRNA可以正确翻译形成P72蛋白，两种mRNA使用LNP包裹后递送至体内可以使机体产生免疫反应。
- 一种T7噬菌体识别的锚定序列、DNA疫苗重组质粒及应用-202110770292.7
- 徐海;李玲;李睿婷;郭子杰;洪伟鸣;朱善元 - 江苏农牧科技职业学院
- 2021-07-07 - 2023-05-02 - C12N15/34
- 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种T7噬菌体识别的锚定序列、DNA疫苗重组质粒及应用。本发明利用基因工程方法，调取T7噬菌体基因组左右两侧重复序列中的基因片段，并进行优化组合拼接成候选锚定序列，然后将其插入DNA疫苗质粒载体；建立荧光定量PCR检测方法，评价T7噬菌体对携带候选锚定序列的DNA疫苗载体的包裹效率，最终确定最佳锚定序列。应用T7噬菌体识别锚定序列并包裹DNA疫苗载体，并在细胞上验证T7噬菌体介导DNA疫苗载体转运、表达。本发明的携带锚定序列的DNA疫苗载体可独立于T7噬菌体进行基因的插入或替换，操作方便、运用广泛。
- 一种用于检测非洲猪瘟抗体的E183L基因胶体金试纸条的制备方法-202211414718.6
- 魏建超;马志永;李昱昊;张妍;杨扬;管志欣;张俊杰;郑家杨;邱亚峰;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华 - 中国农业科学院上海兽医研究所
- 2022-11-11 - 2023-04-11 - C12N15/34
- 本发明涉及一种用于检测非洲猪瘟抗体的E183L基因胶体金试纸条的制备方法，属于分子诊断技术领域。为了克服现有技术的不足，本发明提供一种检测非洲猪瘟抗体胶体金试纸条的制备方法，该方法通过分别合成ASFV的E183L基因和猪IgG的Fc基因，在其基因间创造性加入柔性蛋白基因后构建表达载体，将表达载体转化感受态细胞后进行诱导表达，表达的ASFV重组蛋白提取纯化后作为检测带，金黄色葡萄球菌蛋白A作为质控带即可得到，该试纸条的灵敏度可以达到1:320，特异性良好，与伪狂犬病毒、经典猪瘟病毒、乙脑病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及猪圆环病毒1型和2型均没有交叉反应，稳定性良好。
- 猪圆环病毒2d型CAP蛋白及其在亚单位疫苗制备中的应用-202011347139.5
- 刘喜凤;郭兆隆;杨施瑜;韩贤舟;郑杰;马宁宁 - 浙江鼎持生物制品有限公司;北京鼎持生物技术有限公司
- 2020-11-26 - 2023-04-07 - C12N15/34
- 本发明公开了猪圆环病毒2d型CAP蛋白以及用该序列编码的CAP蛋白制备的亚单位疫苗及其应用。本发明通过昆虫细胞密码子偏爱性优化合成猪圆环病毒2d型的CAP序列，将该序列构建到杆状病毒表达载体pFastbac11上，通过杆粒制备，杆粒转染SF9细胞，重组杆状病毒收获及H5细胞表达，获得PCV2d的CAP抗原蛋白。该抗原与佐剂ISA206乳化配制成猪圆环CAP‑2d亚单位疫苗。该疫苗免疫猪能产生较高的中和抗体，可抵抗10
- 植物调节元件及其使用方法-202310010223.5
- A.C.克劳;S.H.迪恩;A.L.卢;C.R.西蒙斯;L.E.斯姆斯 - 先锋国际良种公司;纳幕尔杜邦公司
- 2016-11-22 - 2023-03-14 - C12N15/34
- 本发明涉及植物调节元件及其使用方法。本公开涉及植物分子生物学领域，更具体地，涉及植物中基因表达的调节。
- 用于预防非洲猪瘟的腺病毒载体疫苗及其应用-202211564446.8
- 刘波;陈凌;刘文铭;关素华;杨臣臣 - 广州恩宝生物医药科技有限公司;中国科学院广州生物医药与健康研究院
- 2022-12-07 - 2023-03-10 - C12N15/34
- 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及用于预防非洲猪瘟的腺病毒载体疫苗及其应用。本发明提供了一种核酸分子，包含优化后的以下基因：p30基因、p54基因、CD2v基因、p72基因和p72C基因，该核酸分子可以高效表达p30蛋白、p54蛋白、CD2v蛋白、p72蛋白，其免疫机体后可高效表达p30、p54、CD2v、p72抗原，产生针对非洲猪瘟病毒抗原特异性抗体和细胞免疫反应，可以有效保护机体免受非洲猪瘟病毒的侵染，可用于制备预防非洲猪瘟病毒引发的感染的药物、制备预防和/或治疗非洲猪瘟的药物、制备检测非洲猪瘟病毒的产品、制备诊断非洲猪瘟的产品、制备基因功能调节剂。
- 一种检测非洲猪瘟抗体胶体金试纸条的制备及应用-202211414782.4
- 魏建超;马志永;李昱昊;张妍;杨扬;管志欣;张俊杰;郑家杨;邱亚峰;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华 - 中国农业科学院上海兽医研究所
- 2022-11-11 - 2023-03-03 - C12N15/34
- 本发明涉及一种检测非洲猪瘟抗体胶体金试纸条的制备及应用，属于分子诊断技术领域。为了克服现有技术的不足，本发明提供一种检测非洲猪瘟抗体胶体金试纸条的制备方法，该方法通过分别合成ASFV的B646L基因和猪IgG的Fc基因，在其基因间创造性加入柔性蛋白基因后构建表达载体，将表达载体转化感受态细胞后进行诱导表达，表达的ASFV重组蛋白提取纯化后作为检测带，金黄色葡萄球菌蛋白A作为质控带即可得到，该试纸条的灵敏度可以达到1:320，特异性良好，与伪狂犬病毒、经典猪瘟病毒、乙脑病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及猪圆环病毒1型和2型均没有交叉反应，稳定性良好。
- 一种PCV2 Cap蛋白病毒样颗粒的制备方法-202211434633.4
- 时建立;李俊;张成鑫;李琛;刘畅;刘玉伟;吴晓燕;徐绍建;韩红 - 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
- 2022-11-16 - 2023-03-03 - C12N15/34
- 本发明属于分子生物学技术领域，提供了一种PCV2 Cap蛋白病毒样颗粒的制备方法：（1）人工合成密码子优化后的PCV2 Cap蛋白的编码基因；（2）对含有密码子优化后的PCV2 Cap蛋白基因的大肠杆菌进行诱导表达并裂解，离心后获得裂解液；（3）将裂解液纯化获得PCV2 Cap蛋白溶液；（4）将PCV2 Cap蛋白溶液进行透析以组装VLP。所述PCV2 Cap蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供的方法能够提高Cap蛋白在大肠杆菌原核表达系统中的表达水平，体外组装获得的病毒样颗粒与自然存在PCV2粒子大小大致相同；且其对PCV2特异性抗体具有良好的免疫活性。
- 一种非洲猪瘟假病毒及其制备方法和预防或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物-202110233836.6
- 陆路;姜世勃;唐嘉怡;郑海学;王琦;王茜;段月月 - 复旦大学
- 2021-03-03 - 2023-02-03 - C12N15/34
- 本发明提供了一种非洲猪瘟假病毒及其制备方法和预防或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物。本发明第一方面提供了一种非洲猪瘟假病毒的制备方法，包括将非洲猪瘟病毒基因组中p30蛋白以及p248R蛋白的全基因序列分别导入pcDNA3.1载体中，构建得到重组质粒，随后用重组质粒转染293T细胞，并使用VSV‑ΔG假病毒感染293T细胞，得到非洲猪瘟假病毒。本发明提供了一种非洲猪瘟病毒假病毒的制备方法，通过该方法制备得到的非洲猪瘟假病毒无复制活性，生物安全性高，能够为非洲猪瘟病毒的研究、抗病毒制剂和疫苗评价提供强有力的筛选工具，具备广泛的应用价值。
- 一种表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV载体、PRRS重组病毒及其构建方法和应用-202210772628.8
- 陈瑞爱;温良海;张古月;黄梅 - 肇庆大华农生物药品有限公司;华农（肇庆）生物产业技术研究院有限公司
- 2022-06-30 - 2023-01-17 - C12N15/34
- 本发明公开了一种表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV载体、PRRSV重组病毒及其构建方法和应用，属于生物技术领域，以PBR322作为基础载体，包括PRRSV基因组全长cDNA序列和p30蛋白基因序列，PRRSV基因组全长cDNA序列如SEQ ID No.1所示，p30蛋白基因序列插入到PRRSV基因组全长cDNA序列的ORF1b和ORF2a之间的区域，在插入p30蛋白基因序列的PRRSV基因组全长cDNA序列的上游设置位于CMV启动子，即得到表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV载体。该重组载体保真度高，构建便捷效率高。
- 一种猪圆环病毒3型感染性克隆的构建及鉴定方法-201910341731.5
- 蒋再学;罗满林;吴佳俊;蒋梅;卜婉迪 - 华南农业大学
- 2019-04-26 - 2022-09-30 - C12N15/34
- 本发明公开了一种猪圆环病毒3型（PCV3）感染性克隆的构建方法及鉴定方法，构建时利用圆环病毒本身的特性，即PCV3的核酸为环状DNA，任何位置都可以看做是起始位点也可以看做是终点的特征，首先对PCV3的DNA序列进行重排，再对其进行改造。以往的研究仅是根据临床组织进行PCV3病毒的鉴定，对于检测病原的Western blot鉴定标准一直未见报道。因此，本发明在制备PCV3 Cap单克隆抗体的基础上，再进行感染性克隆的构建及鉴定。本发明方法不利用外源质粒获得PCV3感染性克隆，从而排除外源基因的感染；设计独特的检测引物，该引物仅能对环状PCV3 DNA进行PCR检测，对于成环前的PCV3 DNA不能进行PCR检测。PCR检测使用了PCV3的特异性单克隆抗体对其进行检测，实验数据更加可信。
- 一种重组的非洲猪瘟病毒J18L亚单位蛋白及其制备方法和应用-202110262981.7
- 张强;钱泓;吴有强;贾宝琴;徐玉兰;闻雪 - 浙江海隆生物科技有限公司
- 2021-03-10 - 2022-09-20 - C12N15/34
- 本发明公开了一种重组的非洲猪瘟病毒跨膜蛋白J18L亚单位蛋白及其制备方法和应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述制备方法如下：1)将密码子优化后的非洲猪瘟病毒J18L蛋白编码基因序列克隆到原核表达载体中，得到含有非洲猪瘟病毒J18L亚单位蛋白编码基因的重组质粒；2)再将所述含有非洲猪瘟病毒J18L亚单位蛋白编码基因的质粒重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞中，得到重组工程菌；3)中重组工程菌进行诱导表达，并从菌体裂解上清中纯化非洲猪瘟J18L亚单位蛋白。本发明能够提供一种可大规模工业化生产的非洲猪瘟跨膜蛋白J18L亚单位蛋白且制备方法简单、成本低能够达到国家现有标准。
- 一种融合基因、其所编码的蛋白及其在鱼类虹彩病毒口服疫苗的应用-202111571070.9
- 赖迎迢;黄志斌;巩华;陶家发 - 中国水产科学研究院珠江水产研究所
- 2021-12-21 - 2022-09-06 - C12N15/34
- 本发明公开了一种融合基因、其所编码的蛋白及其在鱼类虹彩病毒口服疫苗的应用，所述融合基因中含有大口黑鲈虹彩病毒衣壳蛋白MCP抗原优化基因、连接序列和标签序列。基于其制备得到的重组乳酸乳球菌Lactococcus lactis NZ9000 pNZ8148‑MCP，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M20211160。使用该重组乳酸乳球菌制备得到的口服疫苗在免疫之后，会使大口黑鲈的血清特异抗体水平显著提高，且口服疫苗免疫后，肾脏中的IgM含量也会显著提高，相对免疫保护率可以达到60.47％，且无需注射，口服即可，操作简单，普及型和适用性强。
- 一种温度控制表达系统与应用-202011521964.2
- 张国强;周景文;陈帅丽;堵国成;李江华;陈坚 - 江南大学
- 2020-12-22 - 2022-09-06 - C12N15/34
- 本发明公开了高效表达异源蛋白的一种温度控制系统的方法及其应用，该发明所使用的突变体CI857能够在37℃摇瓶发酵9h内诱导效果比出发菌株CI857提高13.8倍，并且30℃基本与出发菌株保持一致的阻遏效果，能够显著提高目标蛋白的表达量，因此本发明可作为一种用于高效表达异源蛋白的温度控制系统。
- 一种噬菌体trp574基因及其应用-202010769368.X
- 刘琼光;胡蓉花;余成鹏;钟敏 - 华南农业大学;江西省烟草公司吉安市公司
- 2020-08-03 - 2022-08-23 - C12N15/34
- 本发明公开了一种噬菌体trp574基因及其应用，所述噬菌体trp574基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明首次公开了属于XRE家族的转录调节因子trp574基因，本发明研究表明转化了trp574基因的青枯菌株几乎丧失了致病力，trp574基因具有显著干扰青枯菌的生长、代谢、致病性等综合作用，trp574基因可用于制备无致病力青枯菌株，在防治青枯病中具有较大的应用前景。
- 一种非洲猪瘟病毒抗体检测试纸-201910608585.8
- 王爱萍;张改平;贾蕊;刘运超;周景明;祁元明;赵建国;牛艳;王彦伟;刘亚伟 - 郑州大学;河南中泽生物工程有限公司;河南百奥生物工程有限公司
- 2019-07-08 - 2022-07-05 - C12N15/34
- 本发明属于免疫蛋白制备及其应用技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒抗体检测试纸。本发明提出了编码非洲猪瘟病毒p54蛋白胞外区的基因序列E183L‑1，基于一个总的发明构思，本发明还提出了扩增该基因序列的引物对和该基因序列编码的合成蛋白；为了解决非洲猪瘟病毒检测中存在的问题，本发明利用上述基因编码的合成蛋白制备了一种检测非洲猪瘟病毒抗体的试纸，能够快速、准确的检测非洲猪瘟病毒抗体，非常适用于基层和现场快速检测与诊断。
- 一种可溶性PCV3Cap蛋白及其编码基因和应用-201910046089.8
- 白娟;李勇;姜辰龙;姜平;周而璇 - 南京农业大学
- 2019-01-18 - 2022-05-27 - C12N15/34
- 本发明公开了一种可溶性PCV3Cap蛋白及其编码基因和应用。本发明将PCV3 Cap基因密码子进行昆虫细胞偏嗜性优化、修饰，得到新的重组基因。该重组基因能够表达可溶性的3Capm蛋白，该3Capm蛋白可以包装形成病毒样颗粒，将3Capm蛋白与佐剂制成亚单位疫苗，小鼠和猪体免疫试验均发现其可以有效诱导体液免疫和细胞免疫，表明3Capm蛋白具有较好的抗原性、免疫原性，由此可以看出本发明的3Capm蛋白可以用于疫苗研制，为PCV3的防控提供了思路，为PCV3疫苗的研究奠定了基础。
- 非洲猪瘟病毒CD2v蛋白及由其制备的试剂盒和抗体-202011186928.5
- 田克恭;郝丽影;张超林;邓均华 - 洛阳普泰生物技术有限公司
- 2020-10-29 - 2022-05-03 - C12N15/34
- 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒CD2v蛋白及由其制备的试剂盒和抗体。本发明提供的非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的基因序列包括SEQ ID No.1所示的核苷酸序列或与SEQ ID No.1序列至少90％同源的核苷酸序列。本发明根据CHO表达系统偏爱密码子对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白基因序列进行密码子优化，再通过CHO表达系统制备融合蛋白mFc‑CD2v、融合蛋白gD‑CD2v。用融合蛋白mFc‑CD2v制备的ELISA抗体检测试剂盒或单克隆抗体可用于非洲猪瘟病毒抗体的检测，检测快速、灵敏，特异性好。
- 一种猪圆环病毒2a型Cap蛋白的制备方法与应用-202111646582.7
- 魏平华 - 广州格雷特生物科技有限公司
- 2021-12-29 - 2022-03-22 - C12N15/34
- 本发明公开了一种猪圆环病毒2a型Cap蛋白的制备方法与应用，本发明通过培养含有SEQ ID NO.3所示核酸分子的重组菌，使用异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷诱导表达猪圆环病毒2a型Cap蛋白。SEQ ID NO.3所示核酸分子与其他猪圆环病毒血清型的编码猪圆环病毒2a型Cap蛋白的核酸分子存在显著差异，可用于区分PCV2b和PCV2a，并有望应用于作为PCV2a抗原或制备抗体等相关方面。
- 专利分类
