[发明专利]新城疫新型可视化重组酶聚合酶常温扩增核酸试纸条检测试剂盒及应用在审
| 申请号： | 201810354518.3 | 申请日： | 2018-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN108841996A | 公开（公告）日： | 2018-11-20 |
| 发明（设计）人： | 赵明秋;刘志香;张静远;李晓明;陈金顶 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广东广信君达律师事务所 44329 | 代理人： | 杨晓松 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种检测新城疫病毒的重组酶常温扩增(RT‑RPA)核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7所示的引物及探针和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法为：首先配置RT‑RPA反应体系，进行常温恒温反应；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内；阴性结果仅在质控区一条红色条带，在检测区内无红色条带出现。本发明首次采用RPA‑核酸试纸条技术建立快速检测新城疫病毒的方法，具有操作简单，特异性高，且反应结果易于观察，安全无污染等特点，非常适用于临床现场检测。 | ||
| 搜索关键词： | 试剂盒 条带 核酸试纸条 试纸条检测 新城疫病毒 核酸检测 重组酶 核苷酸序列 常温恒温 反应结果 恒温反应 快速检测 扩增核酸 现场检测 阳性结果 阴性结果 聚合酶 可视化 试纸条 新城疫 质控区 种检测 检测 扩增 判读 探针 引物 质控 应用 观察 配置 安全 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测新城疫病毒的引物组，其特征在于，所述引物组的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述引物组的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
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- 本发明提供了一种用于检测黄瓜花叶病毒西番莲分离物的引物，所述引物中一对是鉴定黄瓜花叶病毒西番莲分离物的引物CMV‑657F和CMV‑657R，另一对是用于黄瓜花叶病毒西番莲分离物的实时荧光定量RT‑PCR的引物CMV‑174F和CMV‑174R，还提供了应用，用于黄瓜花叶病毒西番莲分离物的定量检测。本发明结合两对引物的定量检测方法灵敏度高、特异性强、检测结果准确，用于西番莲脱毒苗和田间感病植株的早期鉴定和病毒含量定量分析，为西番莲无病毒良种苗木繁育及推广提供技术支撑。该方法能够在4～5小时对样品中的黄瓜花叶病毒西番莲分离物进行准确定量，不仅节约了时间、简化了实验步骤，还有利于在植物发病之前采取相应的补救措施，防止该病毒在作物间广泛传播所带来的巨大经济损失。
- SVA、FMDV、SVDV和VSV的一步法多重实时荧光定量PCR检测引物和探针-201910672178.3
- 王秀明;陈君彦;王玉雯;武瑾贤;魏学峰;刘国英;关平原;范秀丽;张贵刚;王艳杰;刘建奇 - 金宇保灵生物药品有限公司
- 2019-07-24 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种SVA、FMDV、SVDV和VSV的一步法多重实时荧光定量PCR检测引物和探针，属于生物技术检测领域。并基于提供的引物和探针开发出了用于同时检测SVA、FMDV、SVDV和VSV的试剂盒。本发明提供的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、敏感性高、重复性好，可以实现对SVA、FMDV、SVDV和VSV同时准确定性和定量检测，将在SVA、FMDV、SVDV和VSV的检测及疫苗生产、例如疫苗生产过程中的质量监控和合理化配苗中发挥重要作用，应用前景广阔。
- 用于检测呼吸道病毒的试剂盒及其应用-201910677694.5
- 卢孟孟;胖铁良;王文轩;马蒙蒙;孙晋华;李建中 - 廊坊诺道中科医学检验实验室有限公司
- 2019-07-25 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种用于检测呼吸道病毒的引物探针组合，包括16对引物及对应的16条探针。本发明还提供了用于检测呼吸道病毒的试剂盒，包括用于检测呼吸道病毒的引物探针组合。本发明还提供了用于检测呼吸道病毒的试剂盒在检测或辅助检测呼吸道病毒中的非诊断目的的应用。应用本发明提供的用于检测呼吸道病毒的试剂盒能同时检测16种呼吸道病毒，实现多重检测，灵敏度高，快捷方便，可实现对样本进行批量检测。
- 新型鹅星状病毒SYBR Green染料法荧光定量PCR检测试剂盒-201910700274.4
- 李宁;刘思当;蔡玉梅;杨玉栋;姜胜男;赵君 - 山东农业大学
- 2019-07-31 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种新型鹅星状病毒荧光定量PCR检测试剂盒。所述荧光定量PCR检测试剂盒中含有SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.2所示的引物对，以及标准品质粒和荧光定量PCR反应试剂。本发明的荧光定量PCR试剂盒可以对新型鹅星状病毒进行检测，该试剂盒的特异性强，只与新型鹅星状病毒特异性结合，与其他鹅源病毒都没有交叉反应；而且检测的灵敏度高，在标准品为1×101‑1×107拷贝范围内都有极好的线性关系，可以高效检测新型鹅星状病毒病鹅组织以及无临床症状的病毒携带鹅，提高了检测效率。
- 非洲猪瘟病毒荧光型RAA检测试剂盒-201910773232.3
- 赵林萍;娄亚坤;杨楠;付燕峰;梁小红;任宝红;崔兴涛;曾小宇 - 郑州中道生物技术有限公司;河南中标检测服务有限公司;郑州大学
- 2019-08-21 - 2019-10-22 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒荧光型RAA检测试剂盒，包括特异性引物ASFV‑F和ASFV‑R，以及RAA‑exo探针ASFV‑P，用四氢呋喃(THF残基)，dT‑荧光团和dT‑淬灭团取代靶标扩增子序列内的碱基，标记的报告荧光染料为FAM，荧光淬灭基团为BHQ‑1，试剂中的核酸外切酶可在THF位点裂解探针，从而分离荧光基团和淬灭基团并产生荧光信号。本发明提供的试剂盒可在37～42℃恒温条件下，20min内实现非洲猪瘟病毒的检测，特异性为100％，检测敏感性为10copies/μl。因此，本发明的试剂盒具有操作简单、快速、灵敏的特点，为非洲猪瘟病毒的现场快速检测筛查提供有效的技术手段。
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