[发明专利]一种改良结晶紫染色法检测精子顶体的方法在审
| 申请号： | 201711040233.4 | 申请日： | 2017-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN107807032A | 公开（公告）日： | 2018-03-16 |
| 发明（设计）人： | 高晓勤;戴研平;杨薇;杨喆;马晓萍;李淑钗;岳应权;王平 | 申请（专利权）人： | 高晓勤;遵义医药高等专科学校 |
| 主分类号： | G01N1/30 | 分类号： | G01N1/30 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙)11491 | 代理人： | 赵红霞 |
| 地址： | 550004 贵州省贵阳*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明属于精子顶体检测技术领域，公开了一种改良结晶紫染色法检测精子顶体的方法，包括制备改良明胶底膜片；采集的新鲜精液液化后，离心弃精浆，沉淀物悬浮于磷酸盐缓冲液中，恒温箱放置，取精子悬浮液均匀地铺在明胶膜片上，置37℃温箱中孵育，分别于30min，取出镜检。将结晶紫染液滴加在已固定的涂片上染1～3min后，用水洗去多余燃料；滴加Lugol碘液，1min后水洗，再滴加95％酒精分色，摇动玻片至紫色不再褪色为止，流水冲洗，干后镜检。采用简便、快速和媒染的结晶紫染色法能增强细胞的染色亲和力，由脱色处理测知燃料与被污染物之间的结合牢度，从而鉴别细胞结构间的差异，较好地显示精子顶体的情况。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 改良 结晶 染色 检测 精子 方法 | ||
【主权项】：
一种改良结晶紫染色法检测精子顶体的方法，其特征在于，所述改良结晶紫染色法检测精子顶体的方法包括以下步骤：步骤一，采用5％明胶水溶液20ml、0.05％戊二醛液50ml，pH7.0巴比安醋酸缓冲液100ml；0.5％台盼蓝溶液50ml；pH7.3、磷酸盐缓冲液100ml；双蒸水500ml制备改良明胶底膜片；步骤二，采集的新鲜精液液化后，离心弃精浆，沉淀物悬浮于两倍以上pH7.3的0.1mol/L磷酸盐缓冲液中，36℃恒温箱放置15～20min后，取精子悬浮液均匀地铺在明胶膜片上，置37℃温箱中孵育，分别于30min及1、2、3h取出镜检。步骤三，将结晶紫染液滴加在已固定的涂片上染1～3min后，用水洗去多余燃料；滴加Lugol碘液，1min后水洗，再滴加95％酒精分色，摇动玻片至紫色不再褪色为止，流水冲洗，干后镜检。
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