[发明专利]一种用于抗体‑分子定点偶联的方法及应用在审
| 申请号： | 201710864001.4 | 申请日： | 2017-09-22 |
| 公开（公告）号： | CN107501388A | 公开（公告）日： | 2017-12-22 |
| 发明（设计）人： | 蔡红东;陈昌岳;刘关;段彪;李静;张祥林 | 申请（专利权）人： | 上海美吉医学检验有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/10 | 分类号： | C07K1/10;C07K1/107 |
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| 地址： | 201321 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明利用酶法和化学法相结合，提供一种最佳的抗体‑分子定点偶联方案首先通过酶法对抗体Fc片段的糖苷位点进行脱糖基化暴露出不同位置和个数的GlcNAc位点；然后由相应的酶或突变体通过转糖基作用将半乳糖UDP‑Gal或修饰有特殊官能团的供体半乳糖衍生物修饰到抗体的GlcNAc位点，其中对于修饰有半乳糖Gal末端的抗体还需利用唾液酸糖基转移酶将修饰有特殊官能团的供体唾液酸衍生物修饰到抗体的Gal末端位点，从而获得带有特殊官能团修饰的抗体；最后利用化学反应将带有特殊官能团的其他分子物质定点偶联在抗体的Fc区。本方案可以准确、可控地得到不同位置和个数的裸露的抗体的GlcNAc位点，使得抗体定点偶联上相同个数的其他分子，实现抗体‑分子定点偶联。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 抗体 分子 定点 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种用于抗体‑分子定点偶联的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：a.进行IgG抗体或IgG‑Fc片段脱糖基化：提供IgG抗体或IgG‑Fc片段以及酶，所述酶与IgG抗体或IgG‑Fc片段的糖苷位点进行酶反应，使得IgG抗体或IgG‑Fc片段脱糖基化暴露出不同位置和个数的GlcNAc位点；b.对抗体特定位点进行特殊官能团修饰：根据步骤a所得产物GlcNAc位点是否可直接进行特殊官能团修饰分别进行如下不同操作：b1.提供相应的酶，通过转糖基作用将半乳糖UDP‑Gal修饰到抗体的GlcNAc位点；然后利用唾液酸糖基转移酶将修饰有特殊官能团的供体唾液酸衍生物修饰到抗体新的Gal末端位点，从而对抗体特定位点进行特殊官能团修饰；或者b2.提供相应的酶突变体，通过转糖基作用将修饰有特殊官能团的供体半乳糖衍生物修饰到抗体的GlcNAc位点，从而对抗体特定位点进行特殊官能团修饰；c.进行化学反应获得抗体‑分子偶联物：通过化学反应将带有特殊官能团的其他分子物质定点偶联在抗体的Fc区，以形成具有相同个数的抗体‑分子偶联物。
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