[发明专利]单克隆抗体的制备方法在审
| 申请号： | 201710772030.8 | 申请日： | 2017-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN109422808A | 公开（公告）日： | 2019-03-05 |
| 发明（设计）人： | 翟乾 | 申请（专利权）人： | 翟乾 |
| 主分类号： | C07K16/14 | 分类号： | C07K16/14;C12N15/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 225000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明提供了生物科技领域内的单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：（1）取8周龄雌性小鼠10只，眼眶采血获得阴性血清，用OTA‑BSA作为免疫原对小鼠进行免疫，首免时,取免疫原2 mg,配制抗原浓度为1mg弗氏完全佐剂抗原，充分乳化制油包水乳剂,对小鼠进行免疫；间隔2周后进行二免,用弗氏不完全佐剂抗原对小鼠进行免疫；最后一次加强免疫用PBS稀释的免疫原液；（2）制备血清并筛选免疫小鼠血清，选择骨髓瘤细胞系，对骨髓瘤细胞的复苏和培养；（3）制备饲养细胞和制备免疫小鼠脾细胞悬液，进行细胞的融合；（4）筛选杂交瘤细胞，对阳性杂交瘤细胞进行克隆，将杂交瘤细胞进行冻存和复苏；（5）大量制备单克隆抗体；本发明可提高对抗OTA的免疫力。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 单克隆抗体 抗原 小鼠 免疫原 弗氏不完全佐剂 免疫小鼠脾细胞 阳性杂交瘤细胞 弗氏完全佐剂 骨髓瘤细胞系 免疫小鼠血清 骨髓瘤细胞 筛选杂交瘤 油包水乳剂 杂交瘤细胞 复苏 细胞 雌性小鼠 加强免疫 生物科技 饲养细胞 眼眶采血 阴性血清 血清 冻存 乳化 悬液 免疫力 配制 克隆 筛选 对抗 融合 | ||
【主权项】：
1.单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取8周龄Balb/c雌性小鼠丨0只,免疫前观察一周，并眼眶采血获得阴性血清，用OTA‑BSA作为免疫原对小鼠进行免疫，免疫剂量为100μg/只，首免时,取免疫原2 mg,配制抗原浓度为1 mgtnri的弗氏完全佐剂抗原1 ml，充分乳化制油包水(W/0)乳剂,对Balb/c小鼠进行免疫；间隔2周后进行二免,用弗氏不完全佐剂抗原1 ml对小鼠进行免疫；每间隔2周加强免疫1次,共加免4次,最后一次加强免疫用PBS稀释的免疫原液；（2）制备免疫小鼠血清并筛选免疫小鼠血清，选择骨髓瘤细胞系，对选择的骨髓瘤细胞的复苏和培养；（3）制备饲养细胞和制备免疫小鼠脾细胞悬液，进行细胞的融合；（4）筛选杂交瘤细胞，对阳性杂交瘤细胞进行克隆，将杂交瘤细胞进行冻存和复苏；（5）大量制备单克隆抗体。
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- 赵桂秋;林静;高昂;徐强;黄晓明;胡丽婷;王谦;姜楠;李翠 - 青岛大学附属医院;赵桂秋
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- 本发明涉及免疫技术领域，特别涉及一种特异性抗镰刀菌感染的鸡卵黄抗体及其应用，制作步骤如下：1.制备镰刀菌菌抗原；2.对产蛋母鸡进行免疫注射；3.采用硫酸铵盐析法制备特异性鸡卵黄抗体冻干粉。采用此种方法制备的特异性抗镰刀菌感染的鸡卵黄抗体效价高于1：10000，采用本方法制备的特异性抗镰刀菌感染的鸡卵黄抗体是一种生物制剂，对人体产生的副作用小，对人体结膜、角膜、各处粘膜、皮肤等刺激性小，外用或者口服都无不良反应，理化性质稳定可长期保存，特别适合局部应用治疗眼表、口腔、皮肤等处的镰刀菌感染。
- 抑灭霉菌毒素的基因工程重组高纯度抗霉菌毒素单抗和复合单抗制备方法及其组合制剂-201510081592.9
- 包晟;张善钧;曹天福;汪玲;包海威 - 深圳雅臣生物科技有限公司
- 2015-02-13 - 2015-06-10 - C07K16/14
- 本发明涉及抑灭霉菌毒素的基因工程重组高纯度抗霉菌毒素单抗和复合单抗制备方法及其组合制剂，制备方法包括：筛选霉菌毒素；将霉菌毒素与载体蛋白连接，制备免疫用抗原；进行免疫和细胞融合，制得杂交瘤细胞；基因克隆，构建抗霉菌毒素单抗Ig并在工程菌中表达；重组工程菌发酵放大，培养制得抗霉菌毒素抗体Ig的菌体；进行细胞破碎，过滤除菌和除病毒，经离心、纯化、层析，制备高纯度抗霉菌毒素单抗Ig和复合单抗IgC之可溶性抗体蛋白。这种抗霉菌毒素单抗和复合单抗可作为粮食除霉剂和饲料成份以及制成动物用药，采用该抗霉菌毒素单抗Ig和复合单抗IgC及其组合制剂可有效降解饲料及食品中的霉菌毒素，预防和治疗霉菌毒素中毒疾病。
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