本发明涉及一种黄曲霉毒素B1纳米抗体、自组装多价融合纳米抗体及制备方法。本发明提供了黄曲霉毒素B1纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。同时提供了自组装多价黄曲霉毒素B1融合纳米抗体，其由黄曲霉毒素B1纳米抗体、荧光蛋白和六个组氨酸标签H6融合在一起得到。本发明提供了一种特异性较高、灵敏度高的黄曲霉毒素B1纳米抗体，并通过自组装多价融合纳米抗体的构建进一步提高了纳米抗体的亲和力、灵敏度，同时可发出荧光，在建立荧光检测方法中无需引入外源荧光探针，简化制备步骤，降低成本，为建立更高效、灵敏、低廉的免疫快速检测方法提供可能。
本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种黄曲霉毒素M1抗独特型纳米抗体及其制备方法。所述黄曲霉毒素M1抗独特型纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明采用黄曲霉毒素M1单克隆抗体免疫羊驼，通过提取其白细胞总RNA构建噬菌体展示纳米抗体文库，且库容量高，多样性好；以黄曲霉毒素M1单克隆抗体为靶标物，采用四轮亲和富集淘选，逐轮降低包被浓度和竞争洗脱浓度，淘选获得特异性良好的阳性噬菌体黄曲霉毒素M1抗独特型纳米抗体；将阳性噬菌体黄曲霉毒素M1抗独特型纳米抗体基因转化到表达菌株，经诱导表达、纯化、鉴定，获得性能优良的蛋白形式纳米抗体VHH C4。
本发明公开了黄曲霉毒素风险预警智能感知卡及其应用。包括黄曲霉毒素预警分子纳米抗体或黄曲霉毒素预警分子单克隆抗体、信号材料标记的黄曲霉毒素预警分子兔多克隆抗体、样品垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、底板、羊抗兔抗体，所述的黄曲霉毒素预警分子是指AFT‑YJFZ01肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。其用于快速感知曲霉属产毒黄曲霉菌株产黄曲霉毒素能力和鉴别农田、农产品、中药材、饲料等产品中是否存在强产毒力的黄曲霉毒素产毒菌株，以及智能感知农产品中黄曲霉毒素污染风险水平，容易推广应用。
本发明提供农田黄曲霉毒素产毒菌相对丰度快速鉴别方法及其应用。鉴别方法:(1)用察氏培养基或其他适宜产毒黄曲霉菌生长的培养基培养待测土壤样品并制备待鉴别土壤样品的待测液，备用；(2)采用间接非竞争双抗体夹心法鉴别比较农田土壤中黄曲霉毒素的产毒真菌相对丰度；(3)通过比较AFT‑YJFZP008浓度，得知农田土壤中黄曲霉毒素的产毒真菌相对丰度；所述的指示黄曲霉毒素产毒菌产毒力的分子是指AFT‑YJFZP008肽，其氨基酸序列见SEQ ID NO.1所示。其用于鉴别农田土壤样品中黄曲霉毒素的产毒真菌相对丰度，鉴别速度快，及时性和实用性强，容易推广应用，可应用于田间黄曲霉毒素的产毒真菌发生风险监测。
本发明涉及一种黄曲霉毒素产毒真菌的产毒力指示分子快检试剂盒及其用途。包括孔底包被有指示黄曲霉毒素产毒菌产毒力的分子的纳米抗体或单克隆抗体的酶标板、指示黄曲霉毒素产毒菌产毒力的分子的多克隆抗体、起标准物质作用的指示黄曲霉毒素产毒菌产毒力的分子纯品溶液、察氏培养基、辣根过氧化物酶标记抗体、ELISA显色液与终止液、样品稀释液；所述的指示黄曲霉毒素产毒菌产毒力的分子是指AFT‑YJFZP008肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。可用于快速定量检测指示黄曲霉毒素产毒菌产毒力的分子AFT‑YJFZP008，可用于鉴别比较曲霉属黄曲霉毒素产毒菌株产黄曲霉毒素能力，易操作，实用性强，容易推广应用。
本发明公开了黄曲霉毒素污染早期风险预警智能感知卡及其应用。包括黄曲霉毒素预警分子纳米抗体或黄曲霉毒素预警分子单克隆抗体、信号材料标记的黄曲霉毒素预警分子兔多克隆抗体、样品垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、底板、羊抗兔抗体，所述的黄曲霉毒素预警分子是指AFT‑YJFZP008肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。其用于快速感知曲霉属产毒黄曲霉菌株产黄曲霉毒素能力和鉴别农田、农产品、中药材、饲料等产品中是否存在强产毒力的黄曲霉毒素产毒菌株，以及智能感知农产品中黄曲霉毒素污染风险水平，容易推广应用。
