本发明涉及一种黄曲霉毒素B1纳米抗体、自组装多价融合纳米抗体及制备方法。本发明提供了黄曲霉毒素B1纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。同时提供了自组装多价黄曲霉毒素B1融合纳米抗体，其由黄曲霉毒素B1纳米抗体、荧光蛋白和六个组氨酸标签H6融合在一起得到。本发明提供了一种特异性较高、灵敏度高的黄曲霉毒素B1纳米抗体，并通过自组装多价融合纳米抗体的构建进一步提高了纳米抗体的亲和力、灵敏度，同时可发出荧光，在建立荧光检测方法中无需引入外源荧光探针，简化制备步骤，降低成本，为建立更高效、灵敏、低廉的免疫快速检测方法提供可能。
本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种黄曲霉毒素M1抗独特型纳米抗体及其制备方法。所述黄曲霉毒素M1抗独特型纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明采用黄曲霉毒素M1单克隆抗体免疫羊驼，通过提取其白细胞总RNA构建噬菌体展示纳米抗体文库，且库容量高，多样性好；以黄曲霉毒素M1单克隆抗体为靶标物，采用四轮亲和富集淘选，逐轮降低包被浓度和竞争洗脱浓度，淘选获得特异性良好的阳性噬菌体黄曲霉毒素M1抗独特型纳米抗体；将阳性噬菌体黄曲霉毒素M1抗独特型纳米抗体基因转化到表达菌株，经诱导表达、纯化、鉴定，获得性能优良的蛋白形式纳米抗体VHH C4。
本发明公开了黄曲霉预警分子参考物质、制备方法及其应用。其由黄曲霉产毒菌制备获得，含有黄曲霉毒素预警分子AFT‑YJFZP008，黄曲霉毒素预警分子AFT‑YJFZP008的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，黄曲霉预警分子参考物质通过检测标定其中AFT‑YJFZP008的含量，作为参考物质使用。可用于鉴别比较农田土壤、农产品及饲料等产品的黄曲霉毒素污染风险水平；稳定性好，货架期长，易操作，实用性强，容易推广应用。
