[发明专利]钙蛋白酶磷酸化水平的测定方法在审
| 申请号： | 201510919423.8 | 申请日： | 2015-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN105334329A | 公开（公告）日： | 2016-02-17 |
| 发明（设计）人： | 张德权;杜曼婷;陈丽;李铮;李欣;高星;李蒙;高玲玲 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院农产品加工研究所 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 史霞 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种钙蛋白酶磷酸化水平的测定方法，包括：步骤一、将含有钙蛋白酶的蛋白样品的蛋白浓度调至5.83～12.5μg/μl，之后向其中加入磷酸化抗体，磷酸化抗体与含有钙蛋白酶的蛋白样品中的蛋白的总反应量的质量比为1:1750～2500，然后将二者于4℃下震荡孵育，以形成免疫复合物，再通过蛋白质免疫沉淀方法富集得到磷酸化的钙蛋白酶样品；以及，步骤二、通过蛋白质免疫印迹方法检测步骤一中得到的磷酸化的钙蛋白酶样品的磷酸化水平。本发明通过蛋白质免疫沉淀和免疫印迹技术可以在宰后肌肉中检测出磷酸化的钙蛋白酶，所需的肌肉样品量少，操作过程简单，重复性好，检测所得条带清晰，试验方法对人体的潜在伤害小。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白酶 磷酸化 水平 测定 方法 | ||
【主权项】：
一种钙蛋白酶磷酸化水平的测定方法，包括：步骤一、将含有钙蛋白酶的蛋白样品的蛋白浓度调至5.83～12.5μg/μl，之后向其中加入磷酸化抗体，所述磷酸化抗体与所述含有钙蛋白酶的蛋白样品中的蛋白的总反应量的质量比为1:1750～2500，然后将含有钙蛋白酶的蛋白样品与磷酸化抗体于4℃下震荡孵育，以形成免疫复合物，再通过蛋白质免疫沉淀方法富集得到磷酸化的钙蛋白酶样品。步骤二、通过蛋白质免疫印迹方法检测所述步骤一中得到的所述磷酸化的钙蛋白酶样品的磷酸化水平。
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