[发明专利]一种幽门螺旋杆菌四价黏附因子多表位疫苗及其制备方法有效
| 申请号： | 201510407694.5 | 申请日： | 2015-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN105126093B | 公开（公告）日： | 2018-07-10 |
| 发明（设计）人： | 郭乐;刘昆梅;汤锋;贾伟;李永红;秦玉红 | 申请（专利权）人： | 宁夏医科大学 |
| 主分类号： | A61K39/106 | 分类号： | A61K39/106;A61P31/04;C12N15/70;C12N15/62;C07K19/00;C07K1/18 |
| 代理公司： | 宁夏合天律师事务所 64103 | 代理人： | 杨丽坤;孙彦虎 |
| 地址： | 750004 宁夏回族自治区*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | 本发明提供一种可针对幽门螺旋杆菌四种关键黏附因子的多表位疫苗，其活性是一条多肽，主要由尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的优势Th和B细胞抗原表位或区段以及霍乱毒素B亚基构成。本发明通过基因合成技术合成一个人工基因，其包含尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的优势Th和B细胞抗原表位或区段，将该人工基因与霍乱毒素B亚基的基因序列相偶联，形成一个融合基因。利用大肠杆菌表达该融合基因，经蛋白纯化后，获得四价黏附因子多表位疫苗。该疫苗能够诱发机体产生针对尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的T细胞免疫应答和特异性抗体体液免疫应答，可用于防治幽门螺旋杆菌感染相关性疾病。 | ||
| 搜索关键词： | 多表位疫苗 外膜蛋白 尿素酶 黏附 霍乱毒素B亚基 幽门螺旋杆菌 人工基因 融合基因 四价 幽门螺旋杆菌感染 大肠杆菌表达 基因合成技术 体液免疫应答 特异性抗体 蛋白纯化 基因序列 多肽 可用 偶联 应答 制备 诱发 合成 疫苗 防治 疾病 | ||
【主权项】：
1.一种幽门螺旋杆菌四价黏附因子多表位疫苗，其活性成分是一条多肽，主要由霍乱毒素B 亚基(CTB)和黏附因子多表位肽FAdE构成，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
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- 本发明涉及疫苗学领域，具体的说是一种鳗弧菌减毒疫苗及其应用。减毒疫苗菌株为鳗弧菌C312在含逐渐升高浓度的利福平的培养基中培养，直至培养到培养基中利福平浓度为100ug/ml，所得转化菌株为减毒疫苗菌株C312RM。本发明的疫苗可经由口服或浸泡方式传递，因此避免了常规的注射传递模式，操作简单，成本低廉，可以广泛用于各种养殖条件，具有良好的应用前景。
- 抗霍乱和肠产毒性大肠杆菌（ETEC）腹泻的疫苗-201080041458.1
- 扬·霍姆格伦;迈克尔·莱本斯 - 戈托瓦克斯公司
- 2010-09-16 - 2012-08-08 - A61K39/106
- 提供了包含霍乱弧菌(Vibrio cholerae)O1细胞的抗霍乱和/或抗ETEC疫苗，其特征在于所述细胞包含Ogawa和Inaba两种血清型的O1抗原。还提供了用于该疫苗的遗传修饰的霍乱弧菌O1细胞、用于所述修饰的DNA构建体、所述疫苗的用途以及制造疫苗的方法。
- 一种多糖和蛋白的偶联物-201210039757.2
- 曹诚;王远;靳彦文;刘萱 - 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所
- 2012-02-20 - 2012-07-18 - A61K39/106
- 本发明公开了一种多糖和蛋白的偶联物。上述多糖和蛋白的偶联物，是由霍乱弧菌脂多糖和霍乱毒素无毒亚单位蛋白偶联而成。所述霍乱弧菌脂多糖来自霍乱弧菌0139。所述霍乱弧菌脂多糖中蛋白含量不大于2％，核酸含量不大于5％，所述霍乱弧菌脂多糖的分子量为8Kd。本发明提供的多糖和蛋白的偶联物的免疫效果高于常用的rBS-WC疫苗、单一的LPS疫苗或单一的CTB疫苗，其即能增强LPS的免疫原性，使诱导的免疫反应具有免疫记忆和加强效应，产生大量的杀菌抗体，适用于各种人群；又能引发机体的粘膜免疫，使肠分泌液和胆汁中大量存在IgA抗体。
- 副溶血性弧菌类毒素疫苗的制备方法与用途-201110256786.X
- 王洪斌;成明;李信书;李士虎 - 淮海工学院
- 2011-09-01 - 2011-12-14 - A61K39/106
- 本发明是一种副溶血性弧菌类毒素疫苗的制备方法，其特征在于：先扩增目的基因tdh：再将目的基因片段tdh克隆至载体pET-28，构建表达载体pET-28-TDH，pET-28-TDH质粒转入表达菌株BL21；培养，诱导表达后，得克隆表达产物；对克隆表达产物斑点印迹反应检测，得到副溶血性弧菌类毒素；将副溶血性弧菌类毒素与等体积的弗氏完全佐剂混合均匀，即得副溶血性弧菌类毒素疫苗。本发明方法制得的副溶血性弧菌类毒素疫苗可用于受到副溶血性弧菌攻击的海洋鱼类的免疫药物的用途，其免疫保护率可达50%左右。
- 一种幽门螺旋杆菌表位疫苗及其设计、制备方法和应用-201110068046.3
- 奚涛;郭乐;邢莹莹;何赟绵;王学全 - 中国药科大学
- 2011-03-22 - 2011-08-17 - A61K39/106
- 本发明提供一种幽门螺旋杆菌表位疫苗。本发明的幽门螺旋杆菌表位疫苗，其活性成分是一条多肽，主要是由霍乱毒素B亚基和一个来自于尿素酶A亚基的B细胞抗原表位构成。该表位疫苗是通过PCR技术合成上述尿素酶A亚基的B细胞抗原表位的核苷酸序列，并将其与霍乱毒素B亚基的基因序列相偶联，形成一个融合基因，并利用表达载体在大肠杆菌中表达该融合基因，经蛋白纯化后，得到该表位疫苗的融合蛋白。本发明的幽门螺旋杆菌表位疫苗能够诱发机体产生针对尿素酶的较高滴度表位特异性抗体。在生物医药领域内，该表位疫苗可用于预防和治疗幽门螺旋杆菌感染相关性疾病，带来巨大的经济效益和社会效益。
- 半滑舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗的制备与使用方法-201110086569.0
- 张晓君;阎斌伦 - 淮海工学院
- 2011-04-07 - 2011-08-03 - A61K39/106
- 本发明是一种半滑舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗的制备方法，其特征在于：将美人鱼发光杆菌ST1菌株接种在普通营养琼脂肉汤培养基上，28℃培养24h，加入终浓度0.3%的甲醛28℃灭活48h，得灭活菌体；取黄芪用蒸馏水浸泡后煎煮，过滤，浓缩得黄芪浸出液；将灭活菌体与得黄芪浸出液混合制得半滑舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗。本发明疫苗能使半滑舌鳎产生良好的免疫应答，增强半滑舌鳎对病原美人鱼发光杆菌的免疫力，提高半滑舌鳎养殖的成活率，增加半滑舌鳎养殖的产量，提高半滑舌鳎养殖生产的经济效益。从根本上解决了目前半滑舌鳎养殖生产过程中易发生美人鱼发光杆菌所致疾病的问题。本发明还公开了一种半滑舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗的使用方法。
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