[发明专利]一种提取草莓RNA的方法

摘要

本发明涉及生物学技术领域，公开了一种提取草莓RNA的方法，包括以下步骤：用裂解液裂解植物组织样品，用氯仿/异戊醇混合液纯化裂解样品，用沉淀液沉淀裂解样品，用溶解液溶解沉淀，用氯仿/异戊醇混合液纯化含沉淀的溶解液，用乙醇沉淀纯化过的溶解液，用DEPC水溶解沉淀，沉淀在无菌工作台吹干，然后向沉淀中加入DEPC水，即为草莓RNA溶液。本发明综合应用了CTAB和SDS的高裂解能力，LiCl和无水乙醇的沉淀方法，最终得到高糖多酚类植物草莓高质量的RNA。本发明解决了草莓次生物含量高导致的高质量RNA提取困难的问题。

主权项

一种提取草莓RNA的方法，其特征在于：包括以下步骤，(1)将裂解液预热到55～65℃，每1g草莓果实或叶片粉末中加入5～10ml预热后的裂解液，在55～65℃下保温1～5分钟，其间晃动1～2次使其混合，得到混合物Ⅰ；(2)再加入氯仿/异戊醇混合液，加入的氯仿/异戊醇混合液与裂解液等体积；混合后在15℃以上离心，收集上清液；(3)再加入8‑14M LiCl和无水乙醇，其中，加入LiCl的体积是上清液的1/6‑1/3，加入无水乙醇的体积是上清液的1/10‑4/10；在1～4℃放置1h～12h，2‑5℃离心后，收集沉淀；(4)将溶解液预热到55‑70℃，用预热后的溶解液溶解沉淀；(5)向步骤(4)得到的含沉淀的溶解液中加入与含沉淀的溶解液等体积的氯仿/异戊醇混合液，2‑5℃离心分离得到上清液；(6)向步骤(5)得到的上清液中加入乙醇，加入乙醇的体积为步骤(5)得到的上清液的2～3倍，‑15至‑25℃放置30min以上，2‑5℃离心，收集沉淀；(7)步骤(6)所得的沉淀物中加入含有75‑85％乙醇的DEPC水，加入含有75‑85％乙醇的DEPC水的体积为步骤(5)加入乙醇体积的0.5‑1.5倍，2‑5℃离心收集沉淀物；(8)将步骤(7)所得的沉淀物放在无菌工作台上吹干，吹干后加入DEPC水使沉淀物溶解，所得混合物为草莓RNA；其中，步骤(1)中，裂解液包括1‑5％(m/V)的CTAB和1‑5％的SDS。