[发明专利]条件型伊维菌素受体IVMR转基因小鼠模型的构建方法及应用

摘要

本发明涉及一种条件型伊维菌素受体(ivermectin receptor，IVMR)转基因小鼠模型的构建方法及其应用，属于条件型动物模型的构建方法及应用技术领域。在Cre重组酶的作用下，该小鼠模型的所有细胞(特别是脑神经元)中均能条件型的表达伊维菌素受体IVMR，通过施加药物伊维菌素(ivermectin，IVM)可以下调表达伊维菌素受体IVMR的神经元的兴奋性。与现有技术相比，本发明的技术方法(包括给药方式，针对使用特定表达Cre的转基因小鼠)对小鼠没有任何脑部损伤。本发明使用的药物伊维菌素IVM对动物的影响具有足够长的半衰期，适合进行动物行为实验。另外半衰期也相对稳定，可以在药物失效后再次实验，方便的对同一个动物的进行前后比较实验。

主权项

一种条件型伊维菌素受体IVMR转基因小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将IVMR‑2A‑GFP的序列插入到Rosa26基因位点的下游，紧接在一个loxP位点包围的STOP元件后面，构建Rosa26‑IVMR打靶载体；(2)将Rosa26‑IVMR打靶载体电转进小鼠胚胎干细胞中进行同源重组，经过正负筛选和PCR筛选完成同源重组的胚胎干细胞；(3)将阳性的胚胎干细胞移植进母鼠的囊胚中，选取出生的嵌合小鼠与野生型小鼠进行交配，鉴定为阳性的子代小鼠即为IVMR转基因小鼠；(4)将表达Cre重组酶的病毒经立体定位注射进IVMR转基因小鼠的脑中，或者将特定神经元表达Cre重组酶的小鼠与IVMR转基因小鼠进行交配，得到的双阳性的子代小鼠，成功构建条件型IVMR转基因小鼠。