[发明专利]条件型伊维菌素受体IVMR转基因小鼠模型的构建方法及应用有效
| 申请号： | 201410363847.6 | 申请日： | 2014-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN104131036B | 公开（公告）日： | 2017-02-22 |
| 发明（设计）人： | 丁玉强;胡玲;张玲;黄缨;张磊;宋宁宁 | 申请（专利权）人： | 同济大学 |
| 主分类号： | C12N15/89 | 分类号： | C12N15/89;A01K67/027;A61K49/00 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司31225 | 代理人： | 叶敏华 |
| 地址： | 200092 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 条件 型伊维 菌素 受体 ivmr 转基因 小鼠 模型 构建 方法 应用 | ||
1.一种条件型伊维菌素受体IVMR转基因小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将IVMR-2A-GFP的序列插入到Rosa26基因位点的下游，紧接在一个loxP位点包围的STOP元件后面，构建Rosa26-IVMR打靶载体；
(2)将Rosa26-IVMR打靶载体电转进小鼠胚胎干细胞中进行同源重组，经过正负筛选和PCR筛选完成同源重组的胚胎干细胞；
(3)将阳性的胚胎干细胞移植进母鼠的囊胚中，选取出生的嵌合小鼠与野生型小鼠进行交配，鉴定为阳性的子代小鼠即为IVMR转基因小鼠；
(4)将表达Cre重组酶的病毒经立体定位注射进IVMR转基因小鼠的脑中，或者将特定神经元表达Cre重组酶的小鼠与IVMR转基因小鼠进行交配，得到的双阳性的子代小鼠，成功构建条件型IVMR转基因小鼠。
2.根据权利要求1所述的一种条件型伊维菌素受体IVMR转基因小鼠模型的构建方法，其特征在于，步骤(1)～步骤(4)中分别进一步包括对所获得的小鼠利用特异基因扩增引物进行基因型鉴定。
3.一种采用权利要求1方法得到的条件型伊维菌素受体IVMR转基因小鼠模型。
4.一种采用权利要求1方法得到的条件型伊维菌素受体IVMR转基因小鼠模型在研究脑神经元活性下降与神经元功能和动物行为中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，对注射病毒或者特定神经元表达Cre重组酶的IVMR转基因小鼠给药伊维菌素IVM，降低特定神经元的活性。
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