[发明专利]糜蛋白酶原的仿生亲和材料的制备及糜蛋白酶纯化方法有效
| 申请号： | 201310369661.7 | 申请日： | 2013-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN104419695B | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 李荣秀;马贵军;翟东改;阳成成 | 申请（专利权）人： | 上海亨臻实业有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/76 | 分类号： | C12N9/76 |
| 代理公司： | 31266 上海一平知识产权代理有限公司 | 代理人： | 崔佳佳;马莉华<国际申请>=<国际公布> |
| 地址： | 200131上海市浦东新区自*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种糜蛋白酶原仿生亲和材料的制备及糜蛋白酶纯化方法，包括下列步骤：(1)基础层析介质与三氯三氮嗪反应活化后，分别与L‑缬氨酸以及对氨基苯磺酸反应，合成仿生亲和分离材料；(2)用制备的仿生亲和分离材料纯化糜蛋白酶原，将含有糜蛋白酶原的样品流过该亲和层析柱，糜蛋白酶原吸附在亲和层析柱上，冲洗亲和层析柱，不吸附在亲和层析柱上的杂蛋白被除去，然后变换缓冲液条件，将结合的糜蛋白酶原洗脱下来。(3)用胰蛋白酶进行糜蛋白酶原的激活。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高酶活的糜蛋白酶。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白酶 仿生 亲和 材料 制备 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种糜蛋白酶原仿生亲和材料的制备及糜蛋白酶纯化方法，其特征在于，包括下列步骤：/n(1)用制备的仿生亲和分离材料纯化胰脏提取液上清，从而获得经纯化的糜蛋白酶原，其中所述仿生亲和分离材料的结构是在基础层析介质上通过三氮嗪骨架作为间臂偶联L-缬氨酸及对氨基苯磺酸而形成的；/n(2)用胰蛋白酶进行糜蛋白酶原的激活，得到糜蛋白酶。/n
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