[发明专利]一种小麦麸皮抗冻蛋白的制备方法无效
| 申请号： | 200610166427.4 | 申请日： | 2006-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN1995062A | 公开（公告）日： | 2007-07-11 |
| 发明（设计）人： | 张晖;张超;姚惠源;郭晓娜;王立 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C07K1/36 | 分类号： | C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16;A23J1/12 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214036*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种小麦麸皮抗冻蛋白的制备方法，属于小麦加工副产物的综合利用技术领域。本发明以小麦麸皮为原料，经水提取、硫酸氨沉淀、离子交换色谱、凝胶过滤色谱和冷冻干燥等步骤，分离得到小麦麸皮抗冻蛋白。本发明首次介绍了从小麦麸皮中分离纯化抗冻蛋白的方法。所得小麦麸皮抗冻蛋白产品可用于农业、食品、医学等行业，从而实现小麦麸皮的有效增值和利用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 小麦 麸皮 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种小麦麸皮抗冻蛋白的制备方法，其特征是以小麦麸皮为原料，用小麦麸皮质量/体积比10倍量的去离子水提取，所得提取液使用80％浓度的硫酸氨沉淀，将沉淀在抗冻蛋白提取液中复溶，浓缩，冻干，得小麦麸皮抗冻蛋白粗品；将小麦麸皮抗冻蛋白粗品再次在抗冻蛋白提取液中复溶，依次经过离子交换柱和凝胶过滤柱进行分离纯化，最终得到小麦麸皮抗冻蛋白，其纯度达到84.47％；工艺为：(1)去离子水提取：将小麦麸皮与10倍质量/体积比的去离子水混合，20℃，200转/分钟搅拌4小时，将混合液在2000g的离心力下离心30分钟，收集上清液；(2)用硫酸氨沉淀：向上清液中缓慢加入硫酸氨粉末，达到80％硫酸氨的饱和浓度，静置60分钟，将静置后的混合液在2000g的离心力下离心30分钟，收集沉淀；(3)复溶、透析、冻干得到粗品：将沉淀复溶于抗冻蛋白提取液中，将复溶的蛋白液放置于截留分子量为6000Da的透析袋中对抗冻蛋白提取液充分透析；透析后，使用聚乙二醇10000对透析袋进行浓缩，当浓缩到本次复溶液原体积的1/15时，停止浓缩，进行冷冻干燥，该冻干粉为小麦麸皮抗冻蛋白粗品；(4)粗品复溶：将小麦麸皮抗冻蛋白粗品复溶于抗冻蛋白提取液中，浓度为20mg/ml；(5)离子交换色谱纯化：用DEAE Sepharose Fast Flow柱，Φ30×300mm，对小麦麸皮抗冻蛋白粗品进行分离，分离首先使用流速1.2ml/min的抗冻蛋白提取液洗脱1小时，接着使用0-1.5M NaCl梯度洗脱5小时，流速为1.2ml/min，紫外检测器检测波长为280nm，收集图1中的P3馏分，将P3馏分放置于截留分子量为6000Da的透析袋中对抗冻蛋白提取液透析，透析后，使用聚乙二醇10000对透析袋进行浓缩，当浓缩到本次复溶液原体积的1/15时，停止浓缩，进行冷冻干燥，得到P3馏分冻干粉；(6)凝胶过滤色谱纯化：将P3馏分的冻干粉复溶于抗冻蛋白提取液中，使用Sephadex G75，Φ20×800mm，进一步进行分离，洗脱液为抗冻蛋白提取液，流速为0.8ml/min，收集图2中的P2馏分，将P2馏分放置于截留分子量为6000Da的透析袋中对抗冻蛋白提取液透析，透析后，使用聚乙二醇10000对透析袋进行浓缩，当浓缩到本次复溶液原体积的1/15时，停止浓缩，进行冷冻干燥，标记为P32，即为小麦麸皮抗冻蛋白冻干粉产品。
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- 本发明提出一种基于青霉胺的多肽二硫键合成方法，采用路线1或2，路线1为：将碘溶于N,N‑二甲基甲酰胺后，加入到已合成好相关序列的树脂A中，氮气鼓吹反应，用剪切液切下多肽，用高效液相色谱分离纯化即得目标产物；路线2为：利用剪切液将合成好相关序列的多肽从树脂A上切下，然后利用高效液相色谱分离出未氧化关环的多肽，将其溶于pH值为7.4‑8.0的磷酸盐缓冲液后，加入氧化剂氧化，用高效液相色谱分离纯化即得目标产物；本发明提出了一种稳定的二硫键的设计、合成策略并将该二硫键作为有效共价反应“弹头”应用于化学生物学领域。
- 一种裸藻蛋白提取液在婴儿尿布疹和湿疹中的用途-202110305160.7
- 李钧翔;王斌梁;夏春鑫;陆益 - 启迪禾美生物科技（嘉兴）有限公司
- 2021-03-22 - 2022-12-02 - C07K1/36
- 本申请涉及护肤品领域，特别是涉及一种裸藻蛋白提取物及其在护肤品中的应用。通过本申请方法获得的纤细裸藻蛋白提取液具有显著的针对婴儿尿布疹和湿疹的治疗效果。
- 一种化妆品蛋白含量提纯控制系统-202211041932.1
- 林健;吴贻彬;余少龙 - 深圳伊赞泉生物科技有限公司
- 2022-08-29 - 2022-11-25 - C07K1/36
- 本发明公开了一种化妆品蛋白含量提纯控制系统，包括提纯控制系统，该提纯控制系统包括沉淀装置、电泳机、透析机、层析机和超速离心机。本发明采用有机溶剂沉淀的方法，相比盐析法，无需脱盐，同时，也避免脱盐过程不干净，导致后期化妆品使用出现过敏的情况，通过搅拌设备的沉淀装置，可提高蛋白液与有机溶剂的混合效果，且配合滤网能够在进料时，进行过滤，避免颗粒杂质影响后期加工质量。
- 蛋白质组学中血清高峰度蛋白的高通量去除装置-202221767691.4
- 金桂丽;马贤良;伊兴领;朱双甜 - 杭州聚米生物科技有限公司
- 2022-07-07 - 2022-11-18 - C07K1/36
- 本实用新型涉及血清蛋白去除技术领域，具体为蛋白质组学中血清高峰度蛋白的高通量去除装置，包括底座，所述底座的顶板上固定安装有固定柱，所述固定柱的一侧板上内嵌安装有直线模组，所述直线模组的滑动端固定安装有承重板，所述承重板的底板上固定安装有安装板，所述安装板底板的中间位置处固定安装有驱动电机，通过设置安装板、第一储液罐、第二储液罐、PH检测仪和驱动电机的配合使用，在进行血清蛋白的去除作业时，通过直线模组的工作使得安装板下降与筒体接触，然后通过第一储液罐和第二储液罐分别往筒体内注入去除血清蛋白的试剂，然后通过驱动电机工作带动搅拌组件转动，加速试剂与筒体内容易的混合速率，加快血清蛋白的去除效率。
- 一种葡萄籽蛋白生产方法-201811427526.2
- 陈建国;庞广宪;梁才;代友彪;汪晶;史敏;董馨;纵瑞奇 - 乌鲁木齐上善元生物科技有限公司
- 2018-11-27 - 2022-11-01 - C07K1/36
- 本发明公开了一种葡萄籽蛋白生产方法，包括外壳体、加热套体、铰链、顶盖、密封垫、内把手、外把手、锁扣、内壳体、固定座、过滤套、搅拌轴、凹槽、塞子和连接轴；本发明具有结构合理简单、生产成本低、安装方便，功能齐全，这里设置的浸泡搅拌装置，能够大大提高葡萄籽蛋白提取液的制取效率和效果；本发明中设置的内把手，便于打开顶盖后直接取出内壳体进行内部杂质的清除，也就提高了使用时的便利性；本发明中设置的挡块，当按下按钮后旋转挡块能够挡住按钮，保证了按钮此时位置不能右移，从而确保连接块能够始终顶紧连接轴使过滤套内部与输出管内部相连通，也就保证了葡萄籽蛋白提取液能够持续通过输出管输出。
- 促进伤口愈合的珍珠多肽凝胶及其应用-202210473248.4
- 阮华君;陶俊俊;唐长明 - 浙江长生鸟健康科技股份有限公司
- 2022-04-29 - 2022-09-16 - C07K1/36
- 本发明涉及一种珍珠多肽凝胶，特别涉及一种促进伤口愈合的珍珠多肽凝胶及其应用，属于生物技术领域。本发明先制备＞10KD的珍珠多肽，然后合成聚(DH‑Se/PEG/PPG氨基甲酸酯)，最后将两者超声溶解后制备成珍珠多肽凝胶。经实验证明，本发明的珍珠多肽凝胶对皮肤成纤维细胞具有促进增殖、迁移的作用，并具有抗氧化的作用；本发明的珍珠多肽凝胶在促进烧烫伤伤口愈合及皮肤修复方面的功效显著，伤口修复快。
- 用于病毒清除的疏水相互作用色谱-202180009282.X
- J·路皮诺;J·马蒂拉;R·斯泰尔斯 - 瑞泽恩制药公司
- 2021-01-15 - 2022-09-02 - C07K1/36
- 本申请提供了一种用于表征和/或确定疏水相互作用色谱(HIC)的病毒清除能力的方法，其包括HIC的病毒清除的多变量分析的实验设计。所述方法通过运行D‑最优实验设计提供了对使用HIC进行的所述病毒清除的机制的理解，所述D‑最优实验设计包括对多种因子的评价，如pH、缓冲液浓度、柱加载浓度、柱流速或所述HIC柱的疏水强度。
- 专利分类
