[发明专利]无细胞Notch切割分析方法以及药物筛选方法无效
申请号: | 200480033091.3 | 申请日: | 2004-11-10 |
公开(公告)号: | CN1878865A | 公开(公告)日: | 2006-12-13 |
发明(设计)人: | 大河内正康;武田雅俊 | 申请(专利权)人: | 财团法人大阪产业振兴机构 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C07K14/47;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/00;C12Q1/02;G01N33/15;G01N33/50 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 张平元;赵仁临 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明提供在对阿尔茨海默病的治疗等有效的γ分泌酶抑制剂的药物筛选方法等中可以利用的无细胞Notch切割分析方法,以及该药物筛选方法,所述无细胞Notch切割方法的特征在于:具有将表达Notch蛋白质突变体的细胞粗膜级分与被测物质接触的无细胞切割反应步骤,以及对通过前述无细胞切割反应步骤中的Notch蛋白质突变体因膜内蛋白分解(假定跨膜结构域中的2阶段切割)而产生的氨基末端侧的片断和羧基末端侧的片断进行检测的检测步骤,从而分析被测物质对Notch蛋白质突变体的膜内蛋白分解产生的影响的无细胞Notch切割方法,其中前述Notch蛋白质突变体,至少具有Notch蛋白质的假定跨膜结构域,至少缺失假定跨膜结构域氨基末端侧的氨基酸序列的一部分,并且在假定跨膜结构域的氨基末端侧以及羧基末端侧上各自具有抗体识别位点。 | ||
搜索关键词: | 细胞 notch 切割 分析 方法 以及 药物 筛选 | ||
【主权项】:
1.无细胞Notch切割分析方法,其特征是:具有使表达Notch蛋白质突变体的细胞的粗膜级分与被测物质接触的无细胞切割反应步骤,和对前述无细胞切割反应步骤中的Notch蛋白质突变体因膜内蛋白分解而产生的氨基末端侧的片断和羧基末端侧的片断进行检测的检测步骤,从而分析被测物质对Notch蛋白质突变体的膜内蛋白分解产生的影响的无细胞Notch切割分析方法,其中前述Notch蛋白质突变体,至少具有Notch蛋白质的假定跨膜结构域,至少缺失假定跨膜结构域氨基末端侧氨基酸序列的一部分,并且在假定跨膜结构域的氨基末端侧以及羧基末端侧上各自具有抗体识别位点。
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