本发明公开了一种鉴定水牛角的方法。本发明发现了水牛、黄牛及牦牛线粒体基因位点的差异,水牛线粒体基因中,所述线粒体基因的登录号为MT237632.1,其第5380位核苷酸为G、其第5378位核苷酸为T、其第5377位核苷酸为C、其第5374位核苷酸为G。根据差异位点设计了鉴定水牛角的特异性引物对核苷酸序列如SEQ ID NO.1~2所示。本发明所述的水牛角的鉴定方法,包括以下步骤:采集待测牛角样品,提取待测牛角样品中的DNA,利用特异性引物对进行PCR检测,能得到250bp特异性扩增片段的即为水牛角,反之则不是水牛角。本发明的特异性引物对在PCR检测中可以准确鉴别出水牛角,鉴定方法稳定,特异性强,且不受药材性状影响,可以对药材及切制后的饮片进行准确鉴别。
本发明公开了一种鉴定或辅助鉴定水牛角药材的引物对及DNA条形码、方法和应用,所述DNA条形码的核苷酸序列选自SEQ ID NO1 Bubalus Bubalis。本发明设计的3种牛角通用引物对可有效区分水牛角、牦牛角和黄牛角,为水牛角质量标准的完善提供依据,并且能够对水牛角、黄牛角、牦牛角药材进行鉴别。