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[发明专利]KAT2A抑制剂在治疗脊髓及坐骨神经损伤中的应用-CN202210994133.X在审
发明人：刘炎;刘梅;管徒晨;董张及;徐曼;巫荣华 -专利权人：南通大学
申请日： 2022-08-18 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N5/0797 文献下载
摘要：本发明属于生物学领域/组织工程，涉及KAT2A抑制剂在治疗脊髓及坐骨神经损伤中的应用，所述KAT2A抑制剂为MB‑3，所述MB‑3用于神经干细胞的离体培养，使神经干细胞的增殖、成球率明显增加，进而治疗脊髓及坐骨神经损伤。MB‑3处理后扩增的神经干细胞依旧能够发挥功能促进脊髓及坐骨神经损伤的恢复，可为神经干细胞临床应用提供稳定、可控的细胞来源，具有广阔的应用前景和市场价值。
kat2a 抑制剂治疗脊髓坐骨神经损伤中的应用

[发明专利]一种克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因敲除突变体的构建方法-CN202211056541.7在审
发明人： 董张及;刘梅 -专利权人：南通大学
申请日： 2022-08-31 - 公布日： 2023-03-10 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明公开了一种克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因敲除突变体的构建方法，属于生物技术领域。该方法包括：1）筛选获得可高度特异识别克氏原螯虾基因组中甘露聚糖结合凝集素基因的sgRNA；2）进行性腺注射，在自然交配获得的克氏原螯虾中验证CRISPR/Cas9产生甘露聚糖结合凝集素基因移码突变的能力；3）筛选到含移码突变甘露聚糖结合凝集素基因的克氏原螯虾创建者的子一代，并以子一代为亲本自交，获得去除甘露聚糖结合凝集素功能的突变的甘露聚糖结合凝集素基因的纯合突变基因的新品系。采用该方法可成功地对克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因进行定向突变，使该基因的正常功能丧失，最后获得的甘露聚糖结合凝集素基因突变的纯合子新品系克氏原螯虾缺失该基因功能，成为天然免疫缺陷模型。
一种克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因突变体构建方法

[发明专利]pH敏感型β-咔啉衍生物荧光探针在肿瘤荧光成像中的应用-CN201811369565.1有效
发明人：杨宇民;凌勇;凌珏;罗奕;王勇军;董张及 -专利权人：南通大学
申请日： 2018-11-16 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C09K11/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种β‑咔啉衍生物或其药学上可接受的盐作为荧光探针在荧光成像中的应用。在423～498nm紫外波长下，pH4.5～7.4范围内，所述β‑咔啉衍生物或其药学上可接受的盐的荧光强度随着pH值降低而增强，可以作为pH敏感型荧光探针用于肿瘤组织微环境成像以及局部肿瘤转移部位成像。
ph 敏感咔啉衍生物荧光探针肿瘤成像中的应用

[发明专利]格氏嗜盐碱杆菌Argonaute融合蛋白及其在标记DNA与RNA中的应用-CN202110558514.9在审
发明人： 董张及;刘梅;刘炎 -专利权人：南通大学
申请日： 2021-05-21 - 公布日： 2021-09-21 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种NgAgo‑EGFP融合蛋白以及一种基于格氏嗜盐碱杆菌Argonaute（NgAgo）的标记和追踪细胞内DNA与RNA的方法。所述NgAgo‑EGFP融合蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示。使用转染试剂将所述NgAgo‑EGFP和向导DNA转染入细胞，可标记和追踪细胞内的DNA与RNA。
格氏嗜盐碱杆菌 argonaute 融合蛋白及其标记 dna rna 中的应用

[发明专利]一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒-CN201610945971.2有效
发明人：刘东;石运伟;董张及;王新 -专利权人：南通大学
申请日： 2016-11-02 - 公布日： 2020-04-07 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明公开了一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒，采用5’‑磷酸化单链寡聚脱氧核糖核苷酸(5’‑p‑ss‑DNA Oligo)和Argonaute mRNA联合下调基因表达，包括NgAgo基因的改造，表达质粒的构建，表达质粒经过线性化、体外转录、回收步骤获得Argonaute mRNA，根据目的基因序列设计并合成5’‑p‑ss‑DNA Oligo，将Argonaute mRNA和5’‑p‑ss‑DNA Oligo导入靶细胞中等步骤；本发明所述的方法中改造的NgAgo基因能够在靶细胞中快速高效的进入细胞核；5’‑p‑ss‑DNA Oligo序列依据目的基因设计，对靶序列识别具有良好的特异性；5’‑p‑ss‑DNA Oligo/NgAgo系统通过对真核细胞DNA水平的抑制作用，能够稳定高效的下调目的基因表达；5’‑p‑ss‑DNA Oligo具有良好的稳定性，利于在细胞内发挥作用；真核细胞自然条件下不存在内源性的5’‑p‑ss‑DNA Oligo因此特异性高。
一种下调基因表达方法及其试剂盒

[发明专利]一种显著提高鱼类基因组编辑效率的方法-CN201410382563.1有效
发明人：赵庆顺;董张及 -专利权人：南京大学
申请日： 2014-08-05 - 公布日： 2017-06-09 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：一种显著提高鱼类基因组编辑效率的方法，包括设计特异性识别和切割鱼类基因组指定位点序列的基因组编辑工具、以及与所述指定位点序列相对应、包含敲入外源基因片段的同源供体，使用共显微注射的方法将所述基因组编辑工具、所述同源供体以及在原生殖细胞特异稳定表达荧光蛋白的mRNA导入到鱼类动物胚胎，利用检测所述荧光蛋白mRNA所表达的荧光蛋白进行胚胎挑选并获得稳定的遗传性状。该方法可以在鱼类基因组的指定位点敲入外源基因片段，获得带有敲入的外源基因片段的子一代鱼类的效率显著高于已有的方法。
一种显著提高鱼类基因组编辑效率方法

[发明专利]一种定向改造动物基因组特定基因的方法及其应用-CN201110052372.5有效
发明人： 董张及;赵庆顺 -专利权人：南京大学
申请日： 2011-03-04 - 公布日： 2012-09-05 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及利用一种定向诱变动物基因组的方法。具体来说，本发明提供一种新的利用锌指核酸酶定向改造动物基因组的特定基因的方法，包括：根据目标动物靶基因区的序列设计特异识别并切割靶基因的锌指核酸酶，使用独立的表达系统验证所述锌指核酸酶对靶基因的定向切割能力和效率，利用选定的锌指核酸酶对目标动物的胚胎的靶基因进行定向遗传改造并获得稳定的遗传性状。进一步，本发明还涉及使用所述的独立表达系统，筛选利用所设计的锌指核酸酶所获得的主要的基因突变模式，并利用选定的突变模式高效筛选定向遗传改造所获得的子代。另一方面，本发明还涉及利用所述方法，获得能特异识别黄颡鱼肌肉生长抑制素基因的锌指核酸酶，并定向地敲除了黄颡鱼的肌肉生长抑制素基因。
一种定向改造动物基因组特定基因方法及其应用