本发明属于单克隆抗体领域,具体涉及一种抗人抑制素α(Inhibin‑α)的单克隆抗体及其制备方法、免疫检测试剂、应用。该单克隆抗体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:1‑3所示的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3,和氨基酸序列如SEQ ID NO:4‑6所示的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。本发明的抗人抑制素α的单克隆抗体,可以准确识别石蜡组织与冰冻组织中表达的Inhibin‑α蛋白,与进口试剂R1相比,特异性评价结果一致,抗体使用浓度低,染色效果更强,可用于免疫检测分析。该单克隆抗体对实现该类单克隆抗体国产化、降低试剂成本具有重要意义。