本发明涉及植物抗病毒基因工程领域，公开了一种高效产生siRNA的马铃薯Y病毒基因片段、弱毒疫苗、制备方法及其应用。高效产生siRNA的马铃薯Y病毒基因片段包括PVY1片段、PVY2片段和PVY3片段中的至少一种，PVY1片段、PVY2片段和PVY3片段的核苷酸序列分别如Seq ID No.13、Seq ID No.14、Seq ID No.15所示，所述基因片段在接种寄生植物后可高效产生siRNA。弱毒疫苗以TVBMV弱毒突变体为基础，TVBMV弱毒突变体中嵌入了可诱导对马铃薯Y病毒产生交叉保护的有效基因片段，所述的有效基因片段包括可产生siRNA的马铃薯Y病毒基因片段。本发明的抗马铃薯Y病毒的弱毒疫苗作用稳定，可以起到有效的交叉保护作用，显著减轻植物受马铃薯Y病毒强毒株系感染后的伤害，延迟植物发病，大大减少损失。
本发明涉及植物抗病毒基因工程领域，公开了一种高效产生siRNA的烟草花叶病毒基因片段、弱毒疫苗、制备方法及其应用。高效产生siRNA的烟草花叶病毒基因片段包括TMV1片段、TMV2片段和TMV3片段中的至少一种，TMV1片段、TMV2片段和TMV3片段的核苷酸序列分别如Seq ID No.13、Seq ID No.14、Seq ID No.15所示，所述基因片段在接种寄生植物后可高效产生siRNA。弱毒疫苗以TVBMV弱毒突变体为基础，TVBMV弱毒突变体中嵌入了可诱导对烟草花叶病毒产生交叉保护的有效基因片段，所述的有效基因片段包括可产生siRNA的烟草花叶病毒基因片段。本发明的抗烟草花叶病毒的弱毒疫苗作用稳定，可以起到有效的交叉保护作用，显著减轻植物受烟草花叶病毒强毒株系感染后的伤害，延迟植物发病，大大减少损失。
本发明涉及植物抗病毒基因工程领域，公开了一种抗黄瓜花叶病毒的弱毒疫苗、制备方法及其应用。抗黄瓜花叶病毒的弱毒疫苗以TVBMV弱毒突变体为基础，TVBMV弱毒突变体中嵌入了可诱导对黄瓜花叶病毒产生交叉保护的有效基因片段，所述的有效基因片段包括黄瓜花叶病毒的2b基因。所述的2b基因的核苷酸序列如Seq ID No.19所示。本发明的抗黄瓜花叶病毒的弱毒疫苗作用稳定，可以起到有效的交叉保护作用，显著减轻植物受黄瓜花叶病毒强毒株系感染后的伤害，延迟植物发病，大大减少损失。
本发明公开鉴定烟草野火菌生理小种类型的分子标记、引物对及其应用。本发明首先公开了鉴定烟草野火菌生理小种类型的引物对，所述引物对由SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物组成。本发明进一步公开了鉴定烟草野火菌生理小种类型的如SEQ ID NO.3所示的分子标记。本发明还公开了上述引物对及分子标记在鉴定烟草野火菌生理小种类型中的应用。本发明首次发现了烟草野火菌的特异分子标记，通过检测不同烟草野火菌中该分子标记的有无，快速、准确地将烟草野火菌划分为0号和3号生理小种与1号和2号生理小种两类，操作简单易行，大大降低了工作量，对烟草抗病育种具有重要意义。
本发明涉及植物抗病毒基因工程领域，公开了一种马铃薯Y病毒弱毒株、载体、制备方法及其应用。马铃薯Y病毒弱毒株系中，HC‑Pro基因的氨基酸序列的第182位的赖氨酸突变为精氨酸。HC‑Pro的核苷酸序列如Seq ID No.3所示，HC‑Pro的氨基酸序列如Seq ID No.4所示。本发明通过定点突变的方式获得了一种致病力明显降低的马铃薯Y病毒弱毒株突变体，该弱毒株突变体可以起到有效的交叉保护作用，显著减轻植物受马铃薯Y病毒强毒株系感染后的伤害，延迟植物发病，大大减少损失。
