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[发明专利]带双安全开关的诱导多功能干细胞及其制备方法-CN202310019818.7在审
发明人：于凤刚;刘菲;张星;段林伟;梁晓华 -专利权人：山东银丰生命科学研究院;银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2023-01-06 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了一种带双安全开关的诱导多功能干细胞，其AAVS1基因位点处插入有CAG启动子、Caspase9自杀基因，以及T2A连接的截短CD19基因。本发明还提供了其构建方法。本发明通过基因编辑技术，在iPS细胞基因组的“安全港”AVVS1位点敲入了双安全控制开关：CAG启动子控制下的Caspase9自杀基因，以及T2A连接的截短CD19基因，可以在必要时启动开关，杀死未分化的iPS细胞，防止形成畸胎瘤的风险。本发明在不改变iPS细胞干性的情况下，给iPS细胞装了双保险安全开关，对未来iPS衍生细胞疗法的临床应用提供了安全保障。
安全开关诱导多功能干细胞及其制备方法

[发明专利]用于宫内膜再生细胞分离、培养及冻存的方法及试剂盒-CN202310046765.8在审
发明人：马冬磊;王蕾;李明明;申阳;张佳玲 -专利权人：安徽易文赛生物技术有限公司
申请日： 2023-01-31 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于体外提取及扩增宫内膜再生细胞的方法，以及利用该方法的试剂盒，实现了ERC的高效分离、扩增，为ERC细胞临床研究提供了稳定、大量的细胞来源。
用于宫内再生细胞分离培养方法试剂盒

[发明专利]一种肾前体细胞来源的分泌组及其制备方法和应用-CN202211396936.1在审
发明人：左为;张婷 -专利权人：同济大学;苏州吉美瑞生医学科技有限公司
申请日： 2022-11-09 - 公布日： 2023-04-21 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明属于细胞生物技术领域，具体涉及一种肾前体细胞来源的分泌组及其制备方法和应用，包括：S1：细胞复苏：将肾前体细胞复苏接种于铺有基底胶的第一培养皿中进行培养；S2：细胞传代：待肾前体细胞生长至60‑100％汇合度时，传代接种于铺有基底胶的第二培养皿中继续培养；S3：上清收集：待肾前体细胞生长至60‑100％汇合度时，弃去上清液并清洗肾前体细胞，将肾前体细胞加入DMEM培养基继续培养，随后收集肾前体细胞上清液；S4：预处理：将肾前体细胞上清液离心后，得到肾前体细胞来源的分泌组。与现有技术相比，本发明解决现有技术中缺少无创、可重复且低成本的细胞来源的问题。
一种体细胞来源分泌及其制备方法应用

[发明专利]一种利用多能干细胞诱导分化胆囊祖细胞的方法-CN202310125237.1在审
发明人：吴芬芳;吴迪;陈小妮 -专利权人：北京中医药大学深圳医院（龙岗）
申请日： 2023-02-03 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用多能干细胞诱导分化胆囊祖细胞的方法，所述方法包括以下步骤：诱导多能干细胞分化为定形内胚层细胞；诱导定形内胚层细胞分化为前肠后部细胞簇；诱导前肠后部细胞簇分化为胆胰共祖细胞簇；诱导胆胰共祖细胞簇分化为胆囊祖细胞簇。该方法以胆囊上皮发育阶段的关键分子特征为基础，依次实现人多能干细胞向内胚层、前肠后部细胞簇、胆胰共祖细胞簇、以及胆囊祖细胞的诱导分化；为胆囊上皮的发育机制探索与病理解析提供了一个全新的人源性工具。
一种利用多能干细胞诱导分化胆囊细胞方法

[发明专利]利用自体血清从脐血中获取多能血管祖细胞的方法-CN202210531763.3有效
发明人：贾惠东;崔占峰 -专利权人：至仁生命科技（天津）有限公司
申请日： 2022-05-17 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供一种利用自体血清从脐血中获取多能血管祖细胞的方法，包括：从脐血中获取血清；用获取的血清制备第一培养基和第二培养基；从脐血中获取单核细胞；将获取的单核细胞重悬于第一培养基后接种于培养皿，多次更换第一培养基，直至细胞集落形成；所述细胞集落形成后，将第一培养基更换为第二培养基，多次更换第二培养基，制得表达CD146和NG2但不表达CD31的多能血管祖细胞。本发明制得的多能血管祖细胞既具有骨髓间充质干细胞与血管周细胞相似的表型，又具有骨髓间充质干细胞具有基本相同的中胚层细胞分化功能；还具有分化成成熟血管细胞和促进心血管系统修复再生的功能，并且具有良好的体外扩增能力。
利用血清脐血中获取多能血管细胞方法

[发明专利]干细胞体外扩增方法-CN201910875706.5有效
发明人：姚睿;徐铭恩 -专利权人：杭州捷诺飞生物科技股份有限公司;清华大学
申请日： 2019-09-17 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供一种干细胞体外扩增方法，所述方法包括：A、将2D环境下培养的干细胞团块消化成单细胞，与水凝胶溶液混合，得到单细胞‑水凝胶悬液；B、采用生物打印技术将所述单细胞‑水凝胶悬液打印成含有干细胞的微结构体；C、采用干细胞培养液培养所述微结构体，使干细胞在微结构体提供的三维环境中稳定扩增。本发明提供的干细胞扩增方法，工艺简单、温和，不仅能够为干细胞增殖提供稳定的3D微环境，还增加了细胞扩增空间，减少外界刺激对干细胞的不良影响，在保证细胞大量扩增的同时，维持多能干细胞全能性/其他干细胞干性。本发明为干细胞在组织工程、再生医学或药物研究等方面，提供大量种子细胞。
干细胞体外扩增方法

[发明专利]一种用于培养气道基底干细胞的组合物及其应用-CN202210011084.3有效
发明人：李时悦;曾海康;叶永顺;陈迪非;陈焕杰;罗钰龙;刘明;林丽琴;宋新宇;朱易平 -专利权人：广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心）;广州呼吸健康研究院（广州呼吸疾病研究所）
申请日： 2022-01-05 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于培养气道基底干细胞的组合物及其应用。所述组合物包含Y‑27632、A‑83‑01、CHIR‑99021、DMH‑1和SU5402。所述组合物加入到干细胞培养基，尤其适合用于培养气道基底干细胞，不需要饲养层或培养板包被处理，原代培养成功率高，细胞活性好，稳定性佳；使用本发明的培养基培养的原代气道基底干细胞，增殖速度快，且经传代多次后仍具有良好的增殖能力并保持良好的干细胞分化潜力；而且本发明提供的组合物以及培养基，具有配制方法简单、安全性高的优点，无外源性污染问题，用于培养气道基底干细胞程序简单、成本降低，应用价值高。
一种用于培养基底干细胞组合及其应用

[发明专利]诱导多能干细胞外泌体及其在制备抗衰老制剂的应用-CN202211168979.4在审
发明人：朱源源 -专利权人：上海圣石生物医学科技有限公司
申请日： 2022-09-25 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了一种诱导多能干细胞外泌体及其在制备抗衰老制剂的应用。本发明通过离得到胚胎干细胞和成体表皮干细胞，对胚胎干细胞进行SIRT3、SIRT4、SIRT5、Sox2基因改造的胚胎干细胞。将成体表皮干细胞作为饲养层细胞对其进行细胞编程，得到诱导多能干细胞，并通过刺激得到其分泌的外泌体，发现该外泌体能够表达SIRT3、SIRT4、SIRT5、Sox2基因，并且具有改善D‑半乳糖的衰老型小鼠的体重，清除小鼠体内自由基抑制机体氧化反应可改善衰老，保护肝脏；通过调控衰老蛋白Sirt3、Sirt4、Sirt5和p53含量，抑制促细胞凋亡基因Bax表达量的增多，对抗机体衰老。
诱导多能干细胞外泌体及其制备衰老制剂应用

[发明专利]一种滋养层细胞共培养体系培养干细胞/类器官的方法及应用-CN202211462653.2在审
发明人：王霞;金华;关家伟;赵茜;赵媛媛;周福来;赵宇煊 -专利权人：清华大学
申请日： 2022-11-21 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养领域，具体公开了一种滋养层细胞共培养体系培养干细胞/类器官的方法及应用，所述方法包括：利用纯化好的逆转录病毒感染小鼠胚胎成纤维细胞，形成稳定表达R‑spodin1和Noggin基因的胚胎成纤维细胞系；将胚胎成纤维细胞系进行辐照筛选出单克隆细胞系，并以单克隆细胞系为滋养层细胞与多种表达因子组合共同作为共培养体系培养干细胞或类器官。在此培养体系下，干细胞能够长期稳定的传代，干细胞的克隆形成、增殖与分化潜能没有受到影响，3D气液界面类器官培养在结构和功能上也没有受到影响。同时获得的滋养层细胞，可以节约R‑spodin1和Noggin的购买成本，削弱了实验经费对科学研究的制约。
一种滋养细胞培养体系干细胞器官方法应用

[发明专利]一种尿源性细胞的提取培养方法及其在制备防治肾损伤药物中的应用-CN202211426097.3在审
发明人：邝源源;龙晓君;樊琛语;郑佳佳;曾蕴锶;危玉回;郑立新;王恒;邱江 -专利权人：广州华越肾科再生医学科技有限公司
申请日： 2022-11-15 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了一种尿源性细胞的提取培养方法及其在制备防治肾损伤药物中的应用。通过本发明的细胞提取分离培养方法，从尿液中获得一群高表达PAX2、SOX9、OCT2基因的尿源性细胞，其中，PAX2、SOX9基因是与肾脏发育相关的干性基因，OCT2是肾小管上皮细胞中的与有机阳离子和毒素转运相关的基因。该细胞主要从尿液离心后的悬浮细胞中提取，培养过程中不需要饲养层细胞，细胞形态、生长状态更好；而且该细胞用于治疗肾缺血再灌注时具有较好的治疗效果，可以用于制备防治肾损伤药物，具有较大的应用价值。
一种尿源性细胞提取培养方法及其制备防治损伤药物中的应用

[发明专利]iPSC诱导-CN202180042847.4在审
发明人： P·J·米;M·杰克逊;R·泰勒 -专利权人：罗斯林技术有限公司
申请日： 2021-04-16 - 公布日： 2023-02-14 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：一种诱导来自非人类的家畜或耕畜的体细胞的多能性的方法，包括在表达一种或多种重编程因子的载体存在的情况下培养神经干细胞(NSC)。获得的犬的、猪的和牛的iPSC具有不同的遗传标志物谱。
ipsc 诱导

[发明专利]肝脏干细胞的衍生和成熟肝细胞类型及其用途-CN201680045137.6有效
发明人：胡鸢宇;黄学晖;陈学扬 -专利权人：新加坡科技研究局;新加坡国立大学
申请日： 2016-06-10 - 公布日： 2023-02-10 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本申请描述了肝脏干细胞(LSC)，以及分化的肝细胞、胆管上皮细胞和从其衍生的3D细胞结构。提供了在培养物中产生LSC以及成熟的、分化的肝细胞和胆管上皮细胞的方法。还提供了用于产生在培养物中多次传代过程中保持未分化状态的同源肝脏干细胞群体的细胞培养系统和细胞培养基。所述LSC和方法可以用于产生同源肝细胞和胆管上皮细胞群体以用于下游应用。LSC可以移植至受试者中以治疗肝病。
肝脏干细胞衍生成熟肝细胞类型及其用途

[发明专利]用于控制细胞身份的组合物和方法-CN202180037221.4在审
发明人：皮埃尔·朱利叶斯·马吉斯特雷蒂;胡安·卡洛斯·伊斯皮苏阿·贝尔蒙特;雷纳·埃尔南德斯·贝尼特斯 -专利权人：阿卜杜拉国王科技大学;索尔克生物研究所
申请日： 2021-03-30 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：提供了调节细胞稳态的组合物和方法。所述组合物包括代谢物(C1代谢物和C1代谢物混合物(C1‑MIM)，用于诱导细胞进入与其稳态不同的状态，例如，进入与处理前的原始状态相比分化程度较低的状态。C1代谢物包括甲硫氨酸、SAM(S‑腺苷蛋氨酸)、苏氨酸、甘氨酸、腐胺和半胱氨酸。代谢物用于补充细胞培养基，因此，还提供了补充有公开的代谢物的细胞培养基(补充MIM的培养基)。该方法包括：使细胞与C1代谢物接触足够长的时间以导致将细胞重编程为与其稳态不同的状态，例如，重编程为具有祖细胞样特征的低分化状态(MIM‑细胞)。分离的MIM细胞及其后代可用于多种应用，包括细胞疗法和组织工程。
用于控制细胞身份组合方法

[发明专利]一种干细胞移植手术治疗黄褐斑的新的技术方法-CN202211063680.2在审
发明人：刘景卫;刘诗雨 -专利权人：刘景卫
申请日： 2022-09-08 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了毛囊干细胞移植手术治疗黄褐斑的技术方法，该技术方法包括以下步骤：毛囊的提取；毛囊的分离；毛囊的灭活；毛囊干细胞的体外培养；毛囊干细胞的移植。本发明通过精准提取与分离方法获取含有毛囊干细胞的部分毛囊外毛根鞘，通过体外毛囊分离与毛囊灭活和毛囊干细胞体外培养，实现术后表皮变厚，去除黄褐斑，修复患处皮肤屏障，从而达到临床治愈黄褐斑的目的。
一种干细胞移植手术治疗黄褐斑技术方法

[发明专利]来自肺上皮细胞或肺癌细胞的类器官的制造方法-CN202180038053.0在审
发明人：森本充;藤村崇 -专利权人：大塚制药株式会社;国立研究开发法人理化学研究所
申请日： 2021-05-26 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明是包括在培养用培养基中培养含有肺上皮细胞或肺癌细胞的试样的步骤的、由肺上皮细胞或肺癌细胞制造类器官的方法，其中，上述培养用培养基中，含有0～10％v/v的胞外基质，并且含有选自由角质细胞生长因子(KGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)10和肝细胞生长因子(HGF)组成的组中的至少1种、骨形成蛋白(BMP)抑制剂以及TGFβ抑制剂的组合，并且上述培养用培养基实质上不含饲养细胞。
来自上皮细胞肺癌细胞器官制造方法