本申请涉及生物技术领域,尤其涉及一种含杆状病毒遗传元件的重组蛋白及其制备方法;所述重组蛋白的核苷酸序列包括非编码顺式作用元件包括:增强子、早期启动子、晚期启动子和信号肽,信号肽设于重组蛋白中结构基因的5’端,晚期启动子设于信号肽的5’端,早期启动子设于晚期启动子的5’端,增强子设于晚期启动子的5’端;增强子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;早期启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;信号肽的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;可以通过早期启动子尽快启动重组蛋白的表达,避免昆虫细胞晚期表达几丁质酶影响该昆虫杆状病毒分泌外源蛋白的表达,提高昆虫杆状病毒表达载体分泌外源蛋白的产量。
本申请涉及生物技术领域,尤其涉及一种生物素化外源重组蛋白用表达载体及制备方法和应用;所述表达载体包括包括VV启动子,VV启动子用于替换表达载体的Tac启动子,VV启动子是通过改造AV3启动子所得的改造启动子,VV启动子的核苷酸序列包括与如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列同源性>90%的核苷酸序列;通过改造表达载体的AV3启动子得到VV启动子,并通过VV启动子替换表达载体上原始的Tac启动子,可以通过嵌合作用,提高表达蛋白的表达效率,因此可以通过改造启动子序列,改善表达载体在表达外源蛋白时的表达效率,从而提高表达载体在表达生物素化外源重组蛋白的表达率。
本发明公开了一种在哺乳表达系统中表达的融合蛋白及其制备方法,所述融合蛋白至少包括两种肽:第一种肽,具体为如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或为与SEQ ID NO.1所示序列具有至少85%同源性且功能相同的氨基酸序列;第二种肽,具体为目标肽。第一种肽能够有效促进目标肽在哺乳表达系统中的表达,使得目标肽从不表达到表达或从低表达到高表达,为目标肽(尤其是小片段肽)在哺乳表达系统中的表达提供了一种新策略。