[发明专利]以绿荧光蛋白(GFP)为标记的肿瘤转移模型

权利要求书

1.一种跟踪原发肿瘤转移进展的方法，该方法包括可选性地对经修改而含有表达绿荧光蛋白(GFP)的肿瘤的脊椎动物进行开膛，并观察组织中有否荧光。

2.根据权利要求1所述的方法，其中的动物被开膛。

3.根据权利要求2所述的方法，其中至少有些组织被切除。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述的被切除组织接受显微镜镜检。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述的脊椎动物经修饰后含有通过手术正位移植法植入的表达GFP的肿瘤。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述动物体内的内源性原发肿瘤经修饰后含有GFP的表达系统。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述的表达系统包含一个病毒启动子；而且/或：

所述的脊椎动物是人；而且/或

所述的表达系统还含有编码治疗蛋白的核苷酸序列。

8.一种脊椎动物，经修饰后含有表达GFP的肿瘤。

9.根据权利要求8所述的脊椎动物，它是哺乳动物；而且/或

所述的动物是免疫力低下的；而且/或

所述的肿瘤是肺肿瘤或卵巢肿瘤；而且/或

所述的GFP是hGFP-ST65T；而且/或

其中，表达GFP的肿瘤是通过手术移植表达GFP的前体肿瘤到如下组织或器官部位而得到的，肿瘤所含的细胞即来自所述的前体肿瘤含有的细胞，或者，所述的表达GFP的肿瘤是通过将GFP表达系统提供给所述动物的内源肿瘤得到的。

10.一种经修饰而能产生GFP的肿瘤细胞，其中的肿瘤细胞被如下表达载体转染，该载体包含在异源调控序列调控下的编码所述GFP的核苷酸序列。

11.根据权利要求10所述的细胞，它是无限繁殖化细胞系。

12.根据权利要求11所述的细胞系，它是人乳房癌细胞系、人前列腺癌细胞系、人恶性胶质瘤细胞系、人肺癌细胞系、人结肠癌细胞系、人胃癌细胞系、人肾癌细胞系、人舌癌细胞系、人黑色素瘤细胞系、小鼠黑色素瘤细胞系或中国仓鼠卵巢细胞系。

13.经修饰而能产生GFP的肿瘤细胞，所述的肿瘤细胞被含有如下核苷酸序列的表达载体所转染，所述核苷酸序列编码GFP还编码治疗蛋白或无限繁殖化蛋白。

14.制备含有表达GFP的肿瘤的脊椎动物的方法，所述方法包括给脊椎动物皮下注射权利要求10所述的肿瘤细胞，注射量足以在所述动物内产生肿瘤，该方法或者包括在所述动物体内引入所述GFP的逆转录病毒表达系统。

15.一种含有转移性肿瘤细胞的脊椎动物组织或由这种组织制得的组织培养物，其中所述的肿瘤细胞产生GFP。

16.一种观察脊椎动物肿瘤中血管形成的方法，该方法包括可选性地暴露出所述动物的组织并观察所述肿瘤中的血管，其中所述的血管通过对比染料的存在而可以看见，所述的肿瘤已经经修饰而能表达GFP。

17.一种无限繁殖细胞系，其中的细胞是经修饰而含有SV40-T抗原和可视量GFP的细胞系。