[发明专利]一种2,4-二氨基-6-羟基嘧啶起始物料纯度的HPLC-UV检测方法在审
| 申请号： | 202210397234.9 | 申请日： | 2022-04-15 |
| 公开（公告）号： | CN114965738A | 公开（公告）日： | 2022-08-30 |
| 发明（设计）人： | 柴金柱;梅青;胡进;关丹荧子;杨涛 | 申请（专利权）人： | 汉瑞药业（荆门）有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/34;G01N30/60;G01N30/74 |
| 代理公司： | 武汉凌达知识产权事务所(特殊普通合伙) 42221 | 代理人： | 刘念涛 |
| 地址： | 448000 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 氨基 羟基 嘧啶 起始 物料 纯度 hplc uv 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种2,4-二氨基-6-羟基嘧啶起始物料纯度的HPLC-UV检测方法，其特征在于，检测条件为：
色谱柱：YMC-Pack ODS-AQ，150*4.6mm，3μm C18色谱柱，柱温为45℃；
流动相：水相为20mM磷酸二氢钾水溶液，有机相为甲醇，流速为1.0 mL/min；
洗脱程序：梯度洗脱；
检测波长：200nm、210nm；
包括以下步骤
（1），取2,4-二氨基-6-羟基嘧啶用乙腈：H2O=1：1（v/v）的稀释剂溶解，配制成每1mL乙腈含中间体2 mg的样品溶液；
（2），取1μL样品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，检测2,4-二氨基-6-羟基嘧啶纯度、杂质含量以及溶剂残留的大小；
其中梯度洗脱为先用10%的甲醇洗脱1.8min，再将甲醇梯度升高至50%，时间为8.5min，再用50%甲醇冲洗2.5min，最后用0.1min回调至起始比例10%甲醇，并平衡6min；
其中所述的检测波长210nm用于定量主成分2,4-二氨基-6-羟基嘧啶，所述的检测波长200nm用于定量起始物料盐酸胍及未知杂质。
2.根据权利要求1所述的一种2,4-二氨基-6-羟基嘧啶起始物料纯度的HPLC-UV检测方法，其特征在于，所述的液相色谱仪为Thermo Ultimate 3000，DAD检测器。
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