[发明专利]一种监测新冠病毒刺突蛋白S1特异性CTLs功能的可视化小鼠模型的构建方法及应用

权利要求书

1.一种体内监测新冠病毒刺突蛋白S1特异性CTLs功能的可视化小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将真核启动子、荧光报告基因和编码新冠病毒刺突蛋白S1的基因插入真核表达载体中，得到重组表达载体；所述真核启动子、荧光报告基因和编码新冠病毒刺突蛋白S1的基因以一个融合基因片段的形式插入真核表达载体中。

将所述重组表达载体转染小鼠，得到可视化小鼠模型；所述重组表达载体转染小鼠的方法是将所述重组表达载体、转染试剂和等张葡萄糖溶液混合，经尾静脉注射靶向递送至小鼠体内；所述重组表达载体的质量、转染试剂的体积和等张葡萄糖溶液的体积比为18～22μg：3～3.5μL：100μL；所述转染试剂为jetPEI。

2.根据权利要求1所述构建方法，其特征在于，所述荧光报告基因和编码新冠病毒刺突蛋白S1的基因之间用IRES片段连接。

3.根据权利要求1～2任意一项所述构建方法，其特征在于，步骤1)中所述荧光报告基因包括萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶或高斯荧光素酶。

4.根据权利要求1～2任意一项所述构建方法，其特征在于，步骤1)中所述编码新冠病毒刺突蛋白S1的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

5.根据权利要求1～2任意一项所述构建方法，其特征在于，步骤1)中所述真核启动子包括CMV启动子、SV40启动子、T7启动子和PGK启动子。

6.权利要求1～5任意一项所述构建方法得到的体内监测新冠病毒刺突蛋白S1特异性CTLs功能的可视化小鼠模型在制备预防新冠病毒感染的疫苗中的应用。

7.权利要求1～5任意一项所述构建方法得到的体内监测新冠病毒刺突蛋白S1特异性CTLs功能的可视化小鼠模型在制备过继性细胞治疗的载体中的应用。