[发明专利]嵌合蛋白、其生产方法和用途,以及核酸分子、表达盒、表达载体、宿主细胞、用于诊断利什曼病的组合物、用于诊断利什曼病的试剂盒和体外诊断利什曼病的方法在审
申请号: | 202080023655.4 | 申请日: | 2020-02-14 |
公开(公告)号: | CN113784975A | 公开(公告)日: | 2021-12-10 |
发明(设计)人: | O·P·D·M·内托;A·M·雷森德;D·D·H·C·塔瓦雷斯;W·J·T·多斯桑托斯;A·L·D·C·内托;F·B·马加莱斯;M·B·多·纳西门托 | 申请(专利权)人: | 奥斯瓦道·克鲁兹基金会 |
主分类号: | C07K14/44 | 分类号: | C07K14/44;C12N15/62;C12N15/63;A61K39/008;C12N1/00;G01N33/569 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
地址: | 巴西里*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 嵌合 蛋白 生产 方法 用途 以及 核酸 分子 表达 载体 宿主 细胞 用于 诊断 利什曼病 组合 | ||
1.嵌合蛋白,其特征在于,包含天然婴儿利什曼原虫蛋白的级分。
2.根据权利要求1所述的嵌合蛋白,其特征在于,进一步包含:
抗原区域之间的间隔区,
在合成基因的5'末端以及编码蛋白末端的区域的优化序列,例如:pRBS-SD1+6AA,
核糖体结合位点和Shine-Dalgarno序列,
pSS-gIII,
t7标签肽,
ET-6His;或
翻译终止密码子;
或这些的组合。
3.根据权利要求1或2所述的嵌合蛋白,其特征在于,包含与选自由SEQ ID NO:2、SEQID NO:4、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8组成的组的序列具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
4.核酸分子,其特征在于,包含与选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7及其编码分别由SEQ ID NO:2、4、6或8所限定的相同氨基酸序列的简并序列组成的组的序列具有至少90%序列同一性的核苷酸序列。
5.表达盒,其特征在于,包含可操作地连接至启动子和转录终止子的如权利要求4所限定的核酸分子。
6.表达载体,其特征在于,包含如权利要求4所限定的核酸分子或如权利要求5所限定的表达盒。
7.宿主细胞,其特征在于,包含如权利要求4所限定的核酸分子或如权利要求5所限定的表达盒或如权利要求6所限定的表达载体。
8.嵌合蛋白的生产方法,其特征在于,包括以下步骤:
(a)用包含如权利要求4所限定的所述核酸分子的表达载体转化宿主细胞,
(b)培养所述宿主细胞以生产嵌合蛋白;和
(c)从所述细胞或从所述细胞周围的培养基中分离所述嵌合蛋白。
9.用于诊断利什曼病的组合物,其特征在于,包含一种或多种如权利要求1至3中任一项所限定的嵌合蛋白。
10.根据权利要求9所述的组合物,其特征在于,所述诊断仍然可以对来自狗或人的样品进行。
11.用于诊断内脏利什曼病的试剂盒,其特征在于,包含一种或多种如权利要求1至3中任一项所限定的嵌合蛋白或如权利要求9所限定的组合物。
12.根据权利要求11所述的试剂盒,其特征在于,还包括使用说明。
13.根据权利要求11或12所述的试剂盒,其特征在于,还包括用于检测抗原/抗体复合物的装置,所述装置可以包括能够产生可检测信号的信号发生器。
14.根据权利要求11至13中任一项所述的试剂盒,其特征在于,所述诊断可以对来自狗或人的样品进行。
15.一种或多种如权利要求1至3中任一项所限定的嵌合蛋白、如权利要求9或10中所限定的组合物或如权利要求11至14中任一项所限定的试剂盒的用途,其特征在于,其用于诊断利什曼病。
16.体外诊断利什曼病的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(a)提供一种或多种如权利要求1至3中任一项所限定的嵌合蛋白或如权利要求9或10所限定的组合物以及人或狗血清样品,
(b)在足以形成抗体/抗原复合物的条件下将所述一种或多种嵌合蛋白或所述组合物与待测生物样品接触足够的时间;和
(c)通过能够在该抗原/抗体复合物的存在下产生可检测信号的检测技术检测在前一步骤中形成的嵌合蛋白/抗体复合物。
17.根据权利要求16所述的方法,其特征在于,所述生物样品选自包括唾液、尿液、血清或血液的组。
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