[发明专利]蓝藻蛋白多肽的制备方法

权利要求书

1.蓝藻蛋白多肽的制备方法，包括冻融破壁、分级盐析、双水相萃取、超滤纯化和吸附除藻毒素，其特征在于：所述的吸附除藻毒素为：将粗制蓝藻蛋白多肽用超纯水溶解，加入氧化石墨烯粉末，2~6℃温度下200~600r/min搅拌吸附12~24h，2~6℃温度下8000~12000r/min离心6~15min，取上清液，冷冻干燥得到精制蓝藻蛋白多肽。

2.根据权利要求1所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的冻融破壁为：在蓝藻泥中加入超纯水，蓝藻泥和超纯水的质量体积比为1g：0.6~2.0ml，于-25~-15℃温度下冷冻，于15~25℃温度下解冻，反复冻融次数1~3次，冻融结束后2~6℃温度下8000~12000r/min离心6~15min，保存上清液。

3.根据权利要求1所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的分级盐析为：在冻融破壁得到的上清液中加入硫酸铵，使溶液中硫酸铵饱和度达到15~25%，搅拌，2~6℃温度下4000~6000r/min离心3~8min，取沉淀，在沉淀中加超纯水溶解加入硫酸铵使溶液中硫酸铵饱和度达到30~40%，搅拌，2~6℃温度下4000~6000r/min离心3~8min，取上清液。

4.根据权利要求1所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的双水相萃取为：在分级盐析得到上清液中加入PEG4000和磷酸钾盐KHP，调节体系pH为5.5~6.5，PEG4000浓度为12~20%, KHP浓度为10~15%，400~800r/min搅拌，转移至分液漏斗中分层，取下相，得到蓝藻蛋白多肽溶液。

5.根据权利要求1所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的超滤纯化为：将双水相萃取得到的蓝藻蛋白多肽溶液转移到超滤离心管中，2~6℃温度下8000~12000r/min离心8~15min，得到粗制蓝藻蛋白多肽；所述超滤离心管规格为20~40KDa。

6.根据权利要求1所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的石墨粉末的制备步骤为：在木材粉末中掺杂氯化钾和纳米硅酸盐类物质，放入马弗炉中分步煅烧：100~120℃煅烧5~10min；400~500℃煅烧10~15min；1000~1200℃煅烧10~15min；2800~3200℃煅烧30~40min；2000~2500℃煅烧30~40min；1000~1200℃煅烧20~30min；400~500℃煅烧30~40min，得到石墨粉末，在干燥器中自然冷却后经化学氧化处理得到氧化石墨烯，将其进行酸处理改性，干燥研磨得到氧化石墨烯粉末。

7.根据权利要求6所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的木材粉末中掺杂0.2~0.5%氯化钾和2~4%纳米硅酸盐类物质。

8.根据权利要求6所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的酸处理改性为：将氧化石墨烯浸泡于20~25%盐酸溶液中处理1~2h。