[发明专利]一种能辅助降解蛋白质并分泌抗菌肽的益生重组酿酒酵母有效
申请号: | 201611186552.1 | 申请日: | 2016-12-20 |
公开(公告)号: | CN106854657B | 公开(公告)日: | 2018-05-15 |
发明(设计)人: | 张宏刚;李莉 | 申请(专利权)人: | 广州格拉姆生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N1/19;C12R1/865 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 胡辉;舒胜英 |
地址: | 510530 广东省广州市高新技*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 辅助 降解 蛋白质 分泌 抗菌 重组 酿酒 酵母 | ||
1.一种能辅助降解蛋白质并分泌抗菌肽的酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:该载体中含有蛋白酶基因、抗菌肽基因;
所述抗菌肽基因的碱基序列如SEQ ID NO:5所示;
所述蛋白酶基因选自酸性蛋白酶基因、中性蛋白酶基因、天冬氨酸蛋白酶基因、丝氨酸蛋白酶基因中的至少一种;
所述酸性蛋白酶基因的碱基序列如SEQ ID NO:1所示,所述中性蛋白酶基因的碱基序列如SEQ ID NO:2所示,所述天冬氨酸蛋白酶基因的碱基序列如SEQ ID NO:3所示,所述丝氨酸蛋白酶基因的碱基序列如SEQ ID NO:4所示。
2.根据权利要求1所述的一种能辅助降解蛋白质并分泌抗菌肽的酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述蛋白酶基因为酸性蛋白酶基因和中性蛋白酶基因。
3.根据权利要求1所述的一种能辅助降解蛋白质并分泌抗菌肽的酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述蛋白酶基因、抗菌肽基因上游均存在α-信号肽基因序列,α-信号肽基因的碱基序列如SEQ ID NO:6所示。
4.根据权利要求1~3任一项 所述的一种能辅助降解蛋白质并分泌抗菌肽的酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述蛋白酶基因基因的启动子选自pgk1-1、pgk1-2,终止子选自pgkt1-1、pgkt1-2;所述抗菌肽基因的启动子为pgk1-3,终止子为pgkt1-3;
所述pgk1-1的碱基序列如SEQ ID NO:7所示;
所述pgkt1-1的碱基序列如SEQ ID NO:8所示;
所述pgk1-2的碱基序列如SEQ ID NO:9所示;
所述pgkt1-2的碱基序列如SEQ ID NO:10所示;
所述pgk1-3,的碱基序列如SEQ ID NO:11所示;
所述pgkt1-3的碱基序列如SEQ ID NO:12所示。
5.根据权利要求1~3任一项 所述的一种能辅助降解蛋白质并分泌抗菌肽的酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述载体的骨架为pGAPZaA质粒。
6.根据权利要求1~3任一项 所述的一种能辅助降解蛋白质并分泌抗菌肽的酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:该载体中含有酿酒酵母菌的25S rDNA基因片段,其碱基序列如SEQ ID NO:14所示。
7.一种能辅助降解蛋白质并分泌抗菌肽的益生重组酿酒酵母,其特征在于,该重组酿酒酵母基因组中插入有权利要求1~6任一所述的多基因共表达载体。
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