[发明专利]IdeS蛋白酶(来自于酿脓链球菌)在自身免疫性疾病和移植排斥的治疗中的用途

说明书

本申请为分案申请，其原申请的申请日为2006年6月8日，申请号为 200680028126.3，名称为“IdeS蛋白酶(来自于酿脓链球菌)在自身免疫性疾病和移植排斥 的治疗中的用途”。

技术领域

本发明涉及一种治疗或预防由IgG抗体介导的疾病或病症的方法，所述疾病或病 症例如自身免疫性疾病、移植排斥、手术后治疗和后天性血友病。

背景技术

IdeS(酿脓链球菌(S.pyogenes)免疫球蛋白G降解酶)是人类病原菌酿脓链球菌产 生的胞外半胱氨酸蛋白酶。IdeS最初是从血清型为M1的A组链球菌菌株中被分离得到，但是 现在已经在所有的A组链球菌菌株中都识别到了ides基因。IdeS具有极高水平的底物特异 性，并且确定的底物仅有IgG一种。IdeS催化人IgG的低绞链区中的单溶蛋白性裂解。所述蛋 白水解性降解可以启动调理吞噬的抑制并且干扰A组链球菌的杀灭。IdeS也可以切割多种 动物的IgG的某些亚类，并且可以有效地将IgG变成Fc和Fab片段。所述ides基因已经被克隆 并且作为GST融合蛋白在E.coli中表达。

发明内容

本发明人证实了IdeS对于由IgG抗体介导的疾病的治疗和预防是有效的。具体地， 本发明人证实了IdeS可以被用于治疗类风湿性关节炎(RA)。对被诱发类风湿关节炎的小鼠 给予IdeS没有观察到毒性作用，并且该给药完全阻断了类风湿性关节炎的发生。而且，本发 明人证实IdeS的效力很强，并且IdeS具有局部效应。

因此根据本发明，可以提供IdeS多肽或者编码IdeS多肽的多核苷酸在制备用于治 疗或预防由IgG抗体介导的疾病或病症的药物中的用途。

本发明还提供了：

-一种对需要治疗或预防的受试者受试者进行的治疗或预防由IgG抗体介导的疾 病或病症的方法，所述方法包括对所述受试者给予治疗有效量的IdeS多肽或者编码IdeS多 肽的多核苷酸；和

-一种处理离体血液的方法，所述血液取自患有由IgG抗体介导的疾病或病症的患 者，所述方法包括使所述血液与IdeS多肽相接触。

附图说明

图1显示接受IdeS处理的小鼠和对照小鼠的关节炎的发病率(a)和严重度(b)。在 时间0时注射抗-CⅡ抗体。在所述抗体转移的3小时前(n＝5)或者3小时之后(n＝5)用IdeS (0.950mg/每只小鼠/i.v.)的PBS溶液对小鼠静脉注射，或者不经过任何处理(n＝6)。在第5 天，用LPS(25μg/每只小鼠/i.p.)注射所有小鼠。在15天内每天检测小鼠关节炎的发生。所 有小鼠都被用于计算。n表示在实验中使用的小鼠的数量。从所述动物取血清和爪样本。

图2显示爪的组织病理学切片，所述爪取自如图1所述的对照小鼠(a和c)和接受 IdeS处理的小鼠(b和d)。在实验的第15天收集小鼠的爪。在4℃下，后爪用4％的磷酸盐缓冲 的多聚甲醛溶液(pH7.4)固定24小时，之后在乙二胺四乙酸溶液中脱钙4周，所述乙二胺四 乙酸溶液含聚乙烯吡咯烷酮和0.1M的Tris(pH6.95)，之后进行脱水并用石蜡包埋。用苏木 精和伊红染色6μm厚的切片。显示的结果代表从每组中的三只小鼠获得的样品。原始放大倍 数是20倍。

图3显示接受各种不同剂量IdeS处理的小鼠和对照小鼠中的关节炎的发病率(a) 和严重度(b)。在第0天的0小时，四个月的雄性B10.RⅢ小鼠组经静脉注射9mg的CⅡ特异性 单克隆抗体M2139和CⅡC1。在同一天的3个小时后，用含有0μg(n＝7)、10μg(n＝5)、100μg(n ＝5)和1000μg(n＝5)的IdeS的PBS溶液进行静脉注射。在第5天，所有的小鼠接受LPS(25μg/ i.p.)处理。n表示每组中小鼠的数量。误差条表示平均值±SEM。所有的小鼠都被用于计算。

图4显示全身地和局部地接受IdeS处理的小鼠和对照小鼠中的关节炎的发病率 (a)和严重度(b)。在第0天的0小时，B10.RⅢ小鼠组经静脉注射9mg的关节炎源抗-CⅡIgG2a 单克隆抗体混合物。用100μg的IdeS全身性地(i.v.)(n＝4)或局部地(对左爪或者右爪)处 理小鼠。所述接受局部处理的小鼠或者在抗-CⅡ抗体转移(n＝6)后的3小时后或者在抗-C Ⅱ抗体转移后(n-6)的3小时和24小时被给予IdeS。

序列表说明