[发明专利]一种精制促皮质素的方法

权利要求书

1.一种精制促皮质素的方法，其特征在于：（1）将脑垂体前叶干粉，用酸溶液提取；（2）将提取液经交联羧甲基纤维素与阴阳离子交换树脂，吸附和洗脱；（3）冻干，得到促皮质素。

2.根据权利要求1，一种精制促皮质素精制促皮质素的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1）提取：将脑垂体前叶干粉，加入酸溶液中，搅拌，调pH为1.0~3.0，加热使温度达65~85℃，速冷至25℃以下，过滤，滤液调节pH2.0~4.0，过滤至澄清，得提取液，在2~10℃下保存；

（2）吸附：将提取液调pH2.5~3.5后，加入吐温-80和交联羧甲基纤维素，搅拌吸附，静置；

（3）洗脱：虹吸除去上清液，过滤，收集滤饼，先用酸溶液和水洗涤，再用酸溶液洗脱，合并滤液；

（4）精制：加入阴离子交换树脂，过滤，树脂用酸溶液洗涤，合并滤液，调 pH为2.0~4.0，静置10~15小时；

（5）二次吸附：将洗脱液中加入吐温-80，搅匀后加入交联羧甲基纤维素，搅拌吸附，冷藏10~15小时；

（6）二次洗脱：虹吸除去上清液，用4号垂熔漏斗过滤，收集滤饼，分别用酸溶液和水洗涤，抽干，加入醋酸铵溶液，搅拌，过滤，水洗1~3次，再加醋酸铵溶液，搅拌，过滤后用水洗涤1~3次；用盐酸溶液搅拌洗脱1~3小时，过滤，洗涤，洗液并入洗脱液中；

（7）二次精制：洗脱液中加入阴离子交换树脂，调节 pH为3~5，过滤，用酸溶液洗树脂1次，洗涤液与滤液合并，加阳离子交换树脂，pH调到2~4，过滤，用酸溶液洗树脂1次，洗涤液并入滤液中，冷冻干燥，即得精制促皮质素。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，加入的酸溶液是预热到45~65℃的0.1~1mol/L的醋酸溶液，加入酸溶液的体积与脑垂体前叶干粉重量的比是10/1~30/1（L/Kg）；第一次调pH用40%~60%硫酸溶液调pH1.5~2.5，第二次调pH用5%~20%氢氧化钠液调pH为2.5~3.5。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，滤渣要加入0.1~1mol/L醋酸溶液，并用40%~60%硫酸溶液，调pH至1.5~2.5，加热至70~80℃，保温5分钟，速冷至20℃以下，过滤，滤液在2~10℃下保存。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（2）中，交联羧甲基纤维素的重量与脑垂体前叶干粉的重量比是1/10~4/10（g/g）,交联羧甲基纤维素的重量与吐温-80的体积比是4/1~6/1（g/mL）；在2~10℃下搅拌吸附10~15小时，静置10~15小时。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（３）中，先用0.05~0.5mol/L醋酸溶液洗涤1~3次，再用0.1~0.3mol/L盐酸溶液洗脱。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（4）中，加入阴离子交换树脂与脑垂体前叶干粉重量比为1:1~3:1（g/g），在2~5分钟内调节pH2.0~4.0；树脂用0.05~0.5mol/L醋酸溶液洗涤；用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节pH2.5~3.5。

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（5）中，交联羧甲基纤维素的重量与脑垂体前叶干粉的重量比是1/100~5/100（g/g）,交联羧甲基纤维素的重量与吐温-80的体积比是2/1~5/1（g/mL）；在1-5℃搅拌吸附10~15h。

9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（6）中，用0.05~0.5mol/L醋酸溶液洗涤；第一次加入pH4~5.5的0.001~0.1mol/L醋酸铵溶液，第二次加入pH6.0~7.5的0.05~0.5mol/L醋酸铵溶液；盐酸溶液的浓度是0.1~0.5mol/L。

10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（7）中，阴离子交换树脂与脑垂体前叶干粉的重量比为1/10~5/10（g/g）；阳离子交换树脂与脑垂体前叶干粉的重量比为5/100~10/100（g/g）；酸溶液为0.05~0.5mol/L醋酸溶液。