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[发明专利]热带无爪螨重组变应原Blot5-21、其制备方法及过敏小鼠模型的建立-CN201710578996.8有效
发明人： 裴业春;肖正泮;王大勇 -专利权人：海南大学
申请日： 2017-07-17 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及热带无爪螨重组变应原Blot5‑21、其制备方法及过敏小鼠模型的建立。本发明制备纯化出具有天然免疫活性的热带无爪螨重组变应原Blot5‑21，该重组变应原以可溶蛋白形式表达，表达量高，且通过镍柱层析就能得到高纯度的重组变应原Blo t 5‑21蛋白，实现热带无爪螨变应原的标准化，可作为对热带无爪螨过敏患者诊断和特异性免疫治疗的候选分子。本发明利用纯化后的rBlo t 5‑21蛋白对BALB/c小鼠进行过敏模型诱导，建立小鼠过敏模型，为研究热带螨过敏的预防与治疗性疫苗或者药物提供了动物模型，同时，也为热带无爪螨与其他过敏原的交叉致敏反应的研究奠定了基础。
热带无爪螨重组变应原 blot5 21 制备方法过敏小鼠模型建立

[发明专利]具备较强抗凝血活性的医蛭基因突变水蛭素及其制备方法-CN202110840069.5在审
发明人：王大勇;孙艳;王葆春;王大欣;裴业春;韦双双;闵义;请求不公布姓名;请求不公布姓名;请求不公布姓名 -专利权人：王大勇
申请日： 2021-07-24 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C07K14/815 文献下载
摘要：在分子动力学（MD）蛋白质结合力分析、分子生物学以及药理学筛选基础上，本专利制备了医蛭（Hirudo medicinalis）基因突变水蛭素（HV1）HV1‑E62D‑Y63D‑L64D以及HV1‑E62D‑L64D。药效分析实验表明，HV1‑E62D‑Y63D‑L64D以及HV1‑E62D‑L64D具备优于野生型基因重组HV1的抗凝血活性。本发明专利说明书详细介绍了以上医蛭基因突变水蛭素HV1‑E62D‑Y63D‑L64D以及HV1‑E62D‑L64D以及它们的制备方法和药理学作用。
具备抗凝活性基因突变水蛭及其制备方法

[发明专利]一种表达促皮质素与胰岛素样生长因子1融合蛋白的重组质粒、重组菌的构建方法-CN202110624088.4在审
发明人：王大勇;黄永林;裴业春 -专利权人：海南大学
申请日： 2017-11-04 - 公布日： 2021-08-06 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种表达促皮质素与胰岛素样生长因子1融合蛋白的重组质粒、重组菌的构建方法。本发明采用适合在工程菌中表达的优化密码子，构建编码ACTH与IGF‑1融合蛋白的表达质粒：HisTag‑linker‑EKst‑ACTHIGF‑1pET30a质粒。在大肠杆菌表达菌株BL21‑DE3中诱导表达后，用镍柱从破碎溶解的包涵体中分离纯化出HisTag‑linker‑EKst‑ACTH‑IGF‑1多肽链，之后用带有组氨酸标签的肠激酶切下HisTag‑linker‑EKst片段，然后再用Ni柱除去肠激酶和HisTag‑linker‑EKst片段，得到ACTH‑IGF‑1融合蛋白。
一种表达皮质胰岛素生长因子融合蛋白重组质粒构建方法

[发明专利]神经坏死病毒MCP与鮰爱德华氏菌ompN1的融合蛋白及其制备方法-CN201910407330.5在审
发明人：王大勇;张转丹;裴业春 -专利权人：王大勇
申请日： 2019-05-16 - 公布日： 2020-10-16 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：现有商品化鱼类神经坏死病毒疫苗须经注射接种。本发明涉及一种神经坏死病毒（Nervous necrosis virus）主要外壳蛋白（MCP）与鮰爱德华氏菌（Edwarsiella ictaluri）中具有跨膜作用的外膜蛋白1（ompN1）的基因重组融合蛋白MCP‑ompN1，及其表达和制备方法。MCP与ompN1蛋白通过四个氨基酸“GGGS”构成的序列柔性连接。本发明首先针对BL21‑DE3工程菌株的密码子偏好性对编码MCP‑ompN1的核苷酸序列加以优化，然后构建表达质粒并在BL21‑DE3菌株中表达，再经过菌体破碎，包涵体处理，蛋白质复性，镍柱纯化，用生物素标记的凝血酶切除组蛋白标签，利用亲和素树脂除掉凝血酶等步骤分离纯化出MCP‑ompN1融合蛋白。基因重组MCP‑ompN1融合蛋白可作为神经坏死病毒疫苗抗原、或神经坏死病毒与鮰爱德华氏菌疫苗抗原，其中的ompN1蛋白介导黏膜免疫作用。
神经坏死病毒 mcp 爱德华 ompn1 融合蛋白及其制备方法

[发明专利]促皮质素与胰岛素样生长因子1融合蛋白及其制备方法-CN201711074686.9在审
发明人：王大勇;黄永林;裴业春 -专利权人：海南大学
申请日： 2017-11-04 - 公布日： 2018-04-06 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种基因重组人促皮质素(ACTH)与胰岛素样生长因子1(IGF‑1)融合蛋白及其制备方法。本发明首先采用适合在工程菌中表达的优化密码子，构建了编码ACTH与IGF‑1融合蛋白的表达质粒HisTag‑linker‑EKst‑ACTH‑IGF‑1 pET30a质粒，编码序列(CDS)中包含组氨酸标签(HisTag)序列、连接序列(linker)、肠激酶底物(EKst)序列以及ACTH和IGF‑1序列。在大肠杆菌表达菌株BL21‑DE3中诱导表达后，用镍(Ni)柱从破碎溶解的包涵体中分离纯化出HisTag‑linker‑EKst‑ACTH‑IGF‑1多肽链，之后用带有组氨酸标签的肠激酶切下HisTag‑linker‑EKst片段，然后再用Ni柱除去肠激酶和HisTag‑linker‑EKst片段，得到ACTH‑IGF‑1融合蛋白。
皮质胰岛素生长因子融合蛋白及其制备方法

[发明专利]一种基因重组长效人促肾上腺皮质激素及其制备方法-CN201610083772.5在审
发明人：王大勇;黄永林;裴业春 -专利权人：王大勇;黄永林;裴业春
申请日： 2016-02-13 - 公布日： 2016-06-15 - 主分类号： C07K14/695 文献下载
摘要：本发明说明书描述了N端第5位谷氨酸(E)突变为天冬氨酸(D)的突变型人促肾上腺皮质激素(简称ACTH(E5D))及其制备工艺。在大肠杆菌中表达ACTH(E5D)组氨酸标签融合蛋白以后，经过Ni柱初步纯化，肠激酶切除多余氨基酸序列，以及凝胶过滤方法制备。体内外实验表明，ACTH(E5D)在血液中的稳定性高于野生型ACTH，并且在相同剂量和相同给药时间条件下的生理活性与野生型ACTH相当。
一种基因重组长效肾上腺皮质激素及其制备方法

[发明专利]一种展示重组猫致敏原rFel d 1蛋白的免疫增强型病毒样颗粒、其表达载体及其制备与应用-CN201510758445.0在审
发明人： 裴业春;安晓荣;侯健;王大勇 -专利权人：海南大学
申请日： 2015-11-10 - 公布日： 2016-01-06 - 主分类号： C12N7/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种展示重组猫致敏原rFel d 1蛋白的免疫增强型病毒样颗粒、其表达载体及其制备与应用。构成所述病毒样颗粒的蛋白质亚基为乙肝病毒核心抗原与氨基酸序列为SEQ ID NO:1的多肽的融合蛋白，其中，所述融合蛋白的氨基酸序列为所述SEQ ID NO:1的多肽序列插入乙肝病毒核心抗原第78-81位氨基酸之间，并替换掉所述乙肝病毒核心抗原第79-80位的氨基酸序列所得；本发明提供的HBcAg-rFel d 1融合蛋白可显著提高rFel d 1的免疫原性，进而提高体外重组表达的rFel d 1在体外诊断猫过敏症应用中的检测灵敏度。
一种展示重组猫致敏原 rfel 蛋白免疫增强病毒颗粒表达载体及其制备应用