[发明专利]一种提取食用植物油中残留蛋白的方法在审
| 申请号： | 201410124871.4 | 申请日： | 2014-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN103992370A | 公开（公告）日： | 2014-08-20 |
| 发明（设计）人： | 王伟;吴晓林;熊二辉 | 申请（专利权）人： | 河南农业大学 |
| 主分类号： | C07K1/30 | 分类号： | C07K1/30;C07K1/14 |
| 代理公司： | 郑州中原专利事务所有限公司 41109 | 代理人： | 乔玉萍 |
| 地址： | 450000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提取 食用植物油 残留 蛋白 方法 | ||
1.一种提取食用植物油中残留蛋白的方法，其特征在于：它由以下步骤组成：
（1）向离心管中加入36～44ml食用油和9~11ml提取液混合均匀；
（2）将步骤（1）得到的食用油和提取液的混合液以8000～12000g的离心力离心4～6 min；
（3）取步骤（2）离心后的食用油和提取液的混合液的下层水相，加入2.5～3.5 ml 50%TCA，充分混合后，冰浴15～25 min；
（4）将步骤（3）得到的下层水相和TCA的混合物以8000～12000g的离心力离心8～12 min；
（5）将步骤（4）离心后的下层水相和TCA的混合物弃上清，加入1.5～2.5 ml 80%冷丙酮冲洗沉淀，回收沉淀；
（6）将步骤（5）得到的冷丙酮冲洗的沉淀以10000～14000g的离心力离心4～6 min，离心后弃上清，得蛋白质沉淀；
（7）室温晾干步骤（6）得到蛋白质沉淀。
2.根据权利要求1所述的提取食用植物油中残留蛋白的方法，其特征在于：它由以下步骤组成：
（1）向离心管中加入38～42ml食用油和9.5~10.5ml提取液混合均匀；
（2）将步骤（1）得到的食用油和提取液的混合液以9000～11000g的离心力离心4.5～5.5min；
（3）取步骤（2）离心后的食用油和提取液的混合液的下层水相，加入2.75～3.25 ml 50%TCA，充分混合后，冰浴17.5～22.5 min；
（4）将步骤（3）得到的下层水相和TCA的混合物以9000～11000g的离心力离心9～11 min；
（5）将步骤（4）离心后的下层水相和TCA的混合物弃上清，加入1.75～2.25 ml 80%冷丙酮冲洗沉淀，回收沉淀；
（6）将步骤（5）得到的冷丙酮冲洗的沉淀以11000～13000g的离心力离心4.5～5.5 min，离心后弃上清，得蛋白质沉淀；
（7）室温晾干步骤（6）得到蛋白质沉淀。
3.根据权利要求1或2所述的提取食用植物油中残留蛋白的方法，其特征在于：它由以下步骤组成：
（1）向离心管中加入40ml食用油和10ml提取液混合均匀；
（2）将步骤（1）得到的食用油和提取液的混合液以10000g的离心力离心5min；
（3）取步骤（2）离心后的食用油和提取液的混合液的下层水相，加入3 ml 50%TCA，充分混合后，冰浴20 min；
（4）将步骤（3）得到的下层水相和TCA的混合物以10000g的离心力离心10 min；
（5）将步骤（4）离心后的下层水相和TCA的混合物弃上清，加入2 ml 80%冷丙酮冲洗沉淀，回收沉淀；
（6）将步骤（5）得到的冷丙酮冲洗的沉淀以12000 g的离心力离心5min，离心后弃上清，得蛋白质沉淀；
（7）室温晾干步骤（6）得到蛋白质沉淀。
4.根据权利要求1或2或3所述的提取食用植物油中残留蛋白的方法，其特征在于：所述提取液由0.2% SDS, pH 7.5，0.1 mol/L Tris-HCl, 0.5 mol/L NaCl,10 mmol/L DTT组成。
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