[发明专利]鲍鱼多糖、脂质和蛋白肽的联产制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鲍鱼多糖、脂质和蛋白肽的联产制备方法，具体地说涉及一种采用控制酶解法、膜分离法和冷冻结晶法达到从鲍鱼内脏中提取鲍鱼多糖、脂质和蛋白肽的方法。 

背景技术

鲍鱼是名贵的海产品，营养丰富，富含精氨酸、丙氨酸、谷氨酸，维生素 E 和微量元素及其他生理活性物质，对维持机体酸碱平衡、神经肌肉的兴奋方面具有重要作用。2012年我国鲍鱼年产量已经达到8万吨，而且顺应市场发展的需要，鲍鱼加工业也开始出现蓬勃发展的趋势，在加工过程中必然会产生约占鲍鱼1/4的内脏副产物，但目前鲍鱼内脏主要被用来生产饲料、调味料等低附加值产品，严重浪费宝贵的鲍鱼资源。 

鲍鱼多糖与人体细胞有良好的生物兼容性，无细胞毒性且可被生物体分解，并且具有一定的抗氧化活性、抗血凝活性、抗血栓及抗疲劳活性、具有显著的免疫调节以及抗肿瘤等生物学活性。鲍鱼蛋白肽对乙醇等引起的记忆损害具有明显的改善作用，能显著提高机体的运动耐力、免疫功能和抗应激能力。由于鲍鱼内脏与鲍鱼肌肉类似，富含多糖、蛋白和脂质，因此在鲍鱼多糖提取过程中容易发生美拉德反应，产品颜色将出现棕色(专利申请号：200510047409.X)，鲍鱼蛋白肽的颜色将发黄，而且国内外学者大都注重鲍鱼多糖的提取，忽视了对鲍鱼蛋白肽和脂质的提取与利用，鲍鱼内脏的经济价值和功能没有得到最大体现。 

因此，本发明根据鲍鱼内脏中的多糖、脂质和蛋白的特性，利用酶解法结合膜分离方法提取制备鲍鱼多糖、脂质和蛋白肽，实现鲍鱼加工生产企业废弃物有效利用，提高企业的经济效益。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种原料利用率高、生产成本较低的鲍鱼多糖、脂质和蛋白肽的联产制备方法，它是以鲍鱼内脏为原料，主要通过酶解技术结合膜分离技术以及冷冻结晶方法同时提取制备鲍鱼多糖、鲍鱼脂质和鲍鱼蛋白肽。 

为了实现上述目的，本发明的技术方案是： 

本发明是一种鲍鱼多糖、脂质和蛋白肽的联产制备方法，它包括以下步骤：(1) 酶解：将清洗干净的鲍鱼内脏加入等重量的纯净水，用碱调pH至8.0-9.0，加入复合蛋白酶A，在45-55°C下搅拌保温酶解3-6小时后，用酸调pH至5.0-7.0，加入复合蛋白酶B，在45-55°C下搅拌保温酶解3-6小时，过滤去除不溶性物质，获得鲍鱼内脏酶解液；(2) 膜分离：鲍鱼内脏酶解液用超滤膜进行分离，得到浓缩液和透析液；所述的浓缩液为被超滤膜截留住的酶解液，透析液为透过超滤膜的酶解液；(3) 鲍鱼多糖和脂质的分离：将步骤(2)中获得的浓缩液加入其体积3-4倍的重量浓度为95%以上的酒精，在室温下静置沉淀8-12小时通过离心获得多糖沉淀和脂质上清液；(4) 鲍鱼多糖的制备：在步骤(3)中获得的多糖中加入重量沉淀3-5倍的纯净水溶解，然后将pH调至10-12，加入溶液重量的0.5-2%氧化剂，在4-10°C下静置12-24小时，过滤，将滤液的pH调整至5-6，加入其体积3-4倍的重量浓度为95%以上的酒精，在室温下静置沉淀8-12小时，收集沉淀物，通过常压干燥获得鲍鱼多糖；(5)鲍鱼脂质的制备：将步骤(3)中获得的脂质上清液经过冷冻结晶后，去掉酒精溶液，获得凝固的鲍鱼脂质； (6) 鲍鱼蛋白肽的制备：将步骤(2)中获得的透析液用活性炭和树脂进行脱色后，通过喷雾干燥制备成鲍鱼蛋白肽。

在步骤(1)中，所用的复合蛋白酶A为：胰蛋白酶和胶原蛋白酶的任一种或组合；复合蛋白酶A的添加量为原料重量的0.1-2%。 

在步骤(1)中，所述的复合蛋白酶B为：中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶中的任一种或组合；复合蛋白酶B的添加量为原料重量的0.1-2%。 

在步骤(2)中，所述的超滤膜的规格为：截留分子量为5000-20000道尔顿。 

在步骤(3)中，所述的离心条件：转速为4000-6000rpm，温度为室温。 

在步骤(4)中，所述的氧化剂为双氧水、次氯酸钠、次氯酸钾、过碳酸钠、过硼酸钠或过硼酸钾中的一种。 

在步骤(4)中，所述的干燥温度为50-70°C。 

在步骤(5)中，所述的冷冻结晶条件为：在-20°C至-40°C下静置12-24小时。